芽孢益生菌b.lincheniformistu1發(fā)酵條件優(yōu)化、菌劑儲存特性及應(yīng)用研究

1、分類號： Q 坌三密級： 公五單位代碼：學(xué) 號：1 0 0 8 62 0 1 0 1 2 2芽孢益生菌B ．1 i n c h e n i f o 珊必T u 一1 發(fā)酵條件優(yōu)化、茵劑儲存特性及應(yīng)用研究O p t i m i z a t i o no f f e r m e n t a t i o n c o n d i t i o n s ，a g e n t ss t o r a g e c h a r a c t e r i s

2、t i c sa n d a p p l i e d r e s e a r c ho f B a c i l l u s p r o b i o t i c sT u - 1 ( 曰．1 i n c h e n i f o r m i s )學(xué)位申請人：柴玉龍指導(dǎo)教師：朱寶成教授王世英教授學(xué)科專業(yè)：微生物與生化藥學(xué)學(xué)位類別：理學(xué)碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二。一三年六月三日摘要本實(shí)驗(yàn)室已從獺兔的糞便中篩選出具有防治腹瀉和提高飼

3、料利用率等益生特性的地衣芽孢桿菌( B ．1 i n c h e n i f o r m i s ) T u ．1 菌株。本研究對其進(jìn)行搖瓶發(fā)酵條件優(yōu)化，在中試中獲得高活菌( 芽孢) 含量的T u ．1 菌劑，并研究T u 一1 菌劑的存儲特性，通過飼喂試驗(yàn)證明該茵劑具有改善獺兔腸道微生態(tài)環(huán)境、提高腸道消化酶活力和降低糞便營養(yǎng)成分含量等作用，為進(jìn)一步研究其益生特性和作用機(jī)理提供了參考。具體研究結(jié)果如下：1 、通過單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)方法

4、，確定了地衣芽孢桿菌( 曰．1 i n c h e n i f o r m i s )T u 一1 菌株的最優(yōu)培養(yǎng)基與最佳培養(yǎng)條件為：玉米粉1 ．0 ％、酵母粉1 ．5 ％、M n S 0 4 “ H 2 00 ．0 7 ％、N a 2 H P 0 4 0 ．4 ％、N a i l 2 P 0 40 ．2 ％、起始p H 為7 ．5 、接種量為4 ．o ％，裝瓶量5 0 m L( 2 5 0 m L 三角瓶) ，搖床轉(zhuǎn)速為2 0 0 r

5、 ·m i n ～，在3 7 ℃培養(yǎng)4 8 h ，優(yōu)化后芽孢形成率達(dá)到9 1 ．0 5 ％，最終生物量為5 ．1 5 ×10 9 C F U ·m L ～。2 、通過對地衣芽孢桿菌T u ．1 進(jìn)行2 噸規(guī)模中試發(fā)酵液菌濃達(dá)到5 ．8 9 ×1 0 9 C F U ·m L - 1 以上；芽孢產(chǎn)率達(dá)9 0 ％以上；發(fā)酵液經(jīng)離，t b 后，菌泥活菌含量> 5 0 ×1 0

6、9 C F U ·m L ～，噴霧干燥菌粉活菌( 芽孢) 含量> 1 0 0 ×1 0 9 C F U ·9 1 ，最后加輔料可配制成1 ．O ×1 0 I o C F U - g - 1 的固體制劑。3 、通過菌劑儲存試驗(yàn)表明，芽孢桿菌T u 一1 菌劑含水量應(yīng)低于8 ．O ‰保存在室溫、密封、避光干燥處，2 4 個(gè)月后，芽孢存活率仍可達(dá)到8 5 ％以上。4 、通過獺兔飼喂試驗(yàn)表明，飼料中

7、添加0 ．1 ％的T u ．1 菌劑能提高腸道內(nèi)有益菌群的數(shù)量，降低有害菌數(shù)量。糞便中乳酸菌、雙歧桿菌及芽孢桿菌的數(shù)量分別比對照組增加了2 7 ．3 6 ％、2 5 ．7 6 ％和2 6 ．1 2 ％，大腸桿菌數(shù)減少了2 7 ．7 7 ％。試驗(yàn)組獺兔糞便中中性蛋白酶、0 【．淀粉酶、纖維素酶和脂肪酶平均活力( 試驗(yàn)開始第7 d 至第4 5 d 的平均酶活力) 比對照組分別增加了9 ．2 0 ％、1 8 ．5 2 ％、3 6 ．9 1 ％

8、和3 2 ．1 8 ％。試驗(yàn)組獺兔糞便中粗蛋白、淀粉、粗纖維素和粗脂肪含量比對照組分別減少了1 8 ．9 3 ％、3 8 ．7 2 ％、2 8 ．4 4 ％和2 6 ．5 0 ％，無機(jī)營養(yǎng)成分和水分含量沒有太大變化。試驗(yàn)組料重比比對照組降低了1 6 ．18 ％。試驗(yàn)組腹瀉率比對照組降低了2 8 ．5 7 ％。T u 一1 菌劑具有調(diào)節(jié)獺兔腸道微生態(tài)，防治腹瀉，提高飼料轉(zhuǎn)化率的作用。關(guān)鍵詞：地衣芽孢桿菌：菌劑；發(fā)酵條件優(yōu)化：腸道菌群：酶活