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文檔簡介
1、汞離子廣泛存在于自然界,是環(huán)境中毒性最強的重金屬元素之一,影響食品和環(huán)境安全,危害人體健康。通常汞離子檢測依賴大型儀器,耗時長且價格昂貴,難以滿足大量、快速檢測的需求,大大限制了它們在實際檢測中的應(yīng)用。為了實現(xiàn)汞離子方便快速的現(xiàn)場檢測,本文研發(fā)了基于膜技術(shù)的兩種汞離子檢測方法,增敏型核酸層析試紙條法和核酸陣列法。
(1)增敏型核酸層析試紙條法
增敏型核酸層析紙條法是一種直接的超靈敏的現(xiàn)場檢測方法。基于T-Hg2+-T
2、特定的識別系統(tǒng),以金納米粒子(AuNPs)作為顯色標(biāo)記物,檢測Hg2+。信號增敏是指將金納米粒子用兩條互補的寡核苷酸探針分別標(biāo)記,以增強檢測線的信號強度。兩條探針的存在使傳感信號得到放大,由此可以快速和靈敏的檢測Hg2+。其肉眼視覺觀察和軟件定量分析檢測Hg2+的檢測限分別為0.005 ppb和0.0015 ppb。傳統(tǒng)型核酸層析試紙條肉眼可觀測的檢測限僅為0.2 ppb,相比于傳統(tǒng)型核酸層析試紙條,增敏型核酸層析試紙條靈敏度提高了40
3、倍。同時本方法成功應(yīng)用于實際水樣中Hg2+的檢測。
(2)核酸陣列法
基于膜技術(shù)核酸陣列法檢測汞離子的方法,實驗設(shè)計了兩條富T的寡核苷酸探針,其中一條作為捕獲探針以陣列的形式固定在硝酸纖維素膜(NC膜)上,另外一條通過Au-S鍵偶聯(lián)在金納米粒子上,當(dāng)檢測汞離子時,兩條富T的探針,通過形成T-Hg2+-T結(jié)構(gòu),使兩條DNA探針雜交,將金納米粒子捕捉在NC膜上,顯色,肉眼觀測檢測限僅為0.5 ppb。然后,利用金納米粒子
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