高效液相—核磁共振聯(lián)用技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用

1、藥物分析物分析綜述題目：液相液相—核磁共振聯(lián)用技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用核磁共振聯(lián)用技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用組員姓名：黃志華、竇文淵、彭啟柏所在學(xué)院：藥科學(xué)院專業(yè)班級：藥學(xué)05（5）班學(xué)號：0503501564、0503501565、0503501535日期：2008622毫無疑問，HPLC－NMR聯(lián)用技術(shù)對中藥的分析研究中活性成分的分離和結(jié)構(gòu)鑒定的速度將大大提高。以下對HPLC—NMR聯(lián)用技術(shù)操作及在中藥中的分析應(yīng)用作簡單的介紹。1.1.H

2、PLCHPLC—NMRNMR聯(lián)用技術(shù)聯(lián)用技術(shù)HPLC—NMR聯(lián)用技術(shù)的研究開始于20世紀(jì)70年代早期發(fā)展十分緩慢，主要是因為當(dāng)時NMR儀的靈敏度還較低，溶劑峰抑制問題也尚未解決。近年來HPLCNMR聯(lián)用技術(shù)的迅速發(fā)展得益于NMR波譜儀磁場強度的提高、HPLC—NMR專用探頭的設(shè)計及溶劑峰抑制技術(shù)的發(fā)展，從而解決了動態(tài)變化、靈敏度及溶劑抑制(尤其是梯度系統(tǒng))的問題。當(dāng)時該儀器可采用停止流動模式隨后不久連續(xù)流動模式打通從此以后隨著儀器設(shè)計、

3、磁場強度、流動探頭等方面研制水平的提高與改進以及有效的壓制溶劑峰的脈沖序列的建立使得這項技術(shù)現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用到實際工作中。1.1基本操作模式LC－NMR聯(lián)用技術(shù)主要有三種操作模式:連續(xù)流動操作模式、停流操作模式和峰存貯操作模式。1.1.1連續(xù)流動（onflow）操作模式:樣品由HPLC常規(guī)檢測器（UV等）出口，用毛細管直接連接到專用NMR探頭的液槽，毛細管的長度為2m。隨著分離連續(xù)獲得NMR圖譜，一次分析可得到所有組分的NMR信息，然而由

4、于樣品溶液濃度低，NMR采樣時間短（通常掃描16次），很難得到分辨率良好的NMR圖譜。1.1.2停流(stopflow)操作模式：當(dāng)樣品色譜峰最高點到達NMR液槽的中心位置時，停止流動，進行一維或二維NMR采樣，直至獲得良好的NMR圖譜。然后再啟動輸液，恢復(fù)正常HPLC條件，繼續(xù)下一色譜峰的NMR測定。在出峰時停泵，可以獲得較好的NMR圖譜。1.1.3峰存貯操作模式：當(dāng)欲分析組分較多而各組分的含量較低時，為避免由于多次暫停LC分離而帶來

5、峰擴散現(xiàn)象，可采用峰存貯操作模式。正常色譜分離時當(dāng)UV檢測到色譜峰時將流出物收集并暫時貯存到不同的毛細管回路內(nèi)，由NMR譜儀逐一離線測定各流分。該模式下的樣品需要量低于停流操作。這樣既不中斷HPLC過程，又能獲得全部成分的良好的NMR圖譜。除用毛細管回路貯存色譜成分外，還有小柱截留法。1.2溶劑峰抑制方法大多數(shù)HPLC體系采用反相柱使用2種或3種溶劑的混合物作洗脫液除D2O外其它氘代溶劑作為常規(guī)洗脫液太昂貴。因此在線反相HPLCNMR實