基因工程填空背誦

1、1基因工程填空背誦基因工程填空背誦1基因工程的概念：基因工程是在DNADNA分子分子水平上進行操作因此又叫做重組重組DNADNA技術技術。2基因工程的基本工具：限制酶、限制酶、DNADNA連接酶、運載體連接酶、運載體3限制酶來源：主要是從原核生物原核生物中分離純化出來的。4限制酶的功能：識別特定的核苷酸序列，并在特定位點切割磷酸二酯鍵。識別特定的核苷酸序列，并在特定位點切割磷酸二酯鍵。5限制酶切割的結果：黏性末端黏性末端和平末端平末端。

2、6DNA連接酶功能：恢復被限制酶切開了的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。7DNA聚合酶的作用部位是磷酸二酯鍵。磷酸二酯鍵。8運載體具備的條件：①能在受體細胞中復制復制并穩(wěn)定穩(wěn)定保存；②具有一至多個限制酶切割位點限制酶切割位點，供外源DNA片段插入；③具有標記基因標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。9基因工程常用的載體有：質粒質粒、噬菌體噬菌體和動、植物病毒動、植物病毒等。10最早應用的載體是質粒質粒，它是細菌細胞中的一種很小的雙鏈

3、環(huán)狀環(huán)狀DNA分子。11基因的基本操作程序：目的基因的獲取目的基因的獲取、基因表達載體的構建基因表達載體的構建、將目的基因導入受體細將目的基因導入受體細胞、目的基因的檢測與鑒定。目的基因的檢測與鑒定。12基因工程的核心是：基因表達載體的構建基因表達載體的構建。13獲取目的基因的方法是①從自然界中已有的物種中分離出來從自然界中已有的物種中分離出來，如可從基因文庫中獲取。②人工合成法：逆轉錄法和化學合成法人工合成法：逆轉錄法和化學合成法。③

4、PCR擴增擴增14取原核細胞的目的基因方法一般是：直接分離法直接分離法。15獲取真核細胞的目的基因一般是人工合成法人工合成法。16PCR是聚合酶鏈式反應聚合酶鏈式反應的縮寫，是一種在生物體外復制特定DNA片斷的核酸合成技術。17PCR原理是：DNA雙連復制雙連復制的原理。前提是：要有一段已知目的基因的核苷酸序列已知目的基因的核苷酸序列。18PCR條件：模板、模板、ATP、酶、原料、酶、原料（四種游離的脫氧核苷酸）19PCR酶：熱穩(wěn)定熱穩(wěn)

5、定DNADNA聚合酶聚合酶（耐高溫DNA聚合酶）20即基因表達載體的組成：目的基因、啟動子、終止子、標記基因目的基因、啟動子、終止子、標記基因21標記基因的作用：鑒定受體細胞中是否含有目的基因目的基因，從而將含有目的基因的細胞含有目的基因的細胞篩選出來。22基因表達載體構建方法：同種限制酶同種限制酶分別切割載體和目的基因，再用DNADNA連接酶連接酶把兩者連接形成重組質粒。23將目的基因導入植物細胞：最常用方法是農桿菌轉化法農桿菌轉化法

6、，其次還有基因槍法基因槍法和花粉管通花粉管通道法。24農桿菌轉化法原理：①農桿菌能感染雙子葉植物雙子葉植物和裸子植物裸子植物.②農桿菌中的TiTi質粒質粒上的TDNATDNA可轉移至受體細胞，并整合到受體細胞染色體染色體DNADNA上。25將目的基因導入動物細胞：顯微注射技術顯微注射技術。此方法的受體細胞多是受精卵受精卵。26選受精卵做受體的原因：具有發(fā)育的全能性27將目的基因導入微生物細胞：CaCa＋處理法＋處理法。28選用微生物作為

7、受體細胞的優(yōu)點：繁殖快繁殖快、多為單細胞單細胞、遺傳物質相對較少遺傳物質相對較少29將目的基因導入水稻（單子葉植物）方法是：基因槍法基因槍法或花粉管通道法花粉管通道法30目的基因檢測與鑒定首先要檢測轉基因生物的染色體染色體DNADNA上是否插入了目的基因插入了目的基因，方法是采用DNADNA分子雜交技術分子雜交技術。31其次還要檢測目的基因是否轉錄出轉錄出mRNAmRNA，方法是采用分子雜交技術分子雜交技術。32最后檢測目的基因是否翻譯

8、成蛋白質翻譯成蛋白質，方法是采用抗原抗原—抗體雜交技術抗體雜交技術。334.有時還需進行個體生物學水平個體生物學水平的鑒定。如抗蟲或抗病的接種實驗接種實驗等。34目的基因成功表達的標志：受體細胞通過轉錄、翻譯合成相應的蛋白質合成相應的蛋白質（具體題目寫出具體的蛋白質）。35從結構上分析，為什么不同生物的DNA能夠連接在一起？①具有共同的具有共同的DNADNA雙螺旋結雙螺旋結356單克隆抗體制備篩選雜交瘤細胞篩選能產生所需抗體的雜交瘤細胞

9、體外培養(yǎng)注射到小鼠的腹腔BBB瘤瘤瘤B瘤細胞融合抗原注入小鼠體內B淋巴細胞骨髓瘤細胞滅活病毒57兩次篩選的目的是：第一次篩選出雜交瘤細胞篩選出雜交瘤細胞，第二次篩選出所需抗體的雜交瘤細胞所需抗體的雜交瘤細胞58雜交瘤細胞的特點：既能大量繁殖既能大量繁殖，又能產生專一的抗體專一的抗體。59單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，并能大量制備特異性強，靈敏度高，并能大量制備。60單克隆抗體的作用：主要用于治療癌癥治療癌癥治療，可制成“生物導彈

10、生物導彈”。61技術原理植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性植物細胞的全能性植物體細胞雜交細胞膜的流動性；植物細胞的全能細胞膜的流動性；植物細胞的全能性動物細胞培養(yǎng)細胞增殖細胞增殖動物細胞融合細胞膜的流動性細胞膜的流動性核移植技術動物細胞核的全能性動物細胞核的全能性62愈傷組織的特點：其細胞排列疏松而無規(guī)則疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞薄壁細胞63受精標志標志：第二極體第二極體的形成的形成；64受精完成標志是雌雄原

11、核融合成合子雌雄原核融合成合子65受精作用準備階段1：精子獲能精子獲能2：卵子的準備：卵子必須達到減數(shù)第二次分裂中期減數(shù)第二次分裂中期才具備與精子受精的能力。66受精階段受精階段：精子發(fā)生頂體反應頂體反應穿越放射冠和透明帶，進入卵黃膜，雌雄原核形成和配子結合。67防止多精入卵的兩道屏障防止多精入卵的兩道屏障：在精子觸及卵黃膜瞬間，發(fā)生透明帶反應透明帶反應，這是防止多精入卵的第一道屏障；精子入卵后，發(fā)生卵黃膜封閉作用卵黃膜封閉作用，這是防

12、治多精入卵的第二道屏障68受精卵受精卵卵裂期卵裂期桑椹胚桑椹胚囊胚囊胚原腸胚原腸胚組織器官形成織器官形成幼體幼體69卵裂期卵裂期：細胞進行有絲有絲分裂，數(shù)量增加增加，胚胎總體積總體積不增加不增加70桑葚胚桑葚胚：細胞數(shù)目32個左右，形似桑葚，此時細胞都具有全能性71囊胚期囊胚期：細胞開始開始分化分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團內細胞團，將來發(fā)育成胎兒的各種組織72胚胎工程有哪些技術：體外受精、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植技術、胚胎分割技術體