應(yīng)用微切割技術(shù)對胃癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定和TP53基因突變的研究.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文應(yīng)用微切割技術(shù)對胃癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定和TP53基因突變的研究姓名：許晶虹申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：陳麗榮20040501晰江大學(xué)博士學(xué)位論文應(yīng)用微切割技術(shù)對胃癌微衛(wèi)星不穩(wěn)定和TP53基因突變的研究浙江大學(xué)腫瘤研究所博士生：許晶虹導(dǎo)師：陳麗榮教授摘要胃癌在全世界范圍內(nèi)是第二常見的惡性腫瘤。它的發(fā)病率和死亡率在許多國家都非常高，例如日本、中國、南美、葡萄牙和意大利。而在國內(nèi)我省(浙江省)的胃癌發(fā)病率和死亡率也都

2、高于全國的平均水平。這種胃癌的不同地理分布可能與患者不同的遺傳基礎(chǔ)和生活環(huán)境有關(guān)。現(xiàn)已公認(rèn)舯瘤的發(fā)生發(fā)展是多基因積累和多步驟發(fā)展的過程。多年來對胃癌的研究表明，多基因積累包括了Kras突變、cerbB2擴增等癌基因的激活：APC、TP53突變等抑癌基因的失活以及染色體的雜合性缺失、基因的不穩(wěn)定、端粒酶的激活、cpG島的甲基化、細(xì)胞周期的異常等等。多步驟發(fā)展包括了癌前病變、早期胃癌、進(jìn)展期胃癌(浸潤和轉(zhuǎn)移)等階段。然而，現(xiàn)有的研究中存在許

3、多結(jié)果不一致，甚至是相互矛盾的地方。可能與胃癌的發(fā)病機理在不同人種、不同地域之間存在不一致：各實驗小組所采用的實驗材料、方法、指標(biāo)不同等原因有關(guān)。尤其在實驗的材料模板上，多以腫瘤的組織塊為主，組織塊中腫瘤成分的多少是直接影響實驗結(jié)果的重要因素。同時在多步驟的研究中，主要集中在處在各不同階段病例的腫瘤原發(fā)灶的研究，而對原發(fā)灶腫瘤向外浸潤、轉(zhuǎn)移過程中的分子變化研究甚少。為此，我們應(yīng)用激光顯微切割系統(tǒng)，通過建立的石蝤切片LMDPCR和IHCL

4、MDPCR技術(shù)，分別切割和收集各種胃腺癌的原發(fā)灶、脈管內(nèi)瘤栓和威漤巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶莉，或遠(yuǎn)處臟器轉(zhuǎn)移灶和，或播散灶等。觀察在胃癌演迸過程中起重要作用的兩個分予事件，微衛(wèi)星不穩(wěn)定和TP53基因突變的改變。通過分析微衛(wèi)星不穩(wěn)定和TP53基因突變，以及TP53基因突變與TP53蛋白表達(dá)的關(guān)系，進(jìn)一步闡明微衛(wèi)星不穩(wěn)定和TP53基因突變在胃腺癌浸潤轉(zhuǎn)移過程中的變化以及發(fā)揮的重要作用，并為今后胃腺癌分子病理學(xué)診斷的開展提供重要的實驗基礎(chǔ)。第一部分：建立石