有關物質方法學

1、有關物質方法學研究有關物質方法學研究?主要內(nèi)容1、有關物質檢查方法建立的研發(fā)思路2、有關物質方法的建立和方法學驗證2.1、原料藥和制劑的相關理化性質2.2、有關物質分析方法的選擇2.3、有關物質分析方法的驗證2.4、有關物質雜質的定量方法3、有關物質雜質的分析4、有關物質雜質限度的制訂有關物質檢查方法建立的研發(fā)思路有關物質檢查方法建立的研發(fā)思路?研發(fā)思路：有關物質檢測方法的建立重點是測定方法的先進性、準確性、可行性。?⑴首先有關物質的方

2、法選擇，對于仿制藥有EP、BP、USP等質量標準的藥品，首選以上的色譜條件進行篩選，尤其關注的離子對試劑的使用。?⑵選用不同色譜條件進行對比研究，如果方法一是等度測定的，方法二最好選用梯度色譜條件，比較兩種方法測定結果的雜質個數(shù)及雜質含量等。確證有關物質測定方法的準確性。?⑶對所篩選的方法進行系統(tǒng)的方法學研究，比較不同檢測方法的優(yōu)劣，選擇較好的色譜條件作為本品有關物質檢查的測定方法。?⑷對于仿制藥同時要將自制樣品與市售原研樣品進行全面的

3、質量比較，分析其雜質的種類和含量，確保自制樣品與市售原研樣品的雜質在同一水平。?原料藥和制劑的相關理化性質原料藥和制劑的相關理化性質?在建立有關物質檢查方法前，需首先了解原料藥和制劑的相關理化性質。?⑴對于原料藥，了解原料藥的基本性質和結構特點。了解原料藥合成工藝過程中的起始原料、副產(chǎn)物、副產(chǎn)物產(chǎn)生的雜質、中間產(chǎn)物或可能產(chǎn)生的降解產(chǎn)物等。結合相關已知的雜質來確定有關物質檢測的條件。?⑵對于制劑，可能影響藥物有關物質的重要因素有輔料、劑型

4、、存儲條件等，主要了解輔料對有關物質檢測的干擾情況，不同劑型在不同存貯條件下可能產(chǎn)生的雜質等。對于復方制劑，同時要考慮到復方中原料的相互作用可能產(chǎn)生的雜質等。?有關物質分析方法的選擇有關物質分析方法的選擇?有機雜質的檢測方法包括化學法、光譜法、色譜法等，因藥物結構及降解產(chǎn)物的不同采用不同的檢測方法。通過合適的分析技術將不同結構的雜質進行分離、檢測，從而達到對雜質的有效控制。目前普遍采用的雜質檢測方法主要有：?⑴高效液相色譜法（HPLC）

5、目前采用的分析方法主要以高效液相色譜法為主，為常用的分析方法。選擇不同的色譜柱對雜質進行有效的分離。?⑵薄層色譜法(TLC)是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術，但準確性較低。?⑶氣相色譜法(GC)氣相色譜法主要是用于能氣化的物質的檢測和分離。一般用于有機殘留溶劑的檢測和分離。也可用于一些能揮發(fā)的雜質的檢測。?⑷毛細管電泳法（CE）毛細管電泳法是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅動力，依據(jù)樣品

6、中各組分的淌度和（或）分配行為的差異而實現(xiàn)各組分分離的一種分析方法。其應用比較廣泛，但該方法測定精密度不高，專屬性不穩(wěn)定，且CE儀器價格較高。?由于各種分析方法均具有一定的局限性，因此在進行雜質分析時，應注意不同原理的?④系統(tǒng)適應性系統(tǒng)適應性系統(tǒng)適應性試驗主要是考察主成分與雜質的分離情況以及主峰參數(shù)信息如理論塔板數(shù)、拖尾因子、分離度等，均應符合測定要求。?⑤精密度試驗精密度試驗精密度試驗包括：重復性試驗、中間精密度試驗等。?⑥溶液穩(wěn)定性

7、試驗溶液穩(wěn)定性試驗考察樣品在配制溶劑中的雜質與主峰的穩(wěn)定性，取一定濃度的樣品溶液，分別于不同時間取樣測定雜質與主峰的峰面積，以相對標準偏差來表示不同時間測定結果的穩(wěn)定性。判斷結果：結果RSD%≤2.0%，在測定時間內(nèi)的樣品溶液穩(wěn)定性良好。?⑦耐用性試驗耐用性試驗耐用性試驗是指測定條件發(fā)生小的變動時，測定結果不受影響的承受程度。一般系統(tǒng)變化條件：分別考察流動相比例變化5％、流動相pH值變化0.2、柱溫變化5℃、檢測波長變化5nm、流速相對

8、值變化20％以及采用三根不同批號的色譜柱進行測定時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測試兩次?？山邮艿臉藴蕿椋焊麟s質峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質峰與其他成分峰必須達到基線分離；各條件下的雜質含量數(shù)據(jù)（n=6）的相對標準差應不大于2.0%，雜質含量的絕對值在0.1％以內(nèi)。特殊樣品如果色譜條件變化比較敏感的，可適當降低變化范圍。?耐用性試驗部分還包括樣品萃?。ㄌ崛。┓€(wěn)健性：可理解為提取方法的重復性良好。即提取方法的確定驗證試驗。?有關物

9、質雜質的定量方法有關物質雜質的定量方法?有關物質雜質的定量方法根據(jù)雜質與主成分的最大吸收波長及校正因子來確定。若雜質與主峰的吸收波長基本一致，則一般采用自身對照法或峰面積歸一化法；若雜質與主峰的吸收波長差異范圍較小，校正因子在0.9～1.1之間，則可采用不加校正因子的主成分自身對照法；超出該范圍，校正因子在0.2～5.0范圍以內(nèi)時，采用主成分自身對照法的定量方式，須用校正因子進行校正；若雜質與主峰的吸收波長相差較大，校正因子在0.2～5

10、.0范圍以外時，不能通過校正因子校正，則要采用外標法進行測定。?①外標法（雜質對照品法）外標法（雜質對照品法）?外標法定量比較準確，采用外標法進行測定時，應進行相應的方法學研究。?A檢測波長的選擇檢測波長的選擇檢測波長的選擇測定方法參照紫外可見分光光度法（中國藥典2010版二部附錄ⅣA）進行測定，或采用HPLC法，DAD檢測器進行測定。同時考察輔料干擾等。?B標準曲線標準曲線線性關系應在設計的測定范圍內(nèi)測定。可用一貯備液經(jīng)精密稀釋，或分

11、別精密稱樣，制備一系列被測物質濃度系列進行測定，至少制備5個濃度。以測得的響應信號作為被測物濃度的函數(shù)作圖，觀察是否呈線性，用最小二乘法進行線性回歸。?有關物質雜質的定量方法有關物質雜質的定量方法?C精密度試驗精密度試驗儀器精密度試驗主要是考察測定方法在所用的試驗儀器測定結果的偏差，精密度一般用偏差、標準偏差或相對標準偏差表示。?測定方法：取一定濃度的雜質對照品溶液，連續(xù)測定次數(shù)至少6次，以峰面積的測定結果計算相對標準偏差，考察儀器測定

12、的。?D重復性試驗重復性試驗重復性系指在同樣的操作條件下，在較短時間間隔內(nèi)，由同一分析人員測定所得結果的精密度。重復性測定可在規(guī)定范圍內(nèi)，至少用9次測定結果進行評價，如制備3個不同濃度的試樣，各測定3次，或100％的濃度水平，用至少測定6次的結果進行評價。常用的測定方法時采用100%的濃度，測定6次，計算測定結果的相對標準偏差。?測定方法:按含量測定的方法，分別平行稱取6份樣品，按外標法測定雜質的含量，以雜質含量測定結果計算相對標準偏差