雙根清腦顆粒對血管性癡呆模型大鼠行為學及血清

1、1.基金項目：江蘇省自然科學基金資助項目(BK2007243)2.李輝(1981)男，碩士研究生，中醫(yī)師，方向：中醫(yī)治則治法研究，主要從事中醫(yī)藥對腦血管疾病的研究。地址：南京中醫(yī)藥大學仙林校區(qū)123#信箱郵編：210046Email：lihuaqing2007@.Tel：02558115753.通訊作者：吳顥昕(1965－)男，副教授，博士，研究方向:中醫(yī)腦病的治則與治法研究Tel：0255811575Email：wuhaoxin@雙根

2、清腦顆粒雙根清腦顆粒對血管性癡呆模型大鼠行為學及對血管性癡呆模型大鼠行為學及血清血清超氧化物岐化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶的影響超氧化物岐化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶的影響1李輝，吳顥昕，岳曉杰，鄭鴻燕（南京中醫(yī)藥大學基礎(chǔ)醫(yī)學院腦病研究所，南京210046）[摘要摘要]目的目的：觀察雙根清腦顆粒對血管性癡呆(VD)模型大鼠行為學及血清中超氧化物岐化酶、丙二醛、一氧化氮、一氧化氮合酶的影響，探討其干預(yù)VD的機理。方法方法：

3、采用栓子注入法制成VD大鼠模型，ig給予雙根清腦顆粒及腦復(fù)康15天，Mris水迷宮測定大鼠學習記憶能力及血清中的SOD、NOS活性及MDA、NO的含量。結(jié)果結(jié)果：雙根清腦顆粒組大鼠逃避潛伏期和首次穿越平臺的時間明顯縮短(P0.05、P0.01)，中、小劑量組及腦復(fù)康組SOD活性升高，MDA含量降低(P0.05)，各用藥組SODMDA的比值均升高(P0.01)。各用藥組血清NO含量降低(P0.05、P0.01)，中、小劑量顯著降低NOS活

4、性(P0.01)。結(jié)論結(jié)論：雙根清腦顆?？娠@著改善VD模型大鼠的學習記憶能力，提高血清SOD活力、降低血清MDA、NO的含量及NOS活性。摘要中的英文縮略語首次應(yīng)標出中文意義。[關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞]雙根清腦顆粒；VD模型；超氧化物岐化酶；丙二醛；一氧化氮；一氧化氮合酶EffectsofShuanggenQinnaoGranulesonAnimalbehavisuperoxidedismutasemalondialdehydenitricoxi

5、deNitricoxidesynthaseinserumofvulardementiaratmodelsLIHuiWUHaoxinYUEXiaojieZHENGHongyan（NanjingUniversityofChineseMedicine，Nanjing210046，China）Abstract:Objective:ThepurposeofthisresearchistoexpletheeffectsthatShuanggenQi

6、ngnaoGranulestowardsvulardementia(VD)byobservinganimalbehavisuperoxidedismutasemalondialdehydenitricoxideNitricoxidesynthaselevelsinserumofVDratmodels.Methods:Vulardementia(VD)ratmodelscanbemadebyinjectingthesamekindsoft

7、hromboticembolitothecatheteroftheexternalcarotidartery.Mriswatermazetasktestisusedfmeasuringthelearningmemyability.ItcanalsomeasurethephotochemicalreactionfcontentsofSODinserumMDAaswellasNOSactivitynitratasemeathodfNOlev

8、els.Results:ThetimefShuanggenQingnaogranulestoescapethelatentperiodtocrosstheplatfmfthefirsttimewassignificantlyshtened(P0.05P0.01).SODactivityincreasedinMediumlowdoseRehabilitationgroups.theMDAcontentdecreased.Theratioo

9、fSODMDA(SODMDA)inthetreatedgroupshasallrisen（P＜0.01）BesidestheNOcontentsinthetreatedgroupsdecreased(P0.05P0.01).theNOSactivityinthemediumlowdosegroupsrose（P＜0.01）。Conclusion:ShuanggenQingnaoGranulescansignificantlyimprov

10、ethelearningmemyabilityoftheratswithVD.ItcanalsoincreaseSODactivity.MeanwhileitdecreasesMDANOcontentsaswellasNOSactivity.［收稿日期］20100128高度)：1230cm，水池高度:60cm，分四個不同項限且有導(dǎo)航標，配備定時錄制視頻，平臺及池底均為黑色。房間四周有隔音、隔光窗簾。測試時，將平臺放于第3象限正中距池壁2

11、0cm處，加水至平臺高度后加入高于平臺1cm的牛奶液，溫度（240.5）℃，實驗室溫度保持25℃。訓練期間環(huán)境安靜，迷宮外參照物保持不變。2.4.1定位航行試驗：測量大鼠對大鼠學習記憶的獲取能力。實驗歷時4d，受試動物每日分別分別從1、2兩個象限入水點將大鼠頭向池壁放入水中，依次進行訓練，記錄其逃避潛伏期（從入水到找到安全平臺后停留5s為止的時間）。據(jù)相關(guān)文獻研究雄性大鼠的空間學習記憶能力相對穩(wěn)定[4]，在經(jīng)過訓練后如果60s內(nèi)找不到平

12、臺則在其后的時間找到平臺的機率將低于90%，因此我們采用了張愛林氏[5]的檢測方法，即測試最初2天為保證實驗動物皆有可能找到平臺，將逃避潛伏期最長設(shè)為90s，超過90s者以90s計。后2天的測試中將逃避潛伏期最長設(shè)為60s，超過60s者以60s計。利用上海移數(shù)信息科技有限公司的動物行為分析系統(tǒng)和Mris水迷宮視頻分析系統(tǒng)進行圖象和數(shù)據(jù)分析。2.4.2空間搜索試驗測量大鼠對平臺空間位置記憶的保持能力。在實驗第5日撤去平臺，由第1象限入水點

13、將大鼠面向池壁放入水中，記錄其首次穿越平臺時間，超過60s以60s計。2.5大鼠血清SOD、MDA、NOS、NO的測定各實驗組大鼠于術(shù)后第15天治療結(jié)束后以0.8%的戊巴比妥鈉，按40mgKg腹腔注射麻醉，左心室內(nèi)取血5mL，置于肝素處理過的試管中，4℃2500rmin離心20min，取上清液待測。檢測步驟嚴格按試劑盒說明書操作。2.6統(tǒng)計學方法：所有計量資料均用s表示，P0.05為差異有顯著性，行為學數(shù)據(jù)采用重復(fù)測量設(shè)計的X方差分析；

14、生化指標采用單因素方差分析后進行多組間兩兩比較，由spss16.0軟件完成。3結(jié)果結(jié)果3.1實驗動物數(shù)量分析參加實驗大鼠70只，67只進入統(tǒng)計。雙根清腦顆粒組大劑量組有1只Mris水迷宮行為學測試時死亡，腦復(fù)康組有兩只ig灌胃時死亡。3.2雙根清腦顆粒對VD大鼠學習記憶能力的影響精煉3.2～3.4與表中內(nèi)容重復(fù)的文字描述重復(fù)測量設(shè)計的方差分析結(jié)果表明，各組間具有顯著性差異（F=1.452，P0.01）。定位航行試驗中，模型組逃避潛伏期在

15、第2、3、4日明顯延長(P0.05)，雙根清腦顆粒各組逃避潛伏期明顯減少(P0.05)?？臻g搜索試驗中，模型組首次穿越平臺的時間明顯增加(P0.01)；各用藥組首次穿越平臺的時間皆減少(P0.05)，其中以小劑量組用時最少(P0.01)。見表1。表1的表頭應(yīng)標出定位航行時間及單位標示和首次穿越時間的單位標示。表1雙根清腦顆粒對VD模型大鼠定位航行和空間搜索實驗的影響(s)X組別n劑量∕gkg第一天第二天第三天第四天首次穿越時間正常105

16、7.226.148.129.842.431.127.416.110.85.7假手術(shù)1058.327.850.720.943.52028.515.37.33.8模型1075.131.7863.424.73）54.226.13）47.2183）26.516.73）SG（大）93671.630.160.532.743.930.21）25.714.61）12.86.71）SG（中）101257.534.452.927.61）42.728.31）