蛋黃卵磷脂的制備

1、項目三：蛋黃卵磷脂的制備 姓名：朱 鵬 飛 學(xué)號：2012040941 組別： 7 組 班級：生物技術(shù)1211,目錄：一、蛋黃卵磷脂的相關(guān)知識二、蛋黃卵磷脂的制備三、蛋黃卵磷脂的檢測四、卵磷脂在生活中的價值與應(yīng)用,一、蛋黃卵磷脂的相關(guān)知識磷脂最早是由Uauquelin于1812年

2、從人腦中發(fā)現(xiàn)，Golbley于1844年從蛋黃中分離出來，并于1850年按照希臘文lekithos（蛋黃）命名為Lecithin（卵磷脂）,所以又稱為蛋黃素，并以希臘文命名為Lecithos（卵磷脂）。卵磷脂屬于一種混合物，是存在于動植物組織以及卵黃之中的一組黃褐色的油脂性物質(zhì)，卵磷脂是生物膜的重要組分,其構(gòu)成成分包括磷酸、膽堿、脂肪酸、甘油、糖脂、甘油三酸酯以及磷脂。卵磷脂被譽(yù)為與蛋白質(zhì)、維生素并列的“第三營養(yǎng)素”。蛋黃中含有豐富

3、的卵磷脂，牛奶、動物的腦、骨髓、心臟、肺臟、肝臟、腎臟以及大豆和酵母中都含有卵磷脂。其中又以屬蛋黃、大豆和動物肝臟的含量最高，雞蛋中的卵磷脂品質(zhì)最高，但是難以提取，這使得其價格堪與黃金相媲美。,,二、蛋黃卵磷脂的制備制取蛋黃卵磷脂的方法有很多，有有機(jī)溶劑法，無機(jī)鹽復(fù)合沉淀法，乙酸乙酯純化法，超臨界CO2萃取法等，這里著重介紹有機(jī)溶劑法1、實驗原理有機(jī)溶劑法是根據(jù)蛋黃中各組分在溶劑中的溶解度不同而進(jìn)行分離的。室溫下,取10mL

4、新鮮蛋黃用兩倍體積的乙醇進(jìn)行提取,混合攪拌,離心(3000r/min)5min,將沉淀物重復(fù)抽提幾次后,取上清液,60℃蒸餾至近干,加入丙酮,分離沉淀物,真空干燥30min,得到淡黃色粗制卵磷脂,稱重.,2、實驗流程,3、原料、試劑、儀器與器材原料：熟雞蛋一個試劑：95%乙醇溶液、丙酮溶液、乙醚儀器與器材：燒杯、研缽、布氏漏斗、玻璃棒、量杯、真空干燥箱、電爐、蒸發(fā)皿,4、操作步驟（1）取新鮮雞蛋一只，除去蛋清取其蛋黃，加入

5、20ml95%乙醇混合攪拌，4000rpm,離心10min,回收上清液，將沉淀物反復(fù)提取三次，抽濾回收上清液，合并二次濾液（2）濾液進(jìn)行減壓蒸餾至近干，得到黃色油狀物，用石油醚洗下油狀物，加丙酮分離沉淀物，及粗卵磷脂（3）按20g卵磷脂：250ml無水乙醇，溶解粗卵磷脂，滴加60%ZnCl2沉淀卵磷脂，直至不產(chǎn)生沉淀，抽濾（4）加10ml左右冰丙酮洗滌攪拌，至丙酮溶液為近無色，抽濾得到白色蠟狀精制卵磷脂,,三、蛋黃卵磷脂的檢測

6、 檢測卵磷脂的方法有檢測水解產(chǎn)物、薄層層析法、和紫外光吸收光譜法，這里重要介紹檢測水解產(chǎn)物和薄層層析法1、檢測水解產(chǎn)物法檢測原理：卵磷脂可在堿性溶液中加熱水解，得到甘油、脂肪酸、膦酸和膽酸。（1）水解：在卵磷脂中加入20%氫氧化鈉溶液并在沸水浴中水解，冷卻過濾，得到白色沉淀。（2）脂肪酸的檢測：沉淀中加入水，并加入硝酸后用膠頭滴管加入兩滴10%醋酸鉛，觀察清液變渾濁，液體中有絮狀物出現(xiàn)（3）甘油的檢測：取一支試

7、管，加入1%CuSO4 1滴于試管中，滴加2滴20%NaOH溶液，振搖，溶液呈藍(lán)色，有些許絮狀物，加入1mL水解液，振搖，溶液稍許渾濁，顏色變深。（4）膽堿的檢查：加入1mL水解液于試管中，滴加硫酸酸化，以pH試紙試之，加入1滴碘化鉍鉀溶液，觀察得溶液呈淡黃色且有絮狀物。,2、薄層層析法含義：薄層層析是將吸附劑或者支持劑（有時加入固化劑）均勻地鋪在一塊玻璃上，形成薄層。把欲分離的樣品點在薄層上，然后用適宜的溶劑展開，使混合物得以分離

8、的方法。由于層析在薄層上進(jìn)行故而得名。（1）制板稱取20 g 孔徑為6 nm 的硅膠60, 用45mL 1- 1mol?L 的碳酸鈉溶液稀釋, 置于研缽中研磨, 調(diào)成均勻的糊狀物, 涂布器將糊狀物均勻地鋪在玻璃板上, 鋪完后于室溫下風(fēng)干, 使用前在110 ℃烘箱中活化。（2）點樣用毛細(xì)管在層析板距下端2. 5 cm 處點兩個樣,自制卵磷脂樣品和標(biāo)準(zhǔn)品, 樣點的間距為3 cm。,（3）展開 將展開劑置于層析缸中平衡30m in,

9、 使溶劑的蒸汽壓在層析缸中達(dá)到平衡, 然后放入層析板, 溶液自下而上在層析板上展開, 上升速度約6 cm/h 當(dāng)展開到層析板高度的3/4 處即可取出, 置室溫下干燥。（4）顯色將顯色劑均勻地噴霧在層析板上, 可立即看到有藍(lán)色斑點出現(xiàn),,四、卵磷脂在生活中的價值與應(yīng)用 目前市場上的卵磷脂多是從大豆中提取，工業(yè)用卵磷脂的劑型主要有：液體、顆粒、粉末三種，液體濃度在70%左右，顆粒及粉末可達(dá)95%以上。卵磷脂軟膠囊是以液體

10、卵磷脂為原料加入甘油或大豆油稀釋后，用明膠包裹而成，有效成分含量低一般少于60%，價格較低，是大部分品牌卵磷脂采用的劑型。它的功效有：（1）人體營養(yǎng)需要人體所需的外源性膽堿90%是由卵磷脂提供，當(dāng)膳食膽堿不足時，體內(nèi)尚存卵磷脂的內(nèi)源資源即也可補(bǔ)充人體需要（2）對血清脂質(zhì)的調(diào)節(jié)作用調(diào)節(jié)血清脂質(zhì)水平意味著能降低膽固醇水平，保護(hù)肝臟，也能改善記憶力，加強(qiáng)免疫力以及抗脂肪肝的活力。（3）有助于胞囊纖維變性時對脂肪的吸收胞囊纖維變性

11、是一種外分泌腺失調(diào)，一般都是因為體內(nèi)脂質(zhì)有限，胰脂酶，膽汁鹽和碳酸氫鈉存量不足引起。胞囊纖維變性嚴(yán)重影響脂肪的吸收，攝入脂肪有,30%-60%吸收不良，因而會造成脂肪痢。溶血磷脂酰膽堿能使攝入脂肪移位，將甘油一酯及脂肪酸在低共熔基質(zhì)中相結(jié)合。在有碳酸氫鈉離子及膽汁鹽情況下，變得容易吸收。（4）健康心臟證實卵磷脂對心臟健康有積極作用，因為它能調(diào)節(jié)膽固醇在人體內(nèi)的含量、有效降低膽固醇、高血脂及冠心病的發(fā)病率。（5）有益大腦，增強(qiáng)記憶力

12、，延緩衰老腦神經(jīng)細(xì)胞中卵磷脂的含量約占其質(zhì)量的17%-20%。卵磷脂的充分供應(yīng)保證充分的“膽堿”與人體內(nèi)的“乙?！焙铣蔀椤耙阴Ｄ憠A”，“乙酰膽堿”是大腦內(nèi)的一種信息傳導(dǎo)物質(zhì)，腦部的神經(jīng)傳導(dǎo)物質(zhì)（乙酰膽堿）減少是引起老年癡呆的主要原因，補(bǔ)充卵磷脂能提高腦細(xì)胞的活性化程度，提高記憶與智力水平。長期補(bǔ)充卵磷脂可以減緩記憶力衰退的進(jìn)程，預(yù)防或推遲老年癡呆的發(fā)生。（6）滋潤皮膚卵磷脂是人體每一個細(xì)胞不可缺少的物質(zhì)，如果缺乏，就會降低皮膚細(xì)胞

13、的再生,能力。卵磷脂是一種天然的解毒劑，它能分解體內(nèi)過多的毒素，并經(jīng)肝臟和腎臟的處理排出體外，正常人體內(nèi)含有許多毒素，特別是在腸道內(nèi)，當(dāng)這些毒素含量過高時，便會隨著血液循環(huán)沉積在皮膚上，從而形成色斑或青春痘。再加上卵磷脂良好的親水性和親油性，缺乏會導(dǎo)致皮膚粗糙、有皺紋。另外，卵磷脂所含的肌醇還是毛發(fā)的主要營養(yǎng)物，能抑制脫發(fā)，使白發(fā)慢慢變黑。（7）調(diào)劑心理社會競爭日趨激烈，人們長期處在緊張的環(huán)境和種種壓力下，常患有焦慮、急躁、易怒、失

14、眠、耳鳴等癥，即植物神經(jīng)紊亂，通常被稱為神經(jīng)衰弱。經(jīng)常補(bǔ)充卵磷脂，可使大腦神經(jīng)及時得到營養(yǎng)補(bǔ)充，保持健康的工作狀態(tài)，利于消除疲勞，激化腦細(xì)胞，改善因神經(jīng)緊張而引起的急躁、易怒、失眠等癥。另外，吸煙的人應(yīng)該多多的補(bǔ)充卵磷脂。因為有這些生物學(xué)功能，常有以下的應(yīng)用保護(hù)肝臟健康心臟,促進(jìn)大腦發(fā)育，增強(qiáng)記憶力，預(yù)防老年癡呆癥 血管的“清道夫” 糖尿病患者的營養(yǎng)品（卵磷脂不足會使胰臟機(jī)能下降，無法分泌充分的胰島素，不能有效地將血液中的葡

15、萄糖運送到細(xì)胞中，這是導(dǎo)致糖尿病的基本原因之一。）有效地化解膽結(jié)石（體內(nèi)過多的膽固醇會發(fā)生沉淀，從而形成膽結(jié)石，膽結(jié)石90%是由膽固醇組成。）胎、嬰兒神經(jīng)發(fā)育的必需品（人體腦細(xì)胞約有150億個，其中70%早在母體中形成。嬰幼兒時期是大腦形成發(fā)育最關(guān)鍵時期，卵磷脂可以促進(jìn)大腦神經(jīng)系統(tǒng)與腦容積的增長、發(fā)育。為了促進(jìn)胎兒腦細(xì)胞能健康發(fā)育，孕婦補(bǔ)充足夠的卵磷脂是很重要的。）消除青春痘、雀斑并滋潤皮膚卵磷脂可以促進(jìn)腸胃血液循環(huán)及腸胃蠕動，