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文檔簡介
1、目的：建立一種新型基因轉(zhuǎn)換系統(tǒng)，用于檢測TP53基因（R175H)早期突變，為腫瘤的早期篩查提供依據(jù)。
方法：構(gòu)建TP53基因野生型DNA模板（含NarI酶切位點(diǎn)）和突變DNA模板。將TP53基因野生型基因片段與突變型基因片段按照野生:突變（W:T）=1:0，100：1，300：1，1000：1的比例混合，使用高保真DNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增，過程中不斷添加限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切消化，并對其產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增后再行測序。
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