腦脊液的檢查楊海霞

1、腦脊液的檢查,醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) 楊海霞,,掌握腦脊液一般性狀檢查、腦脊液常用化學(xué)檢查中的蛋白質(zhì)檢查、葡萄糖定量測(cè)定和氯化物定量測(cè)定、腦脊液顯微鏡檢查的原理、方法和臨床意義。,腦脊液檢查,,一、標(biāo)本采集和處理 （一）標(biāo)本采集 （二）標(biāo)本轉(zhuǎn)運(yùn) （三）標(biāo)本保存和接收二、一般檢查 （一）理學(xué)檢查 （二）化學(xué)檢查 （三）顯微鏡檢查三、臨床應(yīng)用,本節(jié)內(nèi)容,第一節(jié) 腦脊液檢查,腦脊液（CSF）：存在于腦室和蛛網(wǎng)膜

2、下腔的無色透明液體。,,,1.易通過的物質(zhì):氯,鈉,鎂等離子;2.較易通過的物質(zhì): 白蛋白, 葡萄糖, 鈣離子, 乳酸, 氨基酸, 尿素和肌酐;3.極難或不能通過的物質(zhì): 纖維蛋白原, 補(bǔ)體, 抗體, 毒素和藥物, 及膽紅素, 膽固醇.,血腦屏障的通透性,第一節(jié) 腦脊液檢查,腦脊液的功能：保護(hù)腦脊髓及神經(jīng)，并通過血管周圍間隙供給腦部營(yíng)養(yǎng)，維持神經(jīng)細(xì)胞的滲透壓，酸堿平衡和輸出代謝產(chǎn)物。腦脊液檢查對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的診斷和預(yù)后觀察有重

3、要意義,,,,,,,適應(yīng)癥,①有腦膜刺激癥狀時(shí)，如腦膜感染性疾病。②疑有顱內(nèi)出血，如蛛網(wǎng)腦膜下腔出血。③中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。④不明原因的劇烈頭痛、昏迷、抽搐或癱瘓。⑤中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病需椎管內(nèi)給藥治療及手術(shù)前麻醉、造影等,,,,,禁忌癥,①對(duì)疑有顱內(nèi)壓升高者，為避免因腰穿誘發(fā)腦疝，應(yīng)先作眼底檢查，如有明顯視乳頭水腫，忌作腰椎穿刺。②休克、衰竭或?yàn)l危狀態(tài)的病人。③穿刺置局部皮膚有炎癥的病人。④顱后窩有占位性病變或伴有腦干癥狀的病人。,第一節(jié)

4、腦脊液檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,一、標(biāo)本采集和處理,腰椎穿刺法,,二、一般檢查,,第一節(jié) 腦脊液檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：理學(xué)檢查,,顏色,正常：無色或淡黃色紅色----出血（損傷、病變）黃色----陳舊性出血、黃疸白色----化膿性腦膜炎黑色----腦膜黑色素瘤,腦脊液新鮮性出血與陳舊性出血鑒別,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：理學(xué)檢查,透明度：正常--透明。,,,,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：理學(xué)檢查,

5、凝固性：正?！獰o凝塊。,,,1、腦脊液呈毛玻璃樣混濁見于：（）A、化膿性腦膜炎 B、結(jié)核性腦膜炎 C、病毒性腦膜炎 D、神經(jīng)梅毒 E、隱球菌性腦膜炎2、腦脊液黃色見于 （）A、流行性腦膜炎 B、化膿性腦膜炎 C、蛛網(wǎng)膜下腔出血 D、結(jié)核性腦膜炎 E、腦腫瘤3、腦脊液呈黃色膠凍樣見于（ ）A、化膿性腦膜炎 B、結(jié)核性腦膜炎 C、病毒性腦膜炎D、隱球菌性腦膜炎 E、蛛網(wǎng)膜下腔梗阻4、腦脊液呈現(xiàn)小絮狀凝塊見于（）A、化膿性腦

6、膜炎 B、結(jié)核性腦膜炎 C、病毒性腦膜炎 D、神經(jīng)梅毒 E、蛛網(wǎng)膜下腔梗阻,練習(xí)題,B,C,E,D,,二、一般檢查,,第一節(jié) 腦脊液檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,球蛋白,＋,苯酚,,蛋白鹽（白色混濁）,原理,結(jié)果,＋：,白色云霧狀混濁,＋＋：,白色云霧狀,＋＋＋：,＋＋＋＋：,正常：,陰性,白色絮狀沉淀,立即形成白色凝塊狀,,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,注意事項(xiàng),紅細(xì)胞過多時(shí)，須先離心使細(xì)胞沉淀，吸取

7、上清液進(jìn)行試驗(yàn)試驗(yàn)中所用試管應(yīng)十分潔凈，否則易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。所用試劑苯酚如不純，亦可引起假陽性反應(yīng)；室溫低于10℃，酚飽和度低，亦可引起假陽性結(jié)果。,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,,蛋白質(zhì)定量試驗(yàn)—磺基水楊酸-硫酸鈉試驗(yàn),2,蛋白質(zhì),＋,磺基水楊酸-硫酸鈉,A530,原理,結(jié)果,腰池0.2~0.4g/L ； 小腦延髓池0.1~0.25 g/L；側(cè)腦室池：0.05~0.15 g/L,正常：,與標(biāo)準(zhǔn)蛋白比較

8、,,,,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,注意事項(xiàng),腦脊液如有多量細(xì)胞或混濁，應(yīng)先離心以除去。如蛋白質(zhì)濃度過高，應(yīng)先行用生理鹽水稀釋后重新測(cè)定。加入SS-S試劑的操作手法和速度、室溫及比濁前的放置時(shí)間都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。故操作時(shí)應(yīng)注意控制加入試劑的方式和比濁時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)管一致。應(yīng)隨氣溫改變，勤作標(biāo)準(zhǔn)曲線。,,蛋白質(zhì)定量試驗(yàn)—磺基水楊酸-硫酸鈉試驗(yàn),第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,臨床意義,血屏通透性增高：腦膜炎；出血

9、性腦病。腦脊液循環(huán)障礙：腦部腫瘤；椎管梗阻如脊髓腫瘤、蛛網(wǎng)膜下腔粘連腦脊液蛋白質(zhì)含量增高。 Froin綜合征：腦脊液標(biāo)本外觀呈黃色膠凍狀，且有蛋白-細(xì)胞分離現(xiàn)象，是蛛網(wǎng)膜下腔梗阻的腦脊液特征。,,蛋白質(zhì)定量試驗(yàn)—磺基水楊酸-硫酸鈉試驗(yàn),,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,原理,紫紅色化合物,,酶試劑：葡萄糖氧化酶(glucose oxidase ， GOD)和辣根過氧化物酶(peroxidase ， POD)及4- 氨基安替

10、比林和2-甲基苯胺顯色系統(tǒng),,測(cè)定管,37℃水浴30min,葡萄糖＋O2＋H2O→葡萄糖酸＋H2O2 （GOD）H2O2＋還原型顯色劑→H2O＋氧化型顯色劑 （無色） POD （紫紅色）,,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,參考值,成人：2.5-4.4mmol/L,臨床意義,減低：①中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)菌性、真菌性感染②中樞

11、神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤增高：主要見于糖尿病患者。鑒別細(xì)菌性和病毒性腦膜炎：細(xì)菌性腦膜炎顯著降低。病毒性腦膜炎，腦脊液葡萄糖含量正常。,,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,氯化物測(cè)定-葡萄糖氧化酶法,原理,2CL-＋Hg（CNS）2→HgCL2↓＋HCNS3HCNS＋Fe（NO3）3→Fe （CNS）3＋3HNO3 （紫紅色）,參考值,成人120~130m

12、mol/L,,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,氯化物測(cè)定-葡萄糖氧化酶法,臨床意義,減低：細(xì)菌性或真菌性腦膜炎；氯化物測(cè)定對(duì)化膿性腦膜炎和結(jié)核性腦膜炎的鑒別有重要意義，腦脊液氯化物含量減低在結(jié)核性腦膜炎時(shí)為明顯。低氯血癥增高：腦脊液氯化物含量增高見于尿毒癥、呼吸性堿中毒等。,,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,酶學(xué)檢查,,5,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,原理,,,,,,,,,正電極,負(fù)電極,,PH

13、8.6緩沖液,α2球蛋白,前清蛋白,β球蛋白,γ球蛋白,α1球蛋白,清蛋白,第一節(jié) 腦脊液檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,參考值,前清蛋白2%~6%、清蛋白55%~65%、α1球蛋白3%~8%、α2球蛋白4%~9%、β球蛋白10%~18%、γ球蛋白4%~13%。,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,臨床意義,前清蛋白增加見于腦萎縮、腦積水及中樞神經(jīng)變性疾病。清蛋白增加見于腦血管病變、椎管阻塞。α和β球

14、蛋白增加見于腦膜炎、腦腫瘤。β球蛋白增加可見于動(dòng)脈硬化，腦血栓及脂肪代謝障礙性疾病。γ球蛋白明顯增加見于腦腫瘤。,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,7,,免疫球蛋白質(zhì)分析,原理,抗原和抗體在凝膠中或特殊緩沖液中特意結(jié)合，形成抗原抗體復(fù)合物。通過測(cè)定凝膠中抗原抗體復(fù)合物沉淀環(huán)直徑或特殊緩沖液中抗原抗體復(fù)合物濁度計(jì)算出免疫球蛋白的含量。,參考值,IgG：10-40mg/L； IgA：0-6mg/L；IgM：0-13mg/L； Ig

15、E：極少量。,腦脊液免疫球蛋白的報(bào)告方式及參考值,s:血清 csf:腦脊液 TP:總蛋白 Alb:白蛋白 Ig指數(shù): IgG、IgA、IgM計(jì)算公式相同。,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：化學(xué)檢查,7,,免疫球蛋白質(zhì)分析,臨床意義,IgG增高：常見于神經(jīng)梅毒、化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、病毒性腦膜炎、小舞蹈病、神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。IgA增高：常見于化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎、病毒性腦膜炎、腫瘤等。IgM增高：常見于化膿性腦膜炎、病毒性

16、腦膜炎、腫瘤、多發(fā)性硬化癥等。IgE增高：常見于腦寄生蟲病等。,,1、腦脊液蛋白質(zhì)定性的方法有 、 、 、2、腦脊液蛋白質(zhì)定量的方法有 、 、 。臨床常用的方法是 。3、腦脊液氯化物檢測(cè)方法有 、 、 。臨床常用方法為 ，其參考方法為

17、 。,練習(xí)題,,4、結(jié)核性腦膜炎病人的腦脊液中 酶增高程度最顯著，可用于結(jié)核性腦膜炎的診斷與鑒別診斷。5、化膿性腦膜炎病人的腦脊液典型變化是葡萄糖 ，蛋白質(zhì) 、氯化物 。6、病毒性腦膜炎腦脊液中葡萄糖含量通常為A、減低 B、增高 C、正常 D、明顯增高 E、明顯減低7、腦脊液蛋白質(zhì)增高最明顯的疾病是A、化膿性腦膜炎 B、結(jié)核性腦膜炎　Ｃ、病

18、毒性腦膜炎 D、脊髓腫瘤 E、腦動(dòng)脈硬化,練習(xí)題,,練習(xí)題,8、腦脊液葡萄糖減低最明顯的疾病是（ ）A、化膿性腦膜炎 B、真菌性腦膜炎 C、結(jié)核性腦膜炎 D、腦囊蟲病 E、神經(jīng)梅毒9、 CSF氯化物明顯降低見于（ ）A、化膿性腦膜炎 B、結(jié)核性腦膜炎 C、病毒性腦膜炎 D、乙型腦炎E、新型隱球菌性腦膜炎10、引起CSF中葡萄糖濃度減低的疾?。? ) A、結(jié)核性腦膜炎 B、隱球菌性腦膜炎 C、病

19、毒性腦膜炎 D、化膿性腦膜炎 E．腦膜瘤,,二、一般檢查,,第一節(jié) 腦脊液檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：顯微鏡檢查,紅細(xì)胞：無；白細(xì)胞：成人（0-8）×106/L；兒童為（0-15）×106/L，新生兒為（0-30）×106/L。白細(xì)胞分類以單個(gè)核細(xì)胞為主，多為淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞。,細(xì)胞計(jì)數(shù),第一節(jié) 腦脊液檢查,二、一般檢查：顯微鏡檢查,細(xì)胞檢查,[方法學(xué)評(píng)價(jià)] 一般用腦脊液離心沉渣涂片，

20、經(jīng)瑞特染色后用油鏡分類，但細(xì)胞形態(tài)常受影響。為了盡可能多地收集細(xì)胞和保持完好的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，國(guó)內(nèi)一些單位已將細(xì)胞玻片離心沉淀儀運(yùn)用于細(xì)胞學(xué)檢查，提高了癌細(xì)胞的檢出率，在細(xì)胞染色技術(shù)上也采用了多種方法。,二、一般檢查：顯微鏡檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,細(xì)胞檢查臨床意義,①紅細(xì)胞增多 見于腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血、腦脊髓外傷、腫瘤、腦膜炎等。②白細(xì)胞增多 見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染、腫瘤、腦膜白血病等。病毒性腦(膜)炎、脊髓灰質(zhì)炎等輕度增加（數(shù)十1

21、000×106/L），結(jié)核性腦膜炎中度增加（＜500×106/L，以混合性細(xì)胞為主，中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞同時(shí)存在），化膿性腦膜炎顯著增加（＞1000×106/L，以中性粒細(xì)胞為主）。③中性粒細(xì)胞增多：見于化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎破潰期、乙型腦炎早期、腦出血等。,二、一般檢查：顯微鏡檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,④淋巴細(xì)胞增多：見于各種病毒性腦膜炎、真菌性腦膜炎（新型隱球菌性腦膜炎白細(xì)胞數(shù)可達(dá)數(shù)百&#

22、215;106/L，以淋巴細(xì)胞為主）結(jié)核性腦膜炎早期及恢復(fù)期等。⑤嗜酸性粒細(xì)胞增多：見于腦部寄生蟲感染(如腦囊蟲病)、變態(tài)反應(yīng)等。⑥腫瘤細(xì)胞和白血病細(xì)胞 用細(xì)胞濃集法制備涂片，染色后查腫瘤細(xì)胞和白血病細(xì)胞，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤和腦膜白血病的診斷具有重要價(jià)值。,細(xì)胞檢查臨床意義,二、一般檢查：顯微鏡檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,細(xì)菌檢查,正常腦脊液無細(xì)菌。腦膜炎癥時(shí)，可直接涂片染色查細(xì)菌，或?qū)?biāo)本離心后，取沉淀物涂片，提高陽性檢出率

23、。常規(guī)情況下，需涂片三四張，用于革蘭染色、抗酸染色和特殊染色(如果標(biāo)本蛋白含量太低，可在沉淀物中加少量血清以利固定)。,三、一般檢查：顯微鏡檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,肺炎鏈球菌,第一節(jié) 腦脊液檢查,金黃色葡萄球菌,第一節(jié) 腦脊液檢查,腦膜炎雙球菌,第一節(jié) 腦脊液檢查,結(jié)核分枝桿菌,二、一般檢查：顯微鏡檢查,第一節(jié) 腦脊液檢查,寄生蟲檢查,正常腦脊液無病原體。,第一節(jié) 腦脊液檢查,三、臨床應(yīng)用,小 結(jié)

24、 1 、一般性狀檢查：顏色，透明度，凝塊或薄膜以及比密。 2、 化學(xué)檢查：PH，蛋白質(zhì)（定性，定量，電泳，免疫球蛋白）葡萄糖（定量分析），氯化物，酶學(xué)等。 3 、顯微鏡檢查：細(xì)胞總數(shù)及細(xì)胞分類，細(xì)胞學(xué)檢查（腫瘤細(xì)胞，特殊染色），寄生蟲學(xué)檢查。 4 、微生物檢查：三大染色及細(xì)菌培養(yǎng)（腦膜炎奈瑟菌，鏈球菌，葡萄球菌等等）。,,1、正常腦脊液中主要為 細(xì)胞和 細(xì)胞，葡萄搪含量為血糖

25、的 ％。2、腦脊液中中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞同時(shí)存在主要見于：（ ）A、化膿性腦膜炎 B、結(jié)核性腦膜炎 C、病毒性腦膜炎 D、腦寄生蟲病E．腦出血,練習(xí)題,,3、A、腦脊液中細(xì)胞數(shù)常達(dá)數(shù)千×106/L，以中性粒細(xì)胞為主B、細(xì)胞數(shù)＜500×106/L ，中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞同時(shí)存在C、細(xì)胞數(shù)輕度增加，多為數(shù)十×106/L，以淋巴細(xì)胞為主D、細(xì)胞數(shù)可正常E、細(xì)胞數(shù)多為數(shù)

26、百，以淋巴細(xì)胞為主病毒性腦炎、腦膜炎( ) 新型隱球菌性腦膜炎（ ） 結(jié)核性腦膜炎( ) 化膿性腦膜炎( )腦腫瘤( ),練習(xí)題,,1、如何鑒別穿刺損傷引起出血(新鮮出血)與蛛網(wǎng)膜下腔或腦出血(陳舊性出血)？2、如何根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果鑒別化膿性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎和病毒性腦膜炎?3、某成人男性病人，突然嗜睡，喚醒后主訴頭痛，不能回答其他問題。體溫39℃，腦膜刺激征陽性。腦脊