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文檔簡介
1、華中科技大學碩士學位論文肺細胞系中熱休克蛋白70B'的表達特征及意義姓名:劉曉勇申請學位級別:碩士專業(yè):勞動衛(wèi)生與環(huán)境衛(wèi)生學指導教師:鄔堂春20080501華 中 科 技 大 學 碩 士 學 位 論 文 華 中 科 技 大 學 碩 士 學 位 論 文 斷中可作為一項有意義的參考指標。Hsp70B’、Hsp72 作為 Hsp70 家族中誘導性、且具有重要生物學意義的兩種蛋白,Hsp72 在細胞和組織中的保護作用已經(jīng)非常明確,對于
2、 Hsp70B’這個僅在高溫作用下的癌細胞具有中發(fā)現(xiàn)的 Hsp70 家族的成員, 其獨特的熱誘導性提示其可能具有某些獨特的生物學功能。因此,本研究為探討 Hsp70B’的可能功能和在肺癌中的作用,對 Hsp70B’在肺腺癌細胞 A549 中高溫應激后的動態(tài)表達及與細胞活性、Hsp72 的表達進行比較分析,檢測了 Hsp70B’在熱應激作用下的A549 細胞中的動態(tài)表達特征;并通過分析 A549 細胞、16HBE 細胞和 BPDE 轉(zhuǎn)化的
3、16HBE 細胞在高溫、紫外、苯并(a)芘作用下 Hsp70B’的表達水平的變化及與 Hsp72的表達差異,發(fā)現(xiàn)了 Hsp70B’僅在高溫作用下的癌細胞中或者在受應激的惡性轉(zhuǎn)化細胞中表達的特性。 第一部分 第一部分 熱休克蛋白 熱休克蛋白 70B’在熱應激作用下的 在熱應激作用下的 A549 細胞中的動態(tài)表達 細胞中的動態(tài)表達 Hsp70B’作為 Hsp70 家族的一員,呈現(xiàn)出獨特的熱誘導性,僅在經(jīng)過熱應激后的子宮癌(Hela)細胞、結(jié)
4、腸癌細胞中檢測到 Hsp70B’蛋白。本部分通過在高溫應激作用下的肺腺癌 A549 細胞中檢測 Hsp70B’、Hsp72 的表達水平,實驗結(jié)果顯示,正常的 A549 細胞中沒有 Hsp70B’的表達,隨溫度升高呈現(xiàn)先升高后逐步降低的趨勢,細胞在 42℃應激 60min 后 Hsp70B’的表達量上升至最高。劇烈熱應激(如 45℃)時,細胞活性降低, HSPs 在細胞中不能充分表達也不能很好發(fā)揮蛋白保護作用。 Hsp70B’在 42℃溫
5、和熱應激 20min 后的 A549 細胞中開始表達, 60min 時升高至最高, 至 120min表達量已降低至最高水平的 60%。A549 細胞經(jīng) 42℃熱應激 1h 后恢復正常生長條件6h,Hsp70B’的表達出現(xiàn)最高峰,但維持時間比較短,恢復 12h 后表達量迅速下降,24h 后僅有微弱條帶。這種短暫表達表明 Hsp70B’的表達可能與細胞的熱耐受后早期恢復有關。說明 Hsp70B’作為細胞熱應激反應的產(chǎn)物之一,參與熱應激反應,
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