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1、一、菌種保藏定期移植保藏法將菌種接在斜面培養(yǎng)基上待菌落生長(zhǎng)完好后于4度冰箱保藏。每隔一段時(shí)間移植一次再將新長(zhǎng)好的斜面保藏。用于斜面保藏的培養(yǎng)基要求含氮多,少含或者不含糖分。即滿(mǎn)足菌種生長(zhǎng)繁殖需要,又防止產(chǎn)酸過(guò)多影響菌種保藏。缺點(diǎn):菌株仍有代謝活性,保藏時(shí)間不能太長(zhǎng),傳代多,易變異。細(xì)菌一般用營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,37度培養(yǎng),酵母菌一般用麥芽汁酵母膏培養(yǎng)基,28—30度培養(yǎng),霉菌采用馬鈴薯葡萄糖瓊脂或者麥芽汁或察氏培養(yǎng)基,30度培養(yǎng)。保藏溫度4
2、—6攝氏度。細(xì)菌要求每月移植一次,酵母和霉菌3月移植一次。保藏時(shí)觀(guān)察冰箱溫度、濕度、試管棉塞是否有長(zhǎng)霉現(xiàn)象,如有異常應(yīng)立即取出重新移植。每次移植應(yīng)與原種進(jìn)行菌落、細(xì)胞形態(tài)對(duì)比,必要時(shí)做生產(chǎn)性能檢測(cè)。應(yīng)保藏相繼的三代培養(yǎng)物,以便對(duì)照。二、試管接種培養(yǎng)接種前手滅菌,將試管菌種,斜面培養(yǎng)基及其他用具用酒精消毒,一手拿菌種和培養(yǎng)基試管,一手拿接種針在酒精燈上灼燒,凡是進(jìn)入試管的部分都必須灼燒,待冷卻后把試管移近酒精燈,用右手小指無(wú)名指拔去棉塞用
3、手指夾住,管口應(yīng)在酒精燈火焰無(wú)菌區(qū)內(nèi),棉四、簾子曲麩皮加水滅菌,出鍋裝入筐中,房間滅菌,雙手滅菌,穿工作服,冷卻到36—38℃,接入三角瓶種曲,先將三角瓶種曲與適量滅菌干麩皮拌勻,分撒入曲料,混勻,用紗布抱起來(lái)堆積培養(yǎng)。堆積培養(yǎng)開(kāi)始品溫30℃,水分50—53%,酸度0.3—0.5,室溫29左右,干濕球相差1—2度,剛開(kāi)始處于孢子發(fā)芽期,產(chǎn)熱少,用室溫維持品溫,堆積有利于保溫保濕,曲料不易失水。堆積3—4小時(shí)翻拌一次,再經(jīng)5小時(shí)左右,曲料
4、變白結(jié)塊,品溫接近38℃,將曲料打碎,迅速上簾。上簾應(yīng)輕松均勻,攤平,厚度1.5厘米左右,蓋滅菌濕潤(rùn)紗布,紗布含水不易多,嚴(yán)禁有水滴入曲料,室溫28℃左右,濕度85—90%,品溫30—32.上簾后5—6小時(shí),曲料上呈白色菌絲,品溫升高到36℃左右,有結(jié)塊現(xiàn)象,劃頭遍曲,要求將曲料捏碎,用小噴霧器均勻噴灑補(bǔ)加30%40%的40℃溫開(kāi)水。在經(jīng)過(guò)6—8小時(shí),菌絲大量生長(zhǎng),劃2遍曲。劃頭遍曲后品溫上升較快,室溫25℃左右,地面灑水,濕度85%,
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