4-c4基因在褐飛虱中的原位雜交分析

1、4C4基因在褐飛虱中的原位雜交分析I4C44C4基因在褐飛虱中的原位雜交分析基因在褐飛虱中的原位雜交分析陳智龍廣州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院摘要摘要本研究以篩選褐飛虱唾液腺抑制差減雜交文庫得到的差異表達明顯的基因4C4為研究對象，通過體外擴增、制備探針、褐飛虱石蠟包埋、切片，雜交、免疫反應(yīng)、顯色反應(yīng)等方法對基因4C4進行了RNA原位雜交分析，結(jié)果表明，此基因主要在褐飛虱的唾液腺部位表達，本研究結(jié)果為進一步分析基因4C4的功能奠定了基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵

2、詞褐飛虱石蠟切片探針雜交4C4基因在褐飛虱中的原位雜交分析III目錄1前言…………………………………………………………………………………12材料與方法……………………………………………………………………………22.1實驗材料……………………………………………………………………………22.2實驗試劑的配制……………………………………………………………………22.3實驗步驟…………………………………………………………………………42.3.1

3、制作褐飛虱石蠟切片2.3.1.1抽氣…………………………………………………………………………42.3.1.2脫水…………………………………………………………………………52.3.1.3浸蠟…………………………………………………………………………52.3.1.4包埋…………………………………………………………………………52.3.1.5切片…………………………………………………………………………52.3.2雜交之前的準(zhǔn)備工作…………………

4、………………………………………52.3.2.14C4基因的體外擴增………………………………………………………52.3.2.1.1制備感受態(tài)細(xì)胞………………………………………………………52.3.2.1.2轉(zhuǎn)化……………………………………………………………………62.3.2.1.3提取質(zhì)?！?2.3.2.2酶切………………………………………………………………………62.3.2.3純化酶切產(chǎn)物…

5、…………………………………………………………72.3.2.4制備地高辛標(biāo)記的探針…………………………………………………72.3.3原位雜交………………………………………………………………………82.3.3.1預(yù)雜交………………………………………………………………………82.3.3.2雜交…………………………………………………………………………82.3.3.3雜交后處理…………………………………………………………………82.3.3.4免疫