板栗總苞的化學(xué)成分及其抗菌活性

1、板栗總苞的化學(xué)成分及其抗菌活性板栗總苞的化學(xué)成分及其抗菌活性焦啟揚(yáng)，吳立軍，孫博航，黃健，高慧媛(沈陽(yáng)藥科大學(xué)中藥學(xué)院遼寧沈陽(yáng)110016)摘要摘要︰目的目的體外抗菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示板栗CastaneamollissimaBlume總苞的95％(Φ)乙醇提取物具有抗菌活性對(duì)總浸膏的化學(xué)成分進(jìn)行分離和結(jié)構(gòu)鑒定。方法方法采用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜和重結(jié)晶等多種分離方法對(duì)板栗總苞的95％(Φ)乙醇提取物的化學(xué)成分進(jìn)行分離，并通過(guò)理化性質(zhì)、譜學(xué)分析

2、等方法對(duì)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定；結(jié)果結(jié)果分離得到18個(gè)化合物，分別鑒定為5羥甲基糠醛(1)、沒(méi)食子酸(2)、對(duì)羥基苯甲酸(3)、對(duì)苯二酚(4)、麥角甾622二烯3β5α8α三醇(5)、莽草酸(6)、豆甾4烯6β3酮(7)、Ganschisrin(8)、齊墩果酸(9)、山柰酚3O(6″反式對(duì)香豆酰基)βD葡萄吡喃糖苷（10）、山柰酚3O(6″４″雙反式對(duì)香豆?；?βD葡萄吡喃糖苷(11)、2羥基丁二酸二丁酯(12)、槲皮素(13)、大黃素(1

3、4)3′3“dimethoxylarreatricin(15)、原兒茶酸(16)、烏索酸(17)、山柰酚(18)。結(jié)論結(jié)論板栗總苞的95％乙醇提取物的總浸膏及水層對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和藤黃微球菌均有一定的抑性活性；化合物7、8、9、12為首次從栗屬植物中分離得到，化合物6、14為首次從該種植物中分離得到。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：板栗總苞；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定中圖分類(lèi)號(hào)中圖分類(lèi)號(hào)：R284文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：AChemicalconstitu

4、entsfromtheinvolucreofCastaneamollissimaBlumeitsantibacteriaactivityJIAOQiyangWULijunSUNBohangHUANGJianGAOHuiyuan(SchoolofTraditionalChineseMateriaMedicaShenyangPharmaceuticalUniversityShenyang110016China)ABSTRACT:OBJECT

5、IVETheresultinvitroshowedtheinhibitioneffectonbacteriatoisolatethechemicalconstituentselucidatetheirstructuresfromtheinvolucresofCastaneamollissimaBlume.METHODSThecompoundswereisolatedbychromatogrammphyonsilicagelcolumns

6、SephadexLH20recrystallizingmethods.NMRTLCwereemployedfthestructuralidentification.RESULTSEighteencompoundswereobtainedelucidatedashydroxymethylfurfural(1)gallicacid(2)phydroxybenzoicacid(3)hydroquinone(4)ergost622diene3β

7、5α8αtriol(5)shikimicacid(6)stigmast4en6βol3one(7)Ganschisrin(8)oleanolicacid(9)kaempferol3O[6“O(E)pcoumaroyl]βDglucopyranoside(10)kaempferol3O[6“2“diO(E)pcoumaroyl]βDglucopyranoside(11)2hydroxy14dibutylbutanedioate(12)qu

8、ercetin(13)emodin(14)3′3“dimethoxylarreatricin(15)34Dihydroxybenzoicacid(16)ursolicacid(17)kaempferol(18)respectively.CONCLUSIONThe95%EtOHextractionwaterlayershowedtheinhibitioneffectonBacilluscoliStaphylococcusaureusMic

9、rococcusluteus.Compound78912wereisolatedfmCastaneagenusfthefirsttimecompound614wereobtainedfromthisplantfthefirsttime.KEYWDS:CastaneamollissimaBlumechemicalconstituentsstructuralelucidationantibacteriaactivity板栗(Castanea

10、mollissimaBlume)又名栗子，是殼斗科栗屬的落葉果木。板栗的總苞為板栗毛殼，又名風(fēng)栗殼、板栗殼斗。據(jù)中藥大詞典記載，板栗殼性甘、平、澀、無(wú)毒具有健脾益氣、補(bǔ)腎強(qiáng)筋、散結(jié)解毒之功效?？芍委煹ざ?、腫毒、瘰疬等疾病[1]，在民間常作為抗菌、抗炎用植物藥。有藥理研究表明板栗總苞的水煎液、醇溶物、乙酸乙酯提取物均有抗菌活性[2]，但對(duì)其活性部位的化學(xué)成分卻并未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。此外我國(guó)板栗資源極其豐富，果肉的深加工越來(lái)越受到重視，但由此產(chǎn)生

11、的板栗總苞則大部分作為廢物，造成了資源的巨大浪費(fèi)。本研究采用體外抗菌活性試驗(yàn)對(duì)板栗總苞的95%(Φ)乙醇提取物的抗菌活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，結(jié)果表明其提取物對(duì)大腸桿菌、金黃色葡萄球菌及藤黃微球菌均有不同程度的抑制活性。通過(guò)現(xiàn)代化學(xué)分離方法對(duì)抗菌活性部位的化學(xué)成分做了研究。采用硅膠柱色譜、凝膠柱色譜和重結(jié)晶等方法從中分離純化得到了18個(gè)化合物，經(jīng)譜學(xué)解析對(duì)結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定。本文報(bào)道化合物的分離鑒定過(guò)程。1儀器、試劑和材料儀器、試劑和材料基金項(xiàng)目：河

12、北省唐山市科技局基金項(xiàng)目基金項(xiàng)目：河北省唐山市科技局基金項(xiàng)目作者簡(jiǎn)介作者簡(jiǎn)介：焦啟揚(yáng)，碩士研究生通訊作者通訊作者：高慧媛(1971)，女(漢族)，河北樂(lè)亭人，副教授，博士主要從事天然產(chǎn)物活性成分的研究。Tel.02423986482Emailgaohuiyuan1997@.cn?；衔?：白色粉末（氯仿）m.p.175177℃。1HNMR(CDCl3300MHz)，δ3.97(1Hm)，5.20(2Hdd)示為2個(gè)烯烴質(zhì)子信號(hào)，δ:6.

13、50(1HdJ=6.0Hz)，6.23(1HdJ=6.0Hz)為環(huán)上互為偶合的2個(gè)烯烴質(zhì)子信號(hào)；13CNMR（CDCl3，75MHz），δ:36.9(C1)、30.1（C2）、66.4（C3）、34.9（C4）、79.4（C5）、130.7(C6)、135.4（C7）、82.2(C8)、51.1(C9)、37.1(C10)、20.6(C11)、39.3(C12)、44.5(C13)、51.7(C14)、28.6(C15)、23.4(C1

14、6)、56.2(C17)、12.6(C18)、18.2(C19)、39.7（C20）、19.6(C21)、132.8(C22)、135.2(C23)、42.3(C24)、33.1(C25)、17.5(C26)、20.9(C27)、19.9(C28)，以上譜學(xué)數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的麥角甾622二烯3β5α8α三醇[8]數(shù)據(jù)相一致，鑒定其為麥角甾622二烯3β5α8α三醇（ergost622diene3β5α8αtriol）?；衔?：白色針狀結(jié)

15、晶（MeOH），m.p.184185℃，[α]164.0(c0.44MeOH)。1HNMR（300MHz，DMSOd6），δ:2.01(1HddJ=18.02.8Hz6βH)2.47(1HddJ=18.02.7Hz6αH)，6.55(1Hs2H)，4.20(1Hs3H)3.82(1HddJ=4.86.75H)3.54(1HtJ=4.84H)；13CNMR（DMSO，75MHz），δ:168.3(COOH)、138.4（C2）、128.9

16、（C1）、70.5（C3）、67.0（C4）、65.6（C5）、30.2（C6），以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[9]報(bào)道的()莽草酸的譜學(xué)數(shù)據(jù)相一致，故鑒定為()莽草酸。化合物7：白色結(jié)晶（CHCl3）m.p.211213℃。1HNMR（300MHz，CDCl3），δ:4.35(1HsH6)，5.82(1HsH4)；13CNMR（75MHz，CDCl3）δ:37.1（C1），34.3（C2），200.4（C3），126.3（C4），168.4（C5）

17、，73.3（C6），38.5（C7），29.7（C8），53.6（C9），38.0（C10），21.0（C11），39.6（C12），42.5（C13），56.0（C14），24.1（C15），29.1（C16），56.0（C17），12.0（C18），19.5（C19），36.1（C20），19.0（C21），34.2（C22），26.0（C23），45.8（C24），29.7（C25），18.7（C26），19.8（C27），23.

18、1（C28），12.0(C29)。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[10]報(bào)道的豆甾4烯6β醇3酮的譜學(xué)數(shù)據(jù)相一致，故鑒定其為豆甾4烯6β醇3酮(stigmast4en6βol3one)。化合物8：無(wú)色油狀物（CHCl3）。ESImz:373.3[MH]。1HNMR(CDCl3600MHz)δ：3.89(12Hs)為4個(gè)甲氧基質(zhì)子信號(hào)，6.996.80(6Hm)為六個(gè)芳香質(zhì)子信號(hào)，結(jié)構(gòu)中有兩個(gè)苯環(huán)，1.00(3HdJ=6.3Hz3CH3)0.61(3Hd

19、J=6.6Hz4CH3)，5.44(1HdJ=4.2HzH5)4.63(1HdJ=9.0HzH2)。其碳譜數(shù)據(jù)見(jiàn)Table2。結(jié)構(gòu)中的呋喃環(huán)上取代基的相對(duì)構(gòu)型用NOESY譜進(jìn)行了驗(yàn)證，觀察到了兩個(gè)甲基δ:0.61(4CH3)1.00(3CH3)和δ:4.63(H2)之間的NOE相關(guān)峰，而與H5沒(méi)有NOE效應(yīng)，以上數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)[11]的數(shù)據(jù)相一致，鑒定該化合物為ganschisrin，其結(jié)構(gòu)式見(jiàn)Fig.1?；衔?：白色粉末（MeOH），1

20、HNMR(300MHzDMSOd6)，δ:5.15（1Hs12H），4.28（1Hm3H）；13CNMR（CDCl3，75MHz），δ:38.5(C1)、27.0(C2)、77.0(C3)、38.8(C4)、54.9(C5)、18.1(C6)、32.9(C7)、40.9(C8)、47.2(C9)、36.7(C10)、23.0(C11)、121.6(C12)、143.9(C13)、41.4(C14)、27.3(C15)、23.5(C16)

21、、45.8(C17)、41.4(C18)、45.5(C19)、30.5(C20)、33.4(C21)、32.2(C22)、28.3(C23)、15.2(C24)、16.1(C25)、16.9(C26)、25.7(C27)、178.7(C28)、33.0(C29)、23.5(C30)。以上譜學(xué)數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)記載的齊墩果酸的譜學(xué)數(shù)據(jù)[12]相一致，故鑒定該化合物為齊墩果酸（oleanolicacid）?；衔?0：黃色粉末（MeOH），m.p.

22、214216℃.鹽酸鎂粉及Molisch反應(yīng)均為陽(yáng)性，示為黃酮苷類(lèi)化合物。1HNMR(600MHzpyridined5)，δ6.70(1HbrsH6)6.70(1HbrsH8)，8.45(2HdJ=8.4HzH2′H6′)7.14(2HdJ=8.4HzH3′H5′)，7.16(2HdJ=8.4HzH3“H5“)，7.51(2HdJ=8.4HzH2“H6“)。其碳譜數(shù)據(jù)歸屬見(jiàn)Table2，與文獻(xiàn)[13]中山柰酚3O(6″反式對(duì)香豆?；?β