1.人新基因ic532的克隆和初步功能研究2.vpl和lass2基因的相互作用及其功能

1、復旦大學碩士學位論文1.人新基因IC53-2的克隆和初步功能研究2.VPL和LASS2基因的相互作用及其功能姓名：解翼虎申請學位級別：碩士專業(yè)：病原生物學指導教師：萬大方20030508英文摘要1 ．C l o n i n ga n d c h a r a c t e r i z a t i o no f h u m a n g e n e I C 5 3 —22 ．F u n c t i o n a l r e s e a r c h

2、o fV P L a n d L A S S 2 g e n e sM a s t e r S t u d e n t ：Y i h u X i eS u p e r v i s o r ：D a f a n g W a nA b s t r a c tA m e t h o db a s e do n t h eg r o w t ho f c e l l sw a s e s t a b l i s h e dt os e l e

3、c tc a n c e rr e l a t e dg e n e s ．W e h a v e i d e n t i f i e dI C 5 3 —2 ，ah u m a n h o m o l o g u e o f t h er a t6 ' 5 3g e n e f r o m ah u m a n p l a c e n t ae D N A l i b r a r y ( G e n B a n kA c e

4、．N o ．A F 2 1 7 9 8 2 ) ．I C 5 3 - 2C a l lb i n d t ot h eC D K 5 a c t i v a t o rp 3 5b yi n v i t r o a s s o c i a t i o n a s s a y ．I C 5 3 —2 i s m a p p e dt oh u m a nc h r o m o s o m e1 7 q 2 1 ．3 1 ．T h e1 C

5、 5 3 —2t r a n s c r i p t i s h i g h l ye x p r e s s e di nk i d n e y , l i v e r , s k e l e t a lm u s c l ea n dp l a c e n t a ．I t i sa b u n d a n t l ye x p r e s s e di nS M M C 一7 7 2 1 ，C - 3 3 A ，3 A O ，A

6、4 3 1 a n dM C F - 7 C a n c e rc e l ll i n e sb yR T - P C Ra s s a y ．T h ep r o t e i ne x p r e s s i o n l e v e lo f I C 5 3 —2i s al i t t e rh i g h e ri nn o n c a n c e r o u st i s s u e st h a ni nh e p a t

7、o c e l l u l a rc a r c i n o m a ( H C C ) t i s s u e s ．S t a b l e t r a n s f e c t i o no f l C 5 3 —2e D N Ai n t o t h eh e p a t o c e l l u l a rc a r c i n o m aS M M C 一7 7 2 1 c e l l r e m a r k a b l ys t

8、 i m u l a t e s i t s g r o w t hi nv i t r o ．T h ea b o v e r e s u l t si n d i c a t et h a tI C 5 3 —2i sa n o v e lh u m a n g e n e ，w h i c hm a y b e i n v o l v e di nt h er e g u l a t i o no f c e l l p r o

9、l i f e r a t i o n ．L A S S 2 g e n ew a s a l s oi s o l a t e db y t h i sm e t h o d f r o m a h u m a n l i v e re D N A l i b r a r y ．L A S S 2i s a h o m o l o g u eo fL A G l ( S a c c h a r o m y c e sc e r e v

10、 i s i a e l o n g e v i t y a s s u r a n c e g e n e ) ．O v e re x p r e s s i o no f L A S S 2 C a ni n h i b i tt h eg r o w t ho f H C C S M M C ·7 7 2 1c e l l s ．T oi n v e s t i g a t et h em o l e c u l a r

11、m e c h a n i s mo fh o wL A S S 2r e g u l a t e st h ec e l l g r o w t h ，w ei s o l a t e d2 3 L A S S 2 ·r e l a t e dg e n e s f r o m y e a s t t w o —h y b r i d s c r e e n ．T h r o u g hd o tb l o ta s s a

12、 y , w ef o u n dt h a t t h ee x p r e s s i o nl e v e lo f 陽鬯f o n eo f t h e2 3L A S S 2 一r e l a t e dg e n e s ) i sh i g h e ri nH C C t i s s u e st h a ni nn o n c a n c e r o u s t i s s u e s ．B a s e do n t h

13、 i sr e s u l t ，w ei n v e s t i g a t e dt h ei n t e r a c t i o na n d f u n c t i o n o f V P L a n d L A S S 2 ．T oc o n f i r m t h er e s u l to f d o t b l o t ．w eu s en o r t h e r n b l o t t oa s s a y t h e

14、e x p r e s s i o no f 阡￡a n d L A S S 2 i n16H C C a n d n o n c a n c e r o u s t i s s u e s ．阡￡i s h i g hi nH C C t i s s u e s ( 6 2 ．5 ％，1 0 ／16 )a n d L A S S 2 i sh i g h i nm o s t n o n c a n c e r o u s t i s

15、 s u e s ( 6 2 ．5 ％，1 0 ／1 6 ) ．L A S S 2 a n dV P Lw e r ee x p r e s s e di ns o m ec e l ll i n e s ．T h ee x p r e s s i o no f 阡￡i sh i g hi nm e t a s t a t i ch u m a nm e l a n o m ac e l l S C I 一3 7 5 a n dr e