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1、ACCESS化學(xué)發(fā)光常見問題BeckmanCoulterACCESS?系列全自動微粒子化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)常見問題及答疑ACCESS化學(xué)發(fā)光常見問題第一部分:第一部分:化學(xué)發(fā)光基礎(chǔ)知識化學(xué)發(fā)光基礎(chǔ)知識1什么是化學(xué)發(fā)光,與放免、酶免比較有何不同?什么是化學(xué)發(fā)光,與放免、酶免比較有何不同?化學(xué)發(fā)光免疫分析(ChemiluminescenceImmunoassay,CLIA)是將化學(xué)發(fā)光與免疫反應(yīng)相結(jié)合,用于檢測微量抗原或抗體的一種新型標(biāo)記免
2、疫測定技術(shù)?;瘜W(xué)發(fā)光免疫分析比放射免疫,酶聯(lián)免疫具有更高靈敏度,具備操作簡便、快速的特點(diǎn),易于標(biāo)準(zhǔn)化操作。且測試中不使用有害的試劑,試劑保存期長,應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究和臨床實(shí)驗(yàn)診斷工作,成為非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。(1)與放免(RIA)產(chǎn)品比較與放射免疫試劑(RIA)比較,化學(xué)發(fā)光避免了放射性核素的污染以及對操作人員的傷害,大大縮短了反應(yīng)時(shí)間,同時(shí)兼具高靈敏度的優(yōu)勢。(2)與酶免(ELISA)產(chǎn)品比較靈敏度與可測范圍遠(yuǎn)
3、遠(yuǎn)高于酶免產(chǎn)品,兼具ELISA法簡便的操作方法與較短的反應(yīng)時(shí)間。2什么是標(biāo)記免疫技術(shù),它的三大要素是什么?什么是標(biāo)記免疫技術(shù),它的三大要素是什么?將Ag或Ab用標(biāo)記物(如熒光素、酶、放射性同位素、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)等)進(jìn)行標(biāo)記,在與標(biāo)本中的相應(yīng)Ab或Ag反應(yīng)后,可以不必測定AgAb復(fù)合物本身,而測定復(fù)合物中的標(biāo)記物,通過標(biāo)記物的放大作用,進(jìn)一步提高了免疫技術(shù)的敏感性。三要素:通常在檢測系統(tǒng)中會使用到一種叫標(biāo)記物(labeling)的物質(zhì)常標(biāo)記
4、在抗體上通常會有一個(gè)分離(separation)的過程在最后讀取信號前需要去仔細(xì)關(guān)注一下分析的模式(fmat)3標(biāo)記免疫技術(shù)主要有哪幾種?標(biāo)記免疫技術(shù)主要有哪幾種?主要經(jīng)歷了四種標(biāo)記免疫技術(shù)的發(fā)展:熒光素(Fluophes)–FIA放射性同位素(Radioisotopes)–RIA酶(Enzymes)–EIA化學(xué)發(fā)光物質(zhì)CLIA4ACCESSACCESS化學(xué)發(fā)光原理?化學(xué)發(fā)光原理?分析方法及過程ACCESS系統(tǒng)采用磁性微粒作為固相載體,
5、以AMPPD作為發(fā)光劑,固相載體的應(yīng)用擴(kuò)大了測定的范圍。以競爭法、夾心法等免疫測定方法為基礎(chǔ)。試劑包裝采用特殊的設(shè)計(jì),每個(gè)試劑包有5個(gè)小室分別把不同的試劑分開,減少了交叉污染,保證了檢測質(zhì)量。⑴、抗原抗體結(jié)合:將包被單克隆抗體的順磁性微粒和待測標(biāo)本加入反應(yīng)管中,標(biāo)本中的抗原與微粒子表面的抗體結(jié)合,再加入堿性磷酸酶標(biāo)記的抗體,經(jīng)溫育后形成固相包被抗體抗原酶標(biāo)記抗體復(fù)合物。⑵、洗滌、分離:在電磁場中進(jìn)行3次洗滌,很快將未結(jié)合的多余抗原和酶標(biāo)
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