hiv實驗室風險評估-.doc4

1、HIVHIV抗體初篩實驗室風險評估報告抗體初篩實驗室風險評估報告1.1.評估目的評估目的獲得性免疫缺陷綜合癥（AIDs）是由人類免疫缺陷病毒（HIV）感染引起的嚴重威脅人類健康的性傳播疾病，臨床實驗室工作人員每天處理著大量血液標本，因此他們面臨著嚴峻的HIV職業(yè)暴露危險，保護臨床檢驗人員的健康，已成為迫切需要解決的問題。此次評估的主要目的是在實驗活動中根據(jù)HIV可能對個體或群體或?qū)嶒灜h(huán)境造成危害的高低來制定相應(yīng)措施的安全防范制度和操作程

2、序，選擇相應(yīng)等級的生物實驗室及設(shè)備配置，實驗人員使用相應(yīng)措施的防護措施和使用相符的安全防護設(shè)備，以及在發(fā)生意外泄漏或意外事故時能及時采取有效措施，來達到確保實驗工作人員不被感染和實驗環(huán)境不被污染的目的。2.2.評估依據(jù)評估依據(jù)2.1病原微生物實驗室生物安全管理條例2.2實驗室生物安全通用要求GB1948920082.3人間傳染的病原微生物名錄2.4WHO實驗室生物安全手冊2.5艾滋病防治條例2.6中華人民共和國傳染病防治法2.7可感染人

3、類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定2.8全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2009年修訂版3、危害程度分類、危害程度分類3.1分類等級在衛(wèi)生部公布的《人間傳染的病原微生物名錄》中將此病毒列為第二類病原微生物，屬能引起人和靈長類動物發(fā)病逆轉(zhuǎn)錄病毒科的慢病毒屬，但一般情況下對未與HIV無癥狀攜帶和艾滋病患者有性接觸和血液傳播的健康工作者、群體、家畜或環(huán)境不會引起危害的病原微生物。3.2不同實驗操作生物安全實驗室級別要求HIV抗體檢測（包

4、括篩查和確證實驗）、抗原檢測和相關(guān)的免疫學檢測應(yīng)在符合Ⅱ級生物安全實驗室（BSL2）要求的艾滋病檢測實驗室中進行。本實驗室是HIV初篩實驗室，應(yīng)用ELISA方法進行HIV抗體篩查。根據(jù)《名錄》的規(guī)定，未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作可在BSL2實驗室進行。4、生物因子的特性生物因子的特性4.1HIV在病毒分類中屬逆轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒屬中的人類免疫缺陷病毒組。迄今為止，根據(jù)血清學反應(yīng)和病毒核酸序列測定，全球流行的HIV可分為2型：HIV1型和HIV

5、2型。在HIV1型內(nèi)，根據(jù)編碼包膜蛋白的env基因和編碼殼蛋白的gag基因序列的同源性又進一步分為3個組：Ｍ組（主要組）、Ｏ組（外圍組）和Ｎ組（新組或非M非O組），Ｍ組內(nèi)又可分為ＡＪ10個亞型。在HIV1型和HIV2型之間，其核苷酸序列有45％的同源性，并且存在免疫交叉反應(yīng)。應(yīng)用免疫印跡法(Westblot)可以將二者明確地區(qū)別開來。4.2環(huán)境中的穩(wěn)定性：HIV對理化因素抵抗力較弱，56℃加熱30min可被滅活，但在室溫下可存活7天。經(jīng)

6、化學消毒劑0.5%次氯酸鈉、10%漂白粉、50%乙醇、0.3%H2O2、5%來蘇兒處理10min可被滅活。紫外線對該病毒無殺滅作用。4.3變異性：HIV基因組可發(fā)生變異，最易發(fā)生變異的基因編碼包膜糖蛋白env和調(diào)節(jié)基因nefc，根據(jù)env基因序列異同可將HIV1型分為A、B、C、D、E、F、H、O8個亞型。Env的變異率為千分之一。5.2.2潛伏期感染者可以沒有任何臨床癥狀，但潛伏期不是靜止期，更不是安靜期，病毒在持續(xù)繁殖，具有強烈的破

7、壞作用。潛伏期指的是從感染HIV開始，到出現(xiàn)艾滋病臨床癥狀和體征的時間。艾滋病的平均潛伏期，現(xiàn)在認為是210年。這對早期發(fā)現(xiàn)病人及預防都造成很大困難。5.2.3艾滋病前期潛伏期后開始出現(xiàn)與艾滋病有關(guān)的癥狀和體征，直至發(fā)展成典型的艾滋病的一段時間。主要的臨床表現(xiàn)有：.淋巴結(jié)腫大此期最主要的臨床表現(xiàn)之一；全身癥狀病人常有病毒性疾病的全身不適，肌肉疼痛等癥狀；各種感染此期除了上述的淺表淋巴結(jié)腫大和全身癥狀外，患者經(jīng)常出現(xiàn)各種特殊性或復發(fā)性的非

8、致命性感染。5.2.4典型的艾滋病期有的學者稱其為致死性艾滋病，是艾滋病病毒感染的最終階段。此期具有三個基本特點：嚴重的細胞免疫缺陷；發(fā)生各種致命性機會性感染；發(fā)生各種惡性腫瘤。艾滋病的終期，免疫功能全面崩潰，病人出現(xiàn)各種嚴重的綜合病癥，直至死亡5.3實驗室診斷5.3.1HIV抗體檢測檢測HIV抗體是常規(guī)使用的HIV病原學診斷的方法。HIV抗體檢測方法有初篩試驗和確認試驗組成。初篩試驗結(jié)果陽性者再做確證試驗以明確診斷。目前的HIV抗體檢

9、測都是使用新一代試劑，可同時檢測HIV1型和HIV2型。初篩檢測的方法有間接酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、明膠顆粒凝集試驗（PA）和金標法（SPOT），確認檢測的方法為蛋白印跡試驗（WB）。醫(yī)生一般會根據(jù)病人的感染史，如供血史、受血史、性接觸史、吸毒、高危職業(yè)等結(jié)合臨床體征對病人進行HIV檢測。檢測出HIV抗體的時間取決于HIV感染者的反應(yīng)性和HIV病毒的特性，一般在感染后1—3個月出現(xiàn)HIV抗體。HIV抗體初篩結(jié)果陰性者或可疑者，半

10、年后可進行第二次檢測，但不需要多次檢測。HIV抗體初篩結(jié)果陽性者，須進一步做確證試驗。確證試驗報告HIV抗體可疑的病人，應(yīng)在3個月后進行復查。確證結(jié)果陽性者都具有HIV特異的帶型，確認結(jié)果是可靠的。5.3.2P24抗原檢測P24抗原檢測是診斷早期HIV感染的一種方法。HIV感染者多數(shù)在感染1—3個月才出現(xiàn)HIV抗體，抗體出現(xiàn)之前的這個時期稱為“感染后窗口期”。在窗口期，HIV抗體是檢測不到的。P24抗原的檢測有助于多數(shù)急性感染者血清HI

11、V抗體陽轉(zhuǎn)之前的診斷，大約可以使抗體窗口期縮短1周，因為估計檢測P24抗原到檢出P24抗體間隔只有1周時間。但由于不是所有新近感染的人都可以檢出P24抗原，加上該項檢測費用較高，所以一般不作為常規(guī)診斷項目。5.3.3白細胞和淋巴細胞檢測醫(yī)生對HIV抗體確認為陽性者進行臨床分期或治療時，才需要做一些輔助性實驗室檢查，如白細胞和淋巴細胞檢測。AIDS病人周圍白細胞及淋巴細胞總數(shù)是下降狀態(tài)，淋巴細胞的變化可用于評價機體免疫系統(tǒng)損害的程度，CD

12、4值對于評價HIV感染的病期及預后極為重要，特別是病程后期更為重要。（1）WBC、Hb下降。（2）CD4T淋巴細胞總數(shù)下降，＜200mm3，或為200~500mm3。（3）CD4CD8比值＜1（正常時，CD4CD8比值＞1）。（4）測定β2微球蛋白，AIDS病人明顯增高。5.3.4PCR檢測HIV核酸聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）是檢測特定的DNA和RNA片段的非常敏感的方法。定量PCR技術(shù)是測定HIV載量、預測疾病進程的主要方法。盡管HIV和