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1、一 教學(xué)要求,學(xué)習(xí)凝集反應(yīng)的類型及原理掌握間接法檢測(cè)血清類風(fēng)濕因子的方法,實(shí)驗(yàn)三 間接凝集反應(yīng)檢測(cè)血清類風(fēng)濕因子,二 實(shí)驗(yàn)原理,(1)凝集反應(yīng)原理 細(xì)菌和細(xì)胞等顆粒性抗原與相應(yīng)抗體特異性結(jié)合后,在適量的電解質(zhì)存在下,可以出現(xiàn)肉眼可見的凝集現(xiàn)象,并將此種反應(yīng)稱為抗原抗體的凝集反應(yīng)。根據(jù)檢測(cè)凝聚反應(yīng)的條件可將起分為玻片法,試管法和微量法。根據(jù)試驗(yàn)中抗原與抗體的檢測(cè)方式分為2類:a.直
2、接凝集反應(yīng),顆粒性抗原與抗體直接反應(yīng)而凝集;b.間接凝集反應(yīng),將可溶性抗原事先吸附或偶聯(lián)于與免疫無關(guān)的顆粒載體表面,制成致敏載體顆粒,再與相應(yīng)抗體反應(yīng)。 此方法比較簡(jiǎn)單,但因敏感性較差,一般只用在顆??乖庖吆罂贵w效價(jià)的檢測(cè)、血型配型檢測(cè)和細(xì)菌檢測(cè)等方面。,(2)間接凝集反應(yīng)檢測(cè)類風(fēng)濕因子原理 類風(fēng)濕因子(RF)是由于細(xì)菌、病毒等感染因子,引起體內(nèi)產(chǎn)生的以變性IgG(一種抗體)為抗原的一種自身抗體
3、。目前已知有四種類風(fēng)濕因子,即IgM型、IgA型、IgG型、IgE型。其中IgM和IgA類風(fēng)濕因子易于檢測(cè),而IgG類風(fēng)濕因子難于測(cè)出。IgA類風(fēng)濕因子及IgM類風(fēng)濕因子對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎診斷有較好的參考價(jià)值。 一般醫(yī)院主要采用乳膠凝集法和酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定類風(fēng)濕因子。 將IgG吸附于聚苯乙烯膠乳上,RF與其反應(yīng)可產(chǎn)生凝集現(xiàn)象。,三 材料與器材(略),,四 操作步驟,(1)在3塊載玻片上分別加一滴RF陽性血清
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