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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:建立一種簡(jiǎn)便的方法快速篩選出AML1基因發(fā)生斷裂融合事件的病例,以尋找與AML1發(fā)生斷裂融合的新的伙伴基因。 方法:(1)應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)檢測(cè)了AML1/ETO融合基因; (2)應(yīng)用半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng),結(jié)合電泳條帶灰度分析,以AML1基因上恒定表達(dá)的區(qū)域作為內(nèi)對(duì)照(C區(qū)),AML1基因斷裂位點(diǎn)發(fā)生區(qū)
2、域?yàn)锽區(qū),檢測(cè)了87例初治急性白血病患者和24例正常對(duì)照AML1基因的B/C比值。 結(jié)果:(1)87例初發(fā)急性白血病患者骨髓標(biāo)本中,15例M2病例和1例M4病例AML1/ETO融合基因轉(zhuǎn)錄本陽(yáng)性,陽(yáng)性檢出率分別為39.47%(15/38)和3.57%(1/29),總體陽(yáng)性檢出率為18.4%(16/87)。24例正常對(duì)照標(biāo)本全部為陰性。(2)AML1/ETO陽(yáng)性組AML1基因B/C比值明顯低于對(duì)照組(P<0.001); 87例初發(fā)
3、急性白血病患者31例B/C比值低于正常對(duì)照組,陽(yáng)性檢出率為35.6%(31/87)。(3)31例B/C比值降低病例中16例與傳統(tǒng)RT-PCR方法檢測(cè)結(jié)果一致。檢測(cè)到可疑病例共15例,包括M1 1例,M2 3例,M4 7例,M5 2例,M6 1例,ALL 1例,可能攜帶新的"伙伴"基因。(4)可疑病例組CR率與AML1/ETO陰性且B/C比值正常組CR率分別為50%與53.3%,均低于AML1/ETO陽(yáng)性組(78.6%)。但三組間緩解率比
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