部分發(fā)酵產(chǎn)品生產(chǎn)工藝及培養(yǎng)基配方

1、部分發(fā)酵產(chǎn)品生產(chǎn)工藝及培養(yǎng)基配方部分發(fā)酵產(chǎn)品生產(chǎn)工藝及培養(yǎng)基配方我國(guó)1958年才開(kāi)始赤霉素的研究、生產(chǎn)和推廣應(yīng)用，并于1969年因?yàn)辄h的“九大召開(kāi)及國(guó)慶20周年，故把赤霉素稱之為九二O”25nm’發(fā)酵罐工業(yè)化生產(chǎn)試驗(yàn)21試驗(yàn)材料與方法211菌種：G—l14212試驗(yàn)地點(diǎn)：湖南生物制藥廠213培養(yǎng)基①種子培養(yǎng)基(w／w)：葡萄糖15糊精10花生粉15MgSO47HzO01KH2PO401消泡劑02自來(lái)水配制，自然pH值6m3種子罐中投料3

2、m3，實(shí)罐消毒121℃，30分鐘，冷卻至28℃待接種。②發(fā)酵培養(yǎng)基(w／w)：玉米淀粉70飴糖25；豆餅粉03花生粉10MgSO47H2O007KH2PO4014；消沫劑005，a一淀粉酶0.05，50m3發(fā)酵罐投料40m3。pH值自然，實(shí)罐消毒121“C，30分鐘，冷卻至28℃后接入種子培養(yǎng)液2，14發(fā)酵設(shè)備；種子罐6m3，二檔攪拌發(fā)酵罐體積50m3。，三檔攪拌流加罐用另一種子罐代替215發(fā)酵條件種子罐：培養(yǎng)溫度28℃士I℃，通風(fēng)量l

3、：Iv／v，罐壓04—05kg／cm2發(fā)酵罐：培養(yǎng)溫度28士l℃，通風(fēng)量l：07v／v，罐壓01—015kg／cm2赤霉素發(fā)酵參考環(huán)境：10～60噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)分，通風(fēng)量1：1分，培養(yǎng)溫度大多采用29℃～32℃。培養(yǎng)基的起始pH值控制在5.5左右，而將發(fā)酵過(guò)程的pH值維持在3.5～4.5之間為宜。種子培養(yǎng)基：葡萄糖0.3g，蒸餾水lOOml。豆餅粉1.5g，淀粉1.Og，葡萄糖1.Og，KH2PO40.lg，(NH4)2SO40

4、05g，MgSO40.1g，自來(lái)水lOOml。發(fā)酵培養(yǎng)基：豆餅粉0.9％淀粉7.0％，葡萄糖1.0％，KH2PO40.15％，MgSO40.08％，a淀粉酶0.003％，pH5～5.5發(fā)酵周期130小時(shí)阿維菌素：種子培養(yǎng)基(gL)：淀粉30，豆餅粉20，酵母粉2.0，CoCl26H200.0005pH70～72。發(fā)酵培養(yǎng)基(g／L)：淀粉50，玉米粉l0，酵母粉l0，豆餅粉10CaCO32.0，CoCl26HaO00005，pH7.0～

5、7.2。妥布霉素發(fā)酵培養(yǎng)基：黃豆餅粉2.5；葡萄糖1.O；玉米粉1.O；玉米淀粉1.5；(NH4)2SO40.5；魚(yú)粉O.4；MgS040.6；油1.0；ZnSO40.05；CaCO30.6溫度37℃發(fā)酵時(shí)間112h左右。發(fā)酵菌種采用黑暗鏈霉菌。NaCl0.5%，CaCO30.5%，MgSO40.0025%，(NH4)2SO40.25%，K2HPO40.02%不變。11l菌種：諾爾斯鏈霉菌西昌變種。112培養(yǎng)基：孢子斜面培養(yǎng)基(％)：可

6、溶性淀粉2蔗糖1，硝酸鉀1，磷酸氫二鉀05，硫酸鎂05，氯化鈉05，碳酸鈣05，硫酸亞鐵001，瓊脂2，滅菌前pH72～74。種子培養(yǎng)基(％)：玉米粉2，黃豆餅粉3，酵母粉001，磷酸氫二鉀001，硫酸鎂O0025，氯化鈉002，碳酸鈣003，滅菌前pH70。發(fā)酵培養(yǎng)基(％)：玉米粉2，花生餅粉35，酵母粉005，磷酸氫二鉀002，硫酸鎂005，氯化鈉03，碳酸鈣05，滅菌前pH70。113發(fā)酵流程：續(xù)發(fā)酵48h達(dá)到發(fā)酵高峰。阿維菌素：

7、多抗霉素參考發(fā)酵培養(yǎng)基(％)；玉米粉：1.5，豆餅粉：2.0，飴糖：2.0，KH2P04：O.1，NaCl：0.1，CaC03：O.3，pH6.5。10％接種量，28℃，120h。BT:一系列發(fā)酵罐間歇發(fā)酵結(jié)果表明：該茵生長(zhǎng)的最適pH在70—72，弱堿性條件有利于芽泡及晶體的形成；增加培養(yǎng)基中糖含量顯著提高茵體的生長(zhǎng)量，但對(duì)芽泡及晶體的形成均有一定影響；高通氣量有利于菌的生長(zhǎng)，并可縮短發(fā)酵周期，但后期通氣量過(guò)大影響芽泡及晶體形成。該菌制

8、刑發(fā)酵罐間歇發(fā)酵的最佳工藝條件為：控制發(fā)酵溫度在30℃，發(fā)酵前期(包括延遲期、加速期、對(duì)數(shù)期)pH控制在70，采用達(dá)1：20V／(Vmin)的大通氣量，達(dá)1：20V／(Vmin)，為菌的生長(zhǎng)提供良好的環(huán)境，盡可能提高菌數(shù)(高于75x10的10次方／ml)；發(fā)酵后期(減速期、恒定期)不控制PH，并適當(dāng)減小通氣旦到1：051：10V／(Vmin)，更有利于茵體向芽孢及伴孢晶體轉(zhuǎn)化(98％以上)。液體培養(yǎng)基(％)I號(hào)培養(yǎng)基：牛肉膏05，蛋白胨

9、15，NaCl05，pH72，H號(hào)培養(yǎng)基：牛肉膏05，蛋白胨15，NaCl05，葡萄糖10，PH7.2衣康酸發(fā)酵參考環(huán)境：5～100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)分，通風(fēng)量1：0.2分，罐壓0.7公斤，pH在4左右，培養(yǎng)基主要成分為葡萄糖14%米糠0.3%，各種無(wú)機(jī)鹽適量，發(fā)酵菌種采用土曲霉發(fā)酵周期90小時(shí)。曲酸發(fā)酵參考環(huán)境：5～100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)分，通風(fēng)量1：0.2分，罐壓0.7公斤，pH在4左右，培養(yǎng)基主要成分為液化淀粉14%各種