實(shí)驗(yàn) 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)與顏色反應(yīng)

1、實(shí)驗(yàn)蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)與顏色反應(yīng)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆砧b定蛋白質(zhì)的原理和方法。熟悉蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)，進(jìn)一步熟悉蛋白質(zhì)的有關(guān)反應(yīng)。二、實(shí)驗(yàn)原理蛋白質(zhì)分子中某種或某些集團(tuán)可與顯色劑作用，產(chǎn)生顏色。不同的蛋白質(zhì)由于所含的氨基酸不完全相同，顏色反應(yīng)亦不完全相同。顏色反應(yīng)不是蛋白質(zhì)的專一反應(yīng)，一些非蛋白物質(zhì)也可產(chǎn)生同樣的顏色反應(yīng)，因此不能根據(jù)顏色反應(yīng)的結(jié)果來決定被測物是否為蛋白質(zhì)。另外，顏色反應(yīng)也可作為一些常用蛋白質(zhì)定量測定的依據(jù)。蛋白質(zhì)是親水性膠體，在

2、溶液中的穩(wěn)定性與質(zhì)點(diǎn)大小、電荷、水化作用有關(guān)，但其穩(wěn)定性是有條件的，相對的。如果條件發(fā)生了變化，破壞了蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性，蛋白質(zhì)就會(huì)從溶液中沉淀出來。三、實(shí)驗(yàn)儀器1、吸管2、滴管3、試管4、電爐5、pH試紙6、水浴鍋7、移液管四、實(shí)驗(yàn)試劑1、卵清蛋白液：雞蛋清用蒸餾水稀釋1020倍，34層紗布過濾，濾液放在冰箱里冷藏備用。2、0.5%苯酚：1g苯酚加蒸餾水稀釋至200ml。（一）米倫（Millon’s）反應(yīng)1、苯酚實(shí)驗(yàn)：取0.5%苯酚溶液1

3、ml于試管中，加Millon’s試劑0.5ml，電爐小心加熱觀察顏色變化。2、蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)：取2ml蛋白液，加Millon’s試劑0.5ml，出現(xiàn)白色的蛋白質(zhì)沉淀，小心加熱，觀察現(xiàn)象。（二）雙縮脲反應(yīng)1、取少量尿素晶體放在干燥的試管中，微火加熱熔化，至重新結(jié)晶時(shí)冷卻。然后加10%NaOH溶液1ml，搖勻，再加24滴1%CuSO4溶液，混勻，觀察現(xiàn)象。2、取蛋白液1ml，加10%NaOH溶液1ml，搖勻，再加24滴1%CuSO4溶液，混勻，