AML1基因斷裂融合檢測新方法的建立.pdf

1、目的:建立一種簡便的方法快速篩選出AML1基因發(fā)生斷裂融合事件的病例，以尋找與AML1發(fā)生斷裂融合的新的伙伴基因。 方法:(1)應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcriptase—polymerase chain reaction，RT—PCR)檢測了68例初發(fā)急性白血病患者AML1/ETO融合基因；(2)應(yīng)用實時定量逆轉(zhuǎn)錄PCR(real—time quantitative reverse transcript

2、ion polymerase chain reaction，RQ—RT—PCR)，以AML1基因上恒定表達的區(qū)域作為內(nèi)對照(C區(qū))，AML1基因斷裂位點發(fā)生區(qū)域為B區(qū)，檢測了68例初治急性白血病患者和26例正常對照AML1基因的B/C比值。 結(jié)果:(1)68例初發(fā)急性白血病患者骨髓標本中，16例病例AML1/ETO融合基因轉(zhuǎn)錄本陽性，陽性檢出率為23.5％(16/68)。26例正常對照標本全部為陰性；(2)AML1/ETO陽性組

3、AML1基因B/C比值明顯低于對照組(P＜0.05)；(3)68例初發(fā)急性白血病患者22例B/C比值低于正常對照組，陽性檢出率為32.3％(22/68)；(4)22例B/C比值降低病例中16例與傳統(tǒng)RT—PCR方法檢測結(jié)果一致。檢測到可疑病例共6例，包括M22例，M44例，可能攜帶新的“伙伴”基因。 結(jié)論:B/C比值法可有效篩選AML1基因發(fā)生斷裂融合事件的病例，與傳統(tǒng)RT—PCR法相結(jié)合，將有利于發(fā)現(xiàn)AML1基因新的伙伴基因。