

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、1 l i [ L [ 1 l l l l l lJ l l [ 1 [ 1 l l l l l l l l l l l l [ [ [ 1 1 1 1 1 1 1 1 , L [ [ 1 l lY 3 2 3 2 6 3 2分類號 R 2 8 5 5U D C 6 1 0 密級學校代號 】Q 盟2學 號 2 0 1 4 1 1 0 4 3 7 4廣州中醫(yī)藥大學G u a n g z h o uU n i v e r s i t y o
2、 fC h i n e s eM e d i c i n e碩士學位論文參附注射液對L P S 刺激的T e t —o n —H M G B I 過表達R A W 2 6 4 .7 細胞H M G B l 表達的影響學位申請人指導教師姓名專 業(yè) 名 稱申請學位類型論文提交日期黃慧娜黎暉研究員中西醫(yī)結合基礎科學學位2 0 I 7 年3 月摘要研究目的:膿毒血癥臨床發(fā)病率和死亡率高居不下,預后不良,是急危重癥醫(yī)學面臨的一大難題。膿毒血癥嚴重
3、影響生存質量,也帶來了沉重的經濟負擔。高遷移率族蛋白B 1( H M G B l ) 在內毒素休克晚期可以分泌出胞,加劇炎癥級聯(lián)瀑布反應,具有致死性毒性。因此,控制H M G B l 的釋放可能是控制炎癥擴大的關鍵,H M G B l 可作為防治膿毒血癥的一個重要靶標。參附湯組方實源自《傷寒論》四逆加人參湯,是扶陽固脫的典型代表方劑,臨床上參附注射液( S F ) 廣泛應用于治療陽氣暴脫“厥脫證”( 休克) ,目前關于其對H M G B
4、 l表達的影響及機制探討的報道較少。本研究將通過脂多糖( L P S ) 誘導T e t —o n —H M G B l基因過表達的小鼠單核一巨噬細胞株R A W 2 6 4 .7 建立炎癥細胞模型,研究S F 對L P S 誘導的巨噬細胞H M G B l 表達的影響,以期探索參附液注射液治療膿毒血癥的分子機制及中醫(yī)扶正祛邪理論。研究方法與內容:1 .以2 9 3 T 細胞為研究對象,將實驗分為正常組、L P S 組、正丁酸鈉( S
5、B ) 組、S F ( 8 u L /m L 、1 2p L /m L 、1 4u L /m L ) 組共六組,將H M G B l 啟動子質粒瞬轉入細胞構建細胞H M G B l 基因啟動子驅動的熒光素酶( L u c ) 報告基因系統(tǒng),正常組不做任何處理,L P S 組用O .2 u g /m LL P S 處理,藥物組先使用0 .2 u g /m L L P S 預刺激O .5 h 后,再按分組給藥2 4 h 。采用報告基因檢測,
6、分析S F 對H M G B l 啟動子活性的影響。2 .以T e t —o n —H M G B l 基因過表達R A W 2 6 4 .7 細胞株為研究對象,正常組、L P S 組、正丁酸鈉( S B ) 組、S F ( 8 u L /m L 、1 2u L /m L 、1 4 u L /m L ) 組共六組,以上各組給藥前加入四環(huán)素( T e t ) 啟動外源性H M G B l 基因表達,隨后正常組不做任何處理,L P S組用0
7、 .2u g /m L L P S 處理,藥物組先使用0 .2 u g /m L L P S 預刺激0 .5 h 后,再按分組給藥2 4 h 。2 .1 .按照以上分組,各組分組給藥后2 4 h ,提取m R N A ,采用q R T —P C R 法進行檢測,分析S F 對H M G B lm R N A 表達的影響。2 .2 .按照以上分組,各組分組給藥后2 4 h ,提取各組培養(yǎng)細胞總蛋白,采用w e s t e r n —b l
8、 o t 檢測H M G B l 表達情況。用H M G B l 抗體可以標記H M G B l 蛋白、用f l a g 抗體可以區(qū)別標記外源性H M G B l 一f l a g 蛋白。2 .3 .按照以上分組,各組分組給藥后2 4 h ,收集細胞上清液,用小鼠H M G B lE L I S Ak i t 操作方法檢測H M G B l 在細胞上清的分泌表達量。2 .4 .按照以上分組,細胞培養(yǎng)在載玻片上,各組分組給藥后2 4 h
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- parp1對raw264.7細胞內hmgb1的定位和分泌的影響
- 葉酸對lps誘導的raw264.7細胞炎性介質表達的影響
- hey1基因過表達對小鼠單核細胞raw264.7向破骨細胞分化的影響
- hcmvie1蛋白對小鼠raw264.7細胞株tnfα、il1β表達的影響
- 魚腥草對lps誘導raw264.7細胞炎性因子表達的影響及機制
- HBx對肝細胞HMGB1表達的影響.pdf
- pts2對lps引起的raw264.7細胞中inos蛋白表達的影響及其機理研究
- 氯化鈷和脂多糖對巨噬細胞raw264.7表達hif1α和tgfβ1的影響
- adipophilin促進raw264.7細胞內acat1高表達
- 葛根素對lps誘導raw264.7細胞炎性細胞因子表達的影響及機制
- 論文-董燕-青藤堿對lps刺激的小鼠及raw264.7細胞a2a、p2x7表達的影響
- hsf1對內毒素所致raw264.7巨噬細胞炎癥介質基因表達的影響
- mcsf對raw264.7細胞mmp9表達的影響及相關機制
- 內體成熟障礙對lps在raw264.7細胞的內化以及對細胞活化的影響
- 參附注射液產品手冊
- EGb761對LPS誘導THP-1細胞釋放HMGB1蛋白表達的調節(jié).pdf
- 槐定堿對lps誘導raw264.7巨噬細胞cd14、p38mapk及inos表達的影響
- 槐定堿對lps誘導raw264.7巨噬細胞nfκb信號通路的影響
- 參附注射液抗腫瘤應用
- TWEAK對人THP—1細胞中LOX—1及HMGB1表達的影響.pdf
評論
0/150
提交評論