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文檔簡介
1、MicroRNA(miRNA)是一類內(nèi)源性的非編碼核糖核酸分子。研究表明,miRNA可作為疾病的分型、診斷和預(yù)后的生物標志物?,F(xiàn)有的miRNA檢測方法主要有Northern blot,微陣列,PCR等,但是這些方法存在一定缺陷,如靈敏度低,操作繁瑣,重復(fù)性差等。因此,需要發(fā)展一種穩(wěn)定的,靈敏的,方便的miRNA檢測方法。在本研究中,基于多組分核酸酶介導(dǎo)的錯配催化發(fā)夾自組裝(MNAzyme-CHA),構(gòu)建了一種簡單的表面等離子共振(SPR
2、)生物傳感器實現(xiàn)對 miRNA的高靈敏、高特異性檢測。游離的MNAzyme片段能同時識別靶物質(zhì)形成穩(wěn)定的有活性的MNAzyme,然后持續(xù)裂解發(fā)夾H0,產(chǎn)生大量單鏈DNA片段。該片段能夠觸發(fā)CHA反應(yīng),產(chǎn)生大量的H1-H2復(fù)合物。最終,H1-H2復(fù)合物和鏈霉親合素結(jié)合到傳感芯片表面,輸出放大的SPR信號。構(gòu)建的生物傳感器檢測限低至1 pM,檢測范圍為1 pM-100 nM,并具有較高的特異性。該傳感器能夠成功的檢測總RNA標本中特定的mi
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