低濃度尼古丁-膠原膜緩釋微粒系統(tǒng)促進(jìn)大鼠硬腭黏膜創(chuàng)傷愈合的研究.pdf

1、背景與目的：
　　口腔是人體器官和外界環(huán)境接觸的通道，又是咀嚼、言語(yǔ)、呼吸、吮吸和吞咽的場(chǎng)所。而口腔中黏膜主要由咀嚼黏膜、被覆黏膜和特殊黏膜構(gòu)成，這些黏膜是構(gòu)成防止外界的不良刺激和創(chuàng)傷的有效屏障。如果這些上皮黏膜完整性遭到破壞，就會(huì)給患者帶來(lái)吞咽、咀嚼和言語(yǔ)等功能性障礙，同時(shí)給患者的身心健康造成損害。近年來(lái)由于生活節(jié)奏的加快，工作和生活的雙重壓力給人們的身心以及口腔黏膜造成隱匿性的傷害；同時(shí)車禍、打架斗毆、不良修復(fù)體、咀嚼硬物以及

2、不良正畸附件都會(huì)給患者口腔黏膜造成創(chuàng)傷，輕者可引起黏膜潰瘍，重者可造成黏膜局部缺損，不僅給患者身體上帶來(lái)疼痛，還會(huì)造成功能性障礙。但是目前修復(fù)這些黏膜潰瘍和缺損創(chuàng)傷的方法主要以消炎止痛和抗感染為主，缺乏有效的促進(jìn)口腔黏膜創(chuàng)口愈合的藥物，因此尋求快速有效的促進(jìn)口腔黏膜創(chuàng)口愈合的藥物成為本課題組研究的重點(diǎn)。
　　研究證實(shí)各種生長(zhǎng)因子具有促進(jìn)創(chuàng)傷愈合的作用，但是生長(zhǎng)因子價(jià)格昂貴，而尼古丁價(jià)格相對(duì)低廉且易獲得。近期也有文獻(xiàn)報(bào)道，低濃度尼古

3、丁能夠促進(jìn)創(chuàng)口新生血管的形成，進(jìn)而加速糖尿病大鼠皮膚創(chuàng)口愈合。但是尼古丁在體內(nèi)代謝較快，口服、舌下含服難以維持藥效，所以本實(shí)驗(yàn)將采用緩釋的方法使尼古丁在創(chuàng)口處維持恒定的較低濃度；本課題組擬以聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）為載體材料合成低濃度尼古丁緩釋微粒，并以膠原膜為支架制備低濃度尼古丁/膠原膜緩釋微粒系統(tǒng)，尋求解決尼古丁在臨床使用中的弊端，為臨床加速頜面部以及口腔黏膜創(chuàng)傷修復(fù)尋找一種新思路。
　　試驗(yàn)方法：
　　實(shí)驗(yàn)一

4、：以尼古丁為原料，采用復(fù)乳-溶劑揮發(fā)法（w/o/w），以聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）為載體材料合成低濃度尼古丁緩釋微粒，測(cè)定其包埋率、載藥率以及體外釋放速率，并以膠原膜為支架制備低濃度尼古丁/膠原膜緩釋微粒系統(tǒng)。
　　實(shí)驗(yàn)二：取48只6-8周齡Wistar大鼠，將大鼠隨機(jī)分為低濃度尼古丁/膠原膜緩釋微粒組和空白膠原膜組，每組24只，用直徑為3mm的皮膚打孔器分別在大鼠上腭前部處作一圓形缺損模型，再將兩組大鼠分為0d、3d、7

5、d、10d四個(gè)亞組，每組分別于0d、3d、7d和10d處死6只，行HE染色，大體觀以及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析對(duì)比兩組大鼠上腭黏膜創(chuàng)口愈合的過(guò)程。
　　結(jié)果：
　　實(shí)驗(yàn)一：電鏡下尼古丁緩釋微粒大體觀呈現(xiàn)立體球形，大小均勻，球體表面粗糙，平均粒徑3.0±0.2um；制備3批尼古丁緩釋微粒測(cè)定其包封率和載藥率平均為50.2%和4.12%；體外釋放曲線表明第1天時(shí)緩釋微粒釋放量較大，第2天釋放量較小，從第3天尼古丁的釋放量趨于穩(wěn)定，且在一定的范

6、圍內(nèi)波動(dòng)，約在十天后急劇下降，3-10天尼古丁濃度在10-5-10-4mol/L波動(dòng)；電鏡下膠原膜纖維呈現(xiàn)三維疏松多孔型，交織成立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，網(wǎng)孔多為不規(guī)則的長(zhǎng)梭形，且孔隙交互貫通，電鏡下尼古丁緩釋微粒可充分進(jìn)入且均勻分散在膠原膜的孔隙中，微粒牢固嵌入其中。實(shí)驗(yàn)二：大體觀和組織學(xué)結(jié)果一致，大體觀術(shù)后3天時(shí)，通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)及數(shù)字圖像分析技術(shù)兩組創(chuàng)面愈合無(wú)顯著性差異；術(shù)后7天時(shí)尼古丁/膠原膜緩釋微粒組的創(chuàng)口愈合面積大于空白膠原膜組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義