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1、實(shí)驗(yàn)六實(shí)驗(yàn)六馬鈴薯多酚氧化酶制備和化學(xué)性質(zhì)馬鈴薯多酚氧化酶制備和化學(xué)性質(zhì)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)從組織細(xì)胞中制備酶的方法。2、掌握多酚氧化酶的作用和化學(xué)性質(zhì)。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理多酚氧化酶是一種含銅的酶,其最適pH值為67。由多酚氧化酶催化的反應(yīng),如以鄰苯二酚為底物,可以被氧化形成鄰苯二醌。由多酚氧化酶催化的氧化還原反應(yīng)可通過溶液的顏色的變化鑒定,這個(gè)反應(yīng)在自然界中是常見的,如去皮的馬鈴薯和水果變成褐色就是由于該酶作用的結(jié)果
2、。多酚氧化酶的最適底物是鄰苯二酚(兒茶酚)。間苯二酚和對苯二酚與鄰苯二酚的結(jié)構(gòu)相似,它們也可以被氧化為各種有色物質(zhì)。三、實(shí)驗(yàn)器材三、實(shí)驗(yàn)器材1、實(shí)驗(yàn)儀器勻漿機(jī),離心機(jī),冰箱,恒溫水浴,燒杯,三角瓶,漏斗,小刀,紗布,2、材料與試劑1)馬鈴薯2)0.1molL的NaF溶液:將4.2g氟化鈉溶于1000mL水中。3)0.01molL的鄰苯二酚溶液:將1.1g鄰苯二酚溶解于1000mL水中,用稀NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH值為6.0,防止其自身的氧
3、化作用。當(dāng)溶液變成褐色時(shí),應(yīng)重新配制。新配制的溶液應(yīng)貯存于棕色瓶中。4)pH6.8的磷酸鹽緩沖液5)5%三氯乙酸溶液6)0.01molL的間苯二酚溶液:將0.11g間苯二酚溶解于100mL水中。7)0.01molL的對苯二酚溶液:將0.11g對苯二酚溶解于100mL水中。8)硫酸銨晶體四、實(shí)驗(yàn)步驟四、實(shí)驗(yàn)步驟1、多酚氧化酶的制備每三個(gè)小組一起,稱取150g馬鈴薯(新馬鈴薯可以不去皮),切塊后放入勻漿機(jī),加入150mLNaF溶液,勻漿后用
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