青陽參總甙抗癲癇作用的分子機(jī)理研究

1、青陽參總甙抗癲癇作用的分子機(jī)理研究青陽參總甙抗癲癇作用的分子機(jī)理研究【摘要】：青陽參總甙(QingyangshenylycosidesQYS)是蘿摩科鵝絨屬植物青陽參(CynanchumOtophyllumScheid)根粉提取物已有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明QYS對大鼠聽源性驚厥(audiogenicseizureAGS)發(fā)作、“點(diǎn)燃”效應(yīng)(kindlingeffect)以及硫酸亞鐵誘導(dǎo)的癲癇發(fā)作具有明顯的對抗作用表現(xiàn)出顯著的抗癲癇效應(yīng)(antie

2、pilepticeffect).以往研究表明QYS對中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中乙酰膽堿濃度、5—HT、cfos、神經(jīng)肽濃度以及GABA能都有一定的影響但對QYS抗癲癇作用的分子生物學(xué)機(jī)理到目前為止還知之甚少。DBA2J小鼠是一種先天性對強(qiáng)噪音敏感的小鼠在受到高強(qiáng)度的聲音刺激后便會(huì)相繼出現(xiàn)狂奔(wildrunning)、陣攣(colus)、強(qiáng)直性痙攣(tonus)等異常行為。因此DBA小鼠成為研究癲癇發(fā)生機(jī)制和篩選新型抗癲癇藥物(antie

3、pilepticdrugsAEDs)較好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。本實(shí)驗(yàn)就以DBA小鼠為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物運(yùn)用動(dòng)物藥理學(xué)方法考察QYS對強(qiáng)噪音誘導(dǎo)的聽源性驚厥和PTZ(pentyleatrazol)誘導(dǎo)的全身性癲癇(PTZinducedgeneralizedepilepsy)發(fā)作的影響運(yùn)用高密度基因芯片技術(shù)、實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)以及Westernblot等分子生物學(xué)技術(shù)分別考察強(qiáng)噪音誘導(dǎo)的小鼠AGS發(fā)作后基因表達(dá)的變化分析AGS發(fā)作相關(guān)的基因差異表達(dá)考察QYS對

4、中腦下丘基因表達(dá)譜的影響以及QYS抑制AGS發(fā)作后基因表達(dá)譜的變化對QYS抗癲癇作用的分子生物學(xué)機(jī)制進(jìn)行初步探討同時(shí)為篩選新型抗癲癇藥物提供一些理論基礎(chǔ)。1.青陽參總甙對聽源性驚厥發(fā)作和PTZ誘導(dǎo)RNA412基因芯片技術(shù)揭示青陽參總甙誘導(dǎo)的基因表達(dá)譜變化41462.1離子通道基因422.2神經(jīng)遞質(zhì)受體基因42432.3代謝酶基因43442.4其它參與細(xì)胞通訊的基因44452.5其它生理過程中的基因45463熒光定量PCR技術(shù)顯示QYS誘

5、導(dǎo)的基因表達(dá)差異4647討論47501青陽參總甙對離子通道基因表達(dá)的影響472青陽參總甙影響神經(jīng)遞質(zhì)受體基因表達(dá)47483青陽參總甙影響新陳代謝過程484青陽參總甙對細(xì)胞因子的影響4850版圖與說明5057第三章聽源性驚厥發(fā)作誘導(dǎo)的中腦下丘基因表達(dá)譜變化5769摘要5758前言5859材料與方法59結(jié)果59631組織總RNA592聽源性驚厥誘導(dǎo)的基因表達(dá)圖譜分析59632.1離子通道基因59602.2神經(jīng)遞質(zhì)受體基因60612.3代謝酶

6、基因61622.4其它參與細(xì)胞通訊的基因622.5其它生理過程中的基因6263討論63671離子通道基因與聽源性驚厥的發(fā)生63642神經(jīng)遞質(zhì)受體基因表達(dá)異常與聽源性驚厥形成64653谷氨酸代謝失衡與聽源性驚厥654能量代謝異常參與了聽源性驚厥發(fā)作過程655細(xì)胞因子、細(xì)胞凋亡以及細(xì)胞發(fā)生與聽源性驚厥發(fā)生6567版圖與說明6769第四章青陽參總甙抑制聽源性驚厥發(fā)作后中腦下丘基因表達(dá)譜分析6977摘要69前言6970材料與方法70結(jié)果7074