十一、哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗

1、122十一、哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗十一、哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗InVivoMammalianBoneMarrowCellChromosomeAberrationTest1范圍范圍本規(guī)范規(guī)定了哺乳動物骨髓細胞染色體畸變試驗的基本原則、要求和方法。本規(guī)范適用于檢測化妝品原料及其產(chǎn)品的遺傳毒性。2規(guī)范性引用文件規(guī)范性引用文件OECDGuidelinesfTestingofChemicals（No.475April1997）3試

2、驗目的試驗目的本試驗是一項致突變性試驗，檢測整體動物骨髓細胞染色體畸變，以評價受試物致突變的可能性。4定義定義染色體型畸變(Chromosometypeaberration)：染色體結構損傷，表現(xiàn)為在兩個染色單體的相同位點均出現(xiàn)斷裂或斷裂重組的改變。染色單體型畸變(Chromatidtypeaberration)：染色體結構損傷，表現(xiàn)為染色單體斷裂或染色單體斷裂重組的損傷。染色體數(shù)目改變(Numericalfypeaberration)

3、：哺乳動物細胞正常染色體數(shù)目的改變。5試驗基本原則試驗基本原則使哺乳動物（如大鼠或小鼠）經(jīng)口或其它適宜途徑染毒，動物處死前用細胞分裂中期阻斷劑處理，處死后制備骨髓細胞染色體標本，分析染色體畸變。6試驗方法試驗方法6.1實驗動物和飼養(yǎng)環(huán)境：選用健康成年大鼠或小鼠，每組每種性別至少5只。實驗動物及實驗動物房應符合國家相應規(guī)定。6.2受試物6.2.1受試物配制：固體受試物應溶解或懸浮于適合的溶劑中，并稀釋至一定濃度。液體受試物可直接使用或予以

4、稀釋。受試物應在使用前新鮮配制，否則就必須證實貯存不影響其穩(wěn)定性。6.2.2溶劑的選擇：溶劑在所選用濃度下，不引起毒性效應，不與受試物發(fā)生化學反應。首選為水溶性溶劑。6.2.3劑量設置：應進行預試驗以選擇最高劑量。當有毒性時，可以引起死亡或者抑制骨髓細胞有絲分裂指數(shù)（50%以上）為指標確定最高劑量。在第一次采集樣品時，需設置3個可供分析的劑量，在第二次采集樣品時，則僅需設置最高劑量組。如果一次劑量為2000mgkg體重時仍未引起毒性效應

5、，則只設2000mgkg體重劑量組。6.3對照：在每項試驗中，對每種性別均應設陰性對照組和陽性對照組。除不使用受試物外，其它處理與受試物組一致。6.3.1陰性對照：除設溶劑對照（即僅含溶劑）外，如果沒有文獻資料或歷史性資料證實所124(5)試驗條件和方法：染毒途徑和染毒方案、細胞毒性測定方法、所用的細胞分裂中期阻斷劑及其劑量和采樣時間、簡述制備染色體的方法；(6)觀察和分析的細胞數(shù)；(7)畸變類型和數(shù)量及畸變率；(8)結論。8結果解釋結