簡青霉對有毒有害物質(zhì)的降解及其誘變選育的初步研究.pdf

1、酚類和苯胺類化合物是重要的化工原料和中間體,活性艷藍(RemazalBrilliant Blue R,簡稱RBBR)是一種蒽醌染料,它們在工業(yè)生產(chǎn)中都被廣泛應(yīng)用,并隨著工業(yè)廢水的排放進入水體、土壤中。由于它們化學性質(zhì)比較穩(wěn)定、殘效期長、毒性高,被認為是環(huán)境中主要的有機污染物。它們的生物危害性及在自然環(huán)境中的遷移、轉(zhuǎn)化與降解也一直是全世界研究的熱點。
　　 本課題利用簡青霉對幾種酚類和苯胺類物質(zhì)及活性艷藍進行了降解研究,為難降解有

2、機物的生物降解提供研究基礎(chǔ)。并先后采用物理誘變和化學誘變的方法對簡青霉進行了誘變研究,以期獲得產(chǎn)漆酶較高的菌株。
　　 首先在培養(yǎng)4 d的簡青霉培養(yǎng)體系中,分別加入不同濃度的酚類和苯胺類物質(zhì),觀察這些有毒物質(zhì)對簡青霉生長的影響,并研究簡青霉對這幾種有毒物質(zhì)的降解效果。同時,對液體培養(yǎng)條件下簡青霉產(chǎn)漆酶的能力進行了檢測。結(jié)果表明:低濃度的酚類和苯胺類物質(zhì)能促進簡青霉的生長,高濃度的這些物質(zhì)則對簡青霉的生長有一定的抑制作用。簡青霉對

3、酚類和苯胺類物質(zhì)的降解隨時間的變化與簡青霉的漆酶活性隨時間變化在整體趨勢上是一致的。同時簡青霉能夠很好地催化氧化苯酚,2,4-二氯苯酚和苯胺。當分別控制苯酚濃度為500μg·ml-1、2,4-二氯苯酚濃度為50μg·ml-1、苯胺的濃度為1000μg·ml-1時,簡青霉對它們的降解率都接近100％。在2,4-二氯苯酚濃度為60-125μg·ml-1、苯胺濃度為2000-5000μg·ml-1時,簡青霉對它們的降解率分別達到60％、65％

4、以上。簡青霉對對硝基苯酚和對硝基苯胺降解效果不明顯,在研究的濃度范圍內(nèi),簡青霉對它們的降解率只在10％左右。
　　 其次針對簡青霉在不同條件下對葸醌染料RBBR的脫色情況進行了研究。分別以底物濃度、接種的菌液量、pH值、培養(yǎng)時間、溫度作為單一變量,研究簡青霉對于RBBR的脫色率。研究結(jié)果表明RBBR的脫色情況均較好,簡青霉對于RBBR的脫色主要是生物吸附與生物降解。在振蕩培養(yǎng)條件下,當RBBR濃度為60μg·ml-1,菌液接種量

5、為4 ml(107個/ml的懸浮液),pH為5.5,溫度為37℃,菌齡為4 d時,簡青霉對RBBR的脫色率達到最大值96.96％。
　　 最后,為獲得產(chǎn)漆酶較高的菌株,本課題對簡青霉進行了誘變研究,先后對簡青霉的原始菌株進行了化學誘變和紫外誘變,并經(jīng)PDA-RBBR平板培養(yǎng)基對誘變后的菌株進行初篩,篩選出使平板褪色較好的誘變菌株再通過固體發(fā)酵培養(yǎng),用ABTS法測漆酶產(chǎn)量,復(fù)篩出一株產(chǎn)漆酶能力較高的菌株C5E4。將誘變菌株C5E4