高效液相—核磁共振聯(lián)用技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用

1、藥物分析物分析綜述題目：液相液相—核磁共振聯(lián)用技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用核磁共振聯(lián)用技術(shù)在中藥分析中的應(yīng)用組員姓名：黃志華、竇文淵、彭啟柏所在學(xué)院：藥科學(xué)院專業(yè)班級(jí)：藥學(xué)05（5）班學(xué)號(hào)：0503501564、0503501565、0503501535日期：2008622毫無疑問，HPLC－NMR聯(lián)用技術(shù)對(duì)中藥的分析研究中活性成分的分離和結(jié)構(gòu)鑒定的速度將大大提高。以下對(duì)HPLC—NMR聯(lián)用技術(shù)操作及在中藥中的分析應(yīng)用作簡(jiǎn)單的介紹。1.1.H

2、PLCHPLC—NMRNMR聯(lián)用技術(shù)聯(lián)用技術(shù)HPLC—NMR聯(lián)用技術(shù)的研究開始于20世紀(jì)70年代早期發(fā)展十分緩慢，主要是因?yàn)楫?dāng)時(shí)NMR儀的靈敏度還較低，溶劑峰抑制問題也尚未解決。近年來HPLCNMR聯(lián)用技術(shù)的迅速發(fā)展得益于NMR波譜儀磁場(chǎng)強(qiáng)度的提高、HPLC—NMR專用探頭的設(shè)計(jì)及溶劑峰抑制技術(shù)的發(fā)展，從而解決了動(dòng)態(tài)變化、靈敏度及溶劑抑制(尤其是梯度系統(tǒng))的問題。當(dāng)時(shí)該儀器可采用停止流動(dòng)模式隨后不久連續(xù)流動(dòng)模式打通從此以后隨著儀器設(shè)計(jì)、

3、磁場(chǎng)強(qiáng)度、流動(dòng)探頭等方面研制水平的提高與改進(jìn)以及有效的壓制溶劑峰的脈沖序列的建立使得這項(xiàng)技術(shù)現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用到實(shí)際工作中。1.1基本操作模式LC－NMR聯(lián)用技術(shù)主要有三種操作模式:連續(xù)流動(dòng)操作模式、停流操作模式和峰存貯操作模式。1.1.1連續(xù)流動(dòng)（onflow）操作模式:樣品由HPLC常規(guī)檢測(cè)器（UV等）出口，用毛細(xì)管直接連接到專用NMR探頭的液槽，毛細(xì)管的長(zhǎng)度為2m。隨著分離連續(xù)獲得NMR圖譜，一次分析可得到所有組分的NMR信息，然而由

4、于樣品溶液濃度低，NMR采樣時(shí)間短（通常掃描16次），很難得到分辨率良好的NMR圖譜。1.1.2停流(stopflow)操作模式：當(dāng)樣品色譜峰最高點(diǎn)到達(dá)NMR液槽的中心位置時(shí)，停止流動(dòng)，進(jìn)行一維或二維NMR采樣，直至獲得良好的NMR圖譜。然后再啟動(dòng)輸液，恢復(fù)正常HPLC條件，繼續(xù)下一色譜峰的NMR測(cè)定。在出峰時(shí)停泵，可以獲得較好的NMR圖譜。1.1.3峰存貯操作模式：當(dāng)欲分析組分較多而各組分的含量較低時(shí)，為避免由于多次暫停LC分離而帶來

5、峰擴(kuò)散現(xiàn)象，可采用峰存貯操作模式。正常色譜分離時(shí)當(dāng)UV檢測(cè)到色譜峰時(shí)將流出物收集并暫時(shí)貯存到不同的毛細(xì)管回路內(nèi)，由NMR譜儀逐一離線測(cè)定各流分。該模式下的樣品需要量低于停流操作。這樣既不中斷HPLC過程，又能獲得全部成分的良好的NMR圖譜。除用毛細(xì)管回路貯存色譜成分外，還有小柱截留法。1.2溶劑峰抑制方法大多數(shù)HPLC體系采用反相柱使用2種或3種溶劑的混合物作洗脫液除D2O外其它氘代溶劑作為常規(guī)洗脫液太昂貴。因此在線反相HPLCNMR實(shí)