車間微生物檢驗(yàn)方法

1、SNT18972007食品中菌落總數(shù)的測(cè)定也可以用于與食品接觸的設(shè)備表面的。附錄A。另有自定的例一：物體表面采樣及檢查方法采樣面積被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。采樣方法用55cm2的標(biāo)準(zhǔn)滅菌規(guī)格板；放在被檢物體表面，用浸有無(wú)菌生理鹽水液的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次；并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭于。連續(xù)采樣1～4個(gè)規(guī)格板面積；剪去手接觸部分，將棉拭于放入裝10ml采樣液的試管中送檢。門把手等小

2、型物體則采用棉拭子直接涂抹物體的方法采樣。培養(yǎng)（略）例二：空氣及與食品接觸面微生物檢驗(yàn)方法、檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)1、目的：檢測(cè)生產(chǎn)車間空氣、操作人員手部、與食品有直接接觸面的機(jī)械設(shè)備的微生物指標(biāo)，生產(chǎn)區(qū)域環(huán)境當(dāng)中病原微生物的監(jiān)控，達(dá)到規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，以控制食品成品的質(zhì)量。2、參照標(biāo)準(zhǔn)：中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》GB15979－1995、《HACCP原理與實(shí)施》、中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《公共場(chǎng)所空氣微生物檢驗(yàn)方法細(xì)菌總數(shù)測(cè)定》GB

3、T18204.1－2000、中華人民共和國(guó)進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN016992SN017292SN017092、出入境檢驗(yàn)檢疫局二000四年《出入食品微生物檢驗(yàn)培訓(xùn)教材》中《出入食品生產(chǎn)廠衛(wèi)生細(xì)菌檢驗(yàn)方法》、日本東京冷凍食品檢驗(yàn)方法。3、采樣與檢測(cè)方法：3.1空氣的采樣與測(cè)試方法3.1.1樣品采集：(1)取樣頻率：a)車間轉(zhuǎn)換不同衛(wèi)生要求的產(chǎn)品時(shí)，在加工前進(jìn)行采樣，以便了解車間衛(wèi)生清掃消毒情況。b)全廠統(tǒng)一放長(zhǎng)假后，車間生產(chǎn)前，進(jìn)行采

4、樣。c)產(chǎn)品檢驗(yàn)結(jié)果超內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，應(yīng)及時(shí)對(duì)車間進(jìn)行采樣，如有檢驗(yàn)不合格點(diǎn)，整改后再進(jìn)行采樣檢驗(yàn)。d)實(shí)驗(yàn)性新產(chǎn)品，按客戶規(guī)定頻率采樣檢驗(yàn)。e)正常生產(chǎn)狀態(tài)的采樣，每周一次。（2）采樣方法在動(dòng)態(tài)下進(jìn)行，室內(nèi)面積不超過(guò)30m2，在對(duì)角線上設(shè)里、中、外三點(diǎn)，里、外點(diǎn)位置距墻1m；室內(nèi)面積超過(guò)30m2，設(shè)東、西、南、北、中五點(diǎn)，周圍4點(diǎn)距墻1m。采樣時(shí)，將含平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的平板(直徑9cm)置采樣點(diǎn)(約桌面高度)，并避開空調(diào)、門窗等空氣流通

5、處，打開平皿蓋，使平板在空氣中暴露5min。采樣后必須盡快對(duì)樣品進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測(cè)，送檢時(shí)間不得超過(guò)6h，若樣品保存于0～4℃條件時(shí)，送檢時(shí)間不得超過(guò)24h。3.1.2菌落培養(yǎng)：（1）在采樣前將準(zhǔn)備好的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板置37℃1℃培養(yǎng)24h，取出檢查有無(wú)污染，將污染培養(yǎng)基剔除。（2）將已采集樣品的培養(yǎng)基在6h內(nèi)送實(shí)驗(yàn)室，細(xì)菌總數(shù)于37℃1℃培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，計(jì)數(shù)平板上細(xì)菌菌落數(shù)。（3）菌落計(jì)算：a)記錄平均菌落數(shù)，用“個(gè)皿”來(lái)報(bào)

6、告結(jié)果。用肉眼直接計(jì)數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5～10倍放大鏡檢查，不可遺漏。b)若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。3.2工作臺(tái)（機(jī)械器具）表面與工人手表面采樣與測(cè)試方法：中，每個(gè)稀釋度接種三管。b)置肉湯管于361℃的恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)48小時(shí)。劃線接種于表面干燥的BP瓊脂平板，置36℃1℃培養(yǎng)45～48小時(shí)。c)從BP瓊脂平板上，挑取典型或可疑金黃色葡萄球菌菌落接種肉湯培養(yǎng)基，36℃1℃培

7、養(yǎng)20～24小時(shí)。d)取肉湯培養(yǎng)物做血漿凝固酶試驗(yàn)，記錄試驗(yàn)結(jié)果。e)報(bào)告結(jié)果：根據(jù)凝固酶試驗(yàn)結(jié)果，查MPN表報(bào)告每25cm2食品接觸面中或每只手的金黃色葡萄球菌值。3.3工廠環(huán)境中病原體的檢測(cè)計(jì)劃與方法檢測(cè)計(jì)劃：為了保證食品安全，工廠應(yīng)該對(duì)生產(chǎn)環(huán)境中的病原微生物進(jìn)行檢測(cè)和評(píng)估，檢測(cè)項(xiàng)目包括李斯特菌，沙門氏菌等病原體微生物，化驗(yàn)室應(yīng)該按照一定的計(jì)劃對(duì)生產(chǎn)場(chǎng)所環(huán)境中的病原體進(jìn)行檢測(cè)，其中包括地面、下水道、排水溝、墻壁、天花板、設(shè)備框架、運(yùn)

8、輸?shù)闹Ъ埽洳匮b置、速凍機(jī)、傳送帶、設(shè)備的螺絲、維修工具等部位。當(dāng)某個(gè)點(diǎn)檢測(cè)到病員微生物時(shí)，應(yīng)該對(duì)環(huán)境中的相似點(diǎn)加大檢測(cè)頻率；在把所有的預(yù)定點(diǎn)檢測(cè)完后，應(yīng)該對(duì)環(huán)境中的病原微生物的存在狀況進(jìn)行全面評(píng)估，在下一次環(huán)境檢測(cè)循環(huán)過(guò)程中加強(qiáng)檢測(cè)容易出現(xiàn)病原體的環(huán)境點(diǎn)，達(dá)到持續(xù)改進(jìn)的目的。檢測(cè)頻率:每月兩次每次每個(gè)區(qū)域至少選取5個(gè)檢測(cè)點(diǎn)分別進(jìn)行檢測(cè)。3.3.1環(huán)境李斯特菌的檢測(cè)方法（3MTMPetrifilmTM環(huán)境李斯特菌的測(cè)試片）3.3.1.1

9、用涂抹棒，海綿或者其他采樣設(shè)備收集環(huán)境樣本。3.3.1.2將收集的樣本添加10毫升滅菌的緩沖蛋白胨水，將樣本與緩沖蛋白胨混合1分鐘，將樣品置于室溫（2030℃）1小時(shí)，最久不超過(guò)1.5小時(shí)，以修復(fù)損傷的李斯特菌。3.3.1.3將測(cè)試片放在平坦處，掀起上層膜。3.3.1.4用移液器垂直滴加3毫升樣品到下層膜中央，將上層膜緩慢蓋下，以免產(chǎn)生氣泡。3.3.1.5輕輕將塑料壓板放在位于接種區(qū)上層膜上，不要壓，扭轉(zhuǎn)或者滑動(dòng)壓板。提起壓板等至少十分

10、鐘，以使膠體凝固。3.3.1.6將測(cè)試片透明面朝上，可疊放至十片，在37℃1℃培養(yǎng)2630小時(shí)，可以用標(biāo)準(zhǔn)菌落記數(shù)器或者其他光學(xué)放大器判讀，不要記數(shù)圓形輪廓上的菌落，因?yàn)樗麄儾皇苓x擇性培養(yǎng)基的影響。3.3.1.7對(duì)于定性檢測(cè)，根據(jù)紫紅色菌落是否存在，結(jié)果記為檢出或者未檢出。3.3.2環(huán)境中沙門氏菌的檢測(cè)方法3.3.2.1采樣地點(diǎn):選取采樣點(diǎn)時(shí)因盡量選取微生物容易滋生的地方3.3.2.2操作步驟3.3.2.2.1采樣應(yīng)在生產(chǎn)開始后進(jìn)行，用