佐劑發(fā)展史

1、一種免疫效果確實(shí)的疫苗往往需要一種與之相匹配的佐劑才能更好地發(fā)揮疫苗抗感染的特性。近年來隨著現(xiàn)代生物技術(shù)的進(jìn)步各種新型疫苗(乙肝亞單位疫苗、HIV疫苗及基因工程疫苗)的研究逐漸成為熱點(diǎn)問題。其中佐劑的研究幾乎決定了新型疫苗的誕生。雖然經(jīng)典的鋁膠佐劑成為美國食品與藥品管理局(FAD)批準(zhǔn)的唯一的人醫(yī)用佐劑但是很難滿足現(xiàn)代各種新型疫苗的需要和發(fā)展。目前國外已經(jīng)試驗(yàn)的佐劑有100多種按照佐劑作用方式可分為:免疫調(diào)節(jié)作用(誘導(dǎo)抗原提呈細(xì)胞(AP

2、C)分泌不同的細(xì)胞因子如γ干擾素(IFNγ)、白細(xì)胞介素2(L2)、α腫瘤壞死因子(TNFα)、白細(xì)胞介素4、5、10、13(L4、5、10、13)、抗原提呈作用(佐劑保持抗原構(gòu)象的完整并提呈給適當(dāng)?shù)拿庖咝?yīng)細(xì)胞)、誘導(dǎo)CD8細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)應(yīng)答、靶向作用(佐劑激發(fā)APC攝取和傳遞抗原進(jìn)而向免疫效應(yīng)細(xì)胞提呈抗原的能力)和抗原儲(chǔ)存作用(將抗原短期或長期儲(chǔ)存在注射部位免受肝臟清除)。根據(jù)佐劑的成分可分為礦物鹽佐劑、油佐劑、微生物類產(chǎn)

3、品、皂苷類和化學(xué)合成物質(zhì)等五類。本文簡單闡述了國外研究應(yīng)用的佐劑。1礦物鹽佐劑礦物鹽佐劑(鋁膠鋁膠)鋁膠佐劑是以氫氧化鋁或磷酸鋁水合凝膠的形式高效吸附水溶性抗原緩慢釋放不斷刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫。鋁膠使用方便成本低廉安全無毒是至今唯一被FDA批準(zhǔn)用于人用疫苗的佐劑。鋁膠佐劑存在的主要問題是:①主要激活Th2型免疫細(xì)胞只誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答適用于以抗體保護(hù)為主的疾病疫苗②鋁膠佐劑在注射部位緩慢釋放抗原的效應(yīng)較低對很多抗原效果不確實(shí)。目前人醫(yī)主要

4、用于白喉、破傷風(fēng)、麻疹等疫苗獸醫(yī)主要用于豬、牛、禽等多殺性巴氏桿菌病、肉瘤梭菌、仔豬紅痢、豬丹毒等細(xì)菌病的疫苗。2油乳劑油乳劑最經(jīng)典的油乳劑為弗氏完全佐劑(FCA)和弗氏不完全佐劑(FIA)。FCA是標(biāo)準(zhǔn)的既能誘導(dǎo)體液免疫又能誘導(dǎo)細(xì)胞免疫的佐劑。FCA可以誘導(dǎo)Th1型細(xì)胞因子而FIA則只能誘導(dǎo)Th2型細(xì)胞因子。FCA和FIA的高度佐劑活性是其他佐劑難以比擬的但是由于其配方中含有礦物油(含有致癌成分稠環(huán)芳烴)其FIA的致癌性在雄性Swis

5、s小鼠中已經(jīng)得到證實(shí)，因此至今沒有被FDA批準(zhǔn)為合法的佐劑。此外由于礦物油(MineraloilMarcol52)很難被動(dòng)物機(jī)體降解與其配伍的乳化劑單磷酸脂質(zhì)A(ArlacelA)抗原依賴性降解后釋放出游離的脂肪酸。上述兩種原因造成該佐劑在注射部位局部形成小結(jié)、肉芽腫有些動(dòng)物甚至?xí)纬蔁o菌性化膿性炎癥反應(yīng)。國外SEPPIC公司制造出MontanideISA系列油佐劑其專用乳化劑為MontanideISA80。按照歐洲藥理學(xué)會(huì)的要求進(jìn)行試

6、驗(yàn)該系列佐劑在小鼠或豚鼠皮下注射沒有發(fā)生嚴(yán)重的副反應(yīng)。因此歐盟批準(zhǔn)該系列產(chǎn)品可以在所有食品動(dòng)物上使用。3微生物類產(chǎn)品微生物類產(chǎn)品微生物(布氏桿菌、沙門氏菌和結(jié)核菌等)和微生物產(chǎn)物有較強(qiáng)的佐劑活性。FCA中結(jié)核菌細(xì)胞壁和來源于明尼蘇達(dá)沙門氏菌R595株的脂多糖(LPS)就是商業(yè)開發(fā)比較成功的例子。后者現(xiàn)已經(jīng)形成商品MPL含有4～5個(gè)高度?；闹舅?。再經(jīng)過溫和的酸堿水解后層析提純?yōu)?DMLA。目前多項(xiàng)微生物和腫瘤抗原的后期臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行

7、中但其在人醫(yī)上的安全性已得到證實(shí)。新評價(jià)。一方面可以通過進(jìn)一步精制礦物油徹底清除其中的致癌成分稠環(huán)芳烴另一方面可以用一種新型可代謝的礦物油及其相應(yīng)的乳化劑配方這是一種更安全的方向。國外著名的“佐劑65”在注射后2個(gè)月可以被代謝安全性得到了保證。選擇適宜的佐劑還需考慮到乳化工藝的研究。目前大部分滅活疫苗為油包水型(WO)由于粘度較大使用不方便而且會(huì)造成免疫動(dòng)物不確實(shí)等現(xiàn)象。國外比較成功的水包油型(OW)佐劑AF粘度減低效果與WO型劑型相似

8、但需要專門的乳化劑角鯊?fù)?squalane)和聚丙二醇環(huán)氧乙烷醚(PluronicL121)。因此需要將生物制品開發(fā)與化工技術(shù)互相配合才能開辟一個(gè)全新的領(lǐng)域。為提高佐劑的免疫效果尤其應(yīng)該充分重視刺激細(xì)胞免疫的佐劑。這方面化學(xué)合成類佐劑有天然的優(yōu)勢。國內(nèi)的獸醫(yī)生物制品科研人員可以借鑒國外同類研究成果關(guān)注微生物多糖、DMP和ISCOMs等的開發(fā)應(yīng)用。對于可以增強(qiáng)粘膜免疫的佐劑適當(dāng)改變接種途徑可能會(huì)對某些疾病的防治帶來意外的效果。參考文獻(xiàn)（略