湖北海棠總黃酮純化工藝研究

1、湖北海棠總黃酮純化工藝研究郭東艷1，王幸1，唐志書(shū)1，汪鋆植2（1.陜西中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院，陜西咸陽(yáng)712046；2天然產(chǎn)物研究與應(yīng)用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北宜昌443002）摘要摘要目的目的優(yōu)化湖北海棠總黃酮分離純化工藝。方法方法以總黃酮含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用大孔吸附樹(shù)脂法進(jìn)行純化，確定總黃酮純化工藝條件。結(jié)果結(jié)果湖北海棠總黃酮最佳分離純化工藝為：選用HPD100型大孔樹(shù)脂，樹(shù)脂與藥材的質(zhì)量比為1:1.74，上樣藥液濃度為0.15gmL，上樣

2、流速為2BVh，樹(shù)脂徑高比為1:10，洗脫時(shí)先用4BV水洗除雜，再用4BV70%乙醇洗脫，洗脫速度為1BVh；結(jié)論結(jié)論純化工藝簡(jiǎn)便、可行，適合工業(yè)化生產(chǎn)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞湖北海棠；總黃酮；純化；大孔樹(shù)脂中圖分類(lèi)號(hào)：R284.2StudyonPurificationfTotalflavoneofMalushupehensisGUODongyan1，WANGXing1，TANGZhishu1，WANGJunzhi2（1.TheMedicineC

3、ollegeofShaanxiUniversityofChineseMedicineXianyang712046，China；2.HubeiKeyLabatyofNaturalProductsResearchDevelopment，Yichang443002China）[Abstract]Objective:TooptimizeseparationpurificationftotalflavoneofMalushupehensisMet

4、hod:TakingthetotalflavonecontentasevaluationindextodeterminepurificationconditionoftotalflavonebyingMacropousabsptionresinResult:TheoptimumseparationpurificationftotalflavoneofMalushupehensiswereasfollows:HPD100Macropous

5、resinwasfitted.themassproptionofresinmedicinewas1:1.74theabsptioncapacityofHPD100Macropousresinwas0.15gmLthevelocityofabsptionwas2BVh，thediameterheightratioofresincolumnwas1:10theelutingreagentwas4BVwater4BV70%ethanolelu

6、tingratewas1BVhConclusion:Thisoptimizedpurificationtechnologywasconvenientfeasibleitcouldsuitindustrializationproduction.[Keywds]MalushupehensistotalflavonepurificationMacropousresin.國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81202905）；陜西省科技廳項(xiàng)目（2013K

7、TCQ0312）；陜西省教育廳項(xiàng)目（11JS036）郭東艷（1973年），女，博士，教授，主要研究方向：中藥新制劑與新劑型的研究。Tel：（029）38185180Email：醇，備用。③靜態(tài)吸附將經(jīng)過(guò)預(yù)處理的7種大孔樹(shù)脂（YWD01G3、YWD03F、AB8、D101、HPD100、HPD300、HPD600、）抽干表面的水分，各準(zhǔn)確稱(chēng)取3.0g，分別放置在250mL錐形瓶中，再分別加入①項(xiàng)下湖北海棠上樣藥液160mL，將各錐形瓶放在

8、恒溫水浴振蕩器中，于37℃緩慢振搖使樹(shù)脂充分吸附，24h后，濾過(guò)，收集殘留液，并將樹(shù)脂用少量流動(dòng)的去離子水洗去表面的殘留藥液，再放入各錐形瓶中，加入130mL70%乙醇于37℃振搖洗脫，24h后，濾過(guò)，收集洗脫液。精密移取以上各殘留液、洗脫液0.5mL于蒸發(fā)皿中蒸干，將殘?jiān)?0%甲醇溶解并定容至10mL量瓶中，依法測(cè)定其總黃酮含量。2.3總黃酮純化工藝研究[8]①泄漏曲線(xiàn)的考察精密稱(chēng)取預(yù)處理過(guò)的HPD100型大孔吸附樹(shù)脂約8g，濕法裝

9、入2cm40cm的柱內(nèi)(1BV=20mL)。取湖北海棠水提液緩慢加入，控制流量為1BVh，分別收集過(guò)柱液20份，每份20mL，水浴蒸干，加50%甲醇均定容于10mL量瓶中，0.45μm濾膜濾過(guò)，測(cè)總黃酮含量。②上樣藥液濃度的考察稱(chēng)取4份經(jīng)預(yù)處理過(guò)的HPD100型大孔樹(shù)脂各8g，濕法裝入2cm40cm的柱內(nèi)。取湖北海棠水提液，分別配制成濃度為含生藥0.05gmL、0.10gmL、0.15gmL、0.20gmL的藥液，將藥液緩慢上樣，以2B

10、Vh的流速進(jìn)行吸附，再以2BVh的去離子水洗脫后，最后用70%乙醇洗脫，收集洗脫液至100mL。各精密移取1mL，蒸干，加甲醇定容至10mL量瓶中，測(cè)定總黃酮的含量，計(jì)算比吸附量及吸附率。③樹(shù)脂柱徑高比的考察稱(chēng)取4份經(jīng)預(yù)處理過(guò)的HPD100型大孔樹(shù)脂濕法裝柱（1cm40cm），使徑高比分別為1:5、1:10、1:15、1:20，分別取濃度為含生藥0.15gmL的藥液適量，加于HPD100樹(shù)脂柱上，以2BVh的流速進(jìn)行吸附后，先以2BVh

11、水洗脫后，再用70%乙醇洗脫，收集洗脫液至100mL，測(cè)定總黃酮的含量，計(jì)算比吸附量及吸附率。④上樣藥液流速的考察稱(chēng)取4份經(jīng)預(yù)處理過(guò)的HPD100型大孔樹(shù)脂濕法裝柱（1cm10cm，V=10.45mL），徑高比為1:10。取濃度為含生藥0.15gmL的藥液60mL，4份。取4份上樣藥液分別上樣，流速分別為0.5BVh，1BVh，2BVh，3BVh，再用25mL的水以2BVh的流速進(jìn)行洗脫除雜，最后用70%乙醇洗脫，收集洗脫液至100mL

12、。測(cè)定總黃酮含量，計(jì)算比吸附量及吸附率。⑤水洗除雜工藝的考察稱(chēng)取經(jīng)預(yù)處理的HPD100大孔樹(shù)脂濕法裝柱（1cm10cm，V=10.45mL），徑高比為1:10。取濃度為0.15gmL的上樣藥液60mL，以2BVh的流速上樣，再用去離子水洗脫，以10mL（1BV）為一個(gè)單位進(jìn)行接收，共接收水洗脫液11個(gè)單位。測(cè)定各水洗液中總黃酮的含量并繪制曲線(xiàn)圖。⑥解吸附乙醇濃度的考察稱(chēng)取經(jīng)預(yù)處理的HPD100大孔樹(shù)脂濕法裝柱（1cm10cm，V=10.