人Pirh2基因剪接本2相互作用蛋白的初步研究.pdf

1、人Pirh2蛋白是一個(gè)新發(fā)現(xiàn)的泛素蛋白連接酶E3，受到p53的誘導(dǎo)表達(dá)，又能促進(jìn)p53蛋白的泛素化降解，因此，Pirh2通過一種負(fù)反饋途徑調(diào)控p53的轉(zhuǎn)錄激活和細(xì)胞生長(zhǎng)抑制功能。已有的研究表明Pirh2在肺癌和前列腺癌組織中過量表達(dá)，Pirh2的過量表達(dá)與癌癥發(fā)生具有很強(qiáng)的相關(guān)性。此外，研究還發(fā)現(xiàn)Pirh2參與雄激素受體信號(hào)傳導(dǎo)途徑。 Pirh2剪接本2，Pirh2b是我們實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)的Pirh2 RING指結(jié)構(gòu)域突變的剪接異構(gòu)體

2、。我們通過Real-time PCR檢測(cè)Pirh2a和Pirh2b在79對(duì)肝癌和癌旁組織中的表達(dá)，結(jié)果顯示Pirh2a和Pirh2b都可能與肝癌的發(fā)生有密切關(guān)系。為進(jìn)一步研究Pirh2b的功能，我們利用酵母雙雜交技術(shù)以Pirh2b為“誘餌”蛋白篩選人胎肝cDNA文庫中，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了12個(gè)Pirh2b的相互作用蛋白。我們選取MT2A，ARF4兩個(gè)蛋白做了進(jìn)一步研究。GFP和RFP熒光蛋白標(biāo)記后顯示Pirh2b能分別與ARF4和MT2A共定位