微澡煉油綜述

1、從微藻中提取粗脂的方法綜 從微藻中提取粗脂的方法綜述摘要： 摘要：微藻是指那些只有在顯微鏡下才能辨別形態(tài)的微小藻類(lèi)。部分微藻富含油脂。微藻油脂提取步驟大致包括破胞處理、分離提取。大致方法有超聲破碎處理、凍融破碎處理和石油醚—乙醚、異丙醇法、氯仿—甲醇法。本文大致敘述了這幾種方法的原理和操作。關(guān)鍵詞： 關(guān)鍵詞：微藻 油脂提取 反復(fù)凍融 石油醚乙醚一、引言 一、引言 微藻是指那些只有在顯微鏡下才能辨別形態(tài)的微小藻類(lèi)，在陸地、海洋分布

2、廣泛，營(yíng)養(yǎng)豐富、光合利用度高的自養(yǎng)植物。部分微藻中含有數(shù)量相當(dāng)可觀的油脂類(lèi)物質(zhì)，可以直接提取得到微藻油。而微藻油可以用來(lái)生產(chǎn)生物柴油。例如，小球藻（Chlorella）為綠藻門(mén)小球藻屬普生性單細(xì)胞綠藻，是一種球形單細(xì)胞淡水藻類(lèi)，直徑 3～8 微米，是地球上最早的生命之一,出現(xiàn)在 20 多億年前，基因始終沒(méi)有變化，是一種高效的光合植物，以光合自養(yǎng)生長(zhǎng)繁殖，分布極廣。有數(shù)據(jù)表明：機(jī)械攪拌發(fā)酵罐中大規(guī)模異養(yǎng)培養(yǎng)小球藻，最高細(xì)胞十重濃度達(dá)到了

3、43．3g／L，總油脂含量也可高達(dá) 57.7％。 在世界能源危機(jī)和環(huán)境污染的雙重影響下,生物質(zhì)能源由于可再生、低污染等優(yōu)勢(shì),被認(rèn)為是在未來(lái)一個(gè)較短時(shí)期內(nèi)最有潛力緩解能源危機(jī)的石油替代品。而微藻由于具有生物量大、光合效率高、生長(zhǎng)周期短、油脂含量高和環(huán)境友好等優(yōu)點(diǎn),有望破解后石油時(shí)代的能源危機(jī)，藻類(lèi)尤其是微藻類(lèi)將會(huì)成為提供新能源和新資源的“明星”,微藻的能源化利用有望成為“后石油時(shí)代”破解能源危機(jī)的一把金鑰匙。在最近兩年,不管是國(guó)內(nèi)外有關(guān)利

4、用微藻生產(chǎn)生物燃料的基礎(chǔ)研究,還是應(yīng)用開(kāi)發(fā)報(bào)道都呈現(xiàn)大幅增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)。但是微藻油脂是胞內(nèi)產(chǎn)物，如何實(shí)現(xiàn)有效的破碎藻細(xì)胞以充分釋放并高效率地提取出來(lái)是急需解決的一個(gè)關(guān)鍵性問(wèn)題。目前業(yè)內(nèi)關(guān)于微藻油脂破碎提取凍融法對(duì)藻細(xì)胞進(jìn)行破碎，雖然處理的時(shí)間長(zhǎng)，但處理量大，在整個(gè)處理過(guò)程中始終保持較低的溫度，特別適合于熱敏性的活性物質(zhì)的提取前預(yù)處理。3、油脂分離提取方法及操作 、油脂分離提取方法及操作油脂提取一般采用有機(jī)溶劑萃取的方法，利用油脂能溶于有機(jī)溶

5、劑的特點(diǎn)，然后根據(jù)不同的沸點(diǎn)可以把油脂蒸餾出來(lái)。一般來(lái)說(shuō)，所用有機(jī)萃取劑的沸點(diǎn)沒(méi)有油脂的高。1> 改良的酸水解法:稱(chēng)取濕藻體或干藻粉1 g，置于50 mL帶蓋離心管中，加入4 mL滅菌蒸餾水，混勻后加入5 mL鹽酸，將離心管置于70一80℃水浴中20 min，取出離心管，加入5 mL 95％的乙醇，混勻。冷卻后加入10 mL乙醚，加蓋振搖1min，小心開(kāi)蓋，放出氣體。4 000 r／min離心2 min，吸取上清液于已恒

6、重的錐形瓶中，再加5 mL乙醚于離心管中，加蓋振搖1 min，4 000 r／min離心2 min，吸取上清液于原錐形瓶中。將錐形瓶置于水浴鍋上蒸干，再置于95—105℃ 烘箱中干燥2 h，取出冷卻后稱(chēng)重，計(jì)算微藻中油脂得率。2> 石油醚—乙醚：乙醚-石油醚（1：2）體積比為1：3的比例向1份勻漿液中加入3份乙醚-石油醚（1：2） ，在混合器中，30min定時(shí)高強(qiáng)度攪拌，萃取時(shí)間5h。4 000 r／min離心5min，吸取

7、上清液于已恒重的錐形瓶中，將錐形瓶置于40℃水浴鍋上蒸干，再置于95～105 ℃烘箱中干燥2 h，取出冷卻后稱(chēng)重，計(jì)算微藻中油脂得率。3> 異丙醇法：稱(chēng)取濕藻體或干藻粉l g，置于10 mL離心管中，加入5 mL異丙醇(60℃預(yù)熱)，室溫下萃取10 h，4 000 r／min離心2 min，吸取上清液于已恒重的錐形瓶中，再向離心管中加入5mL異丙醇，室溫萃取l h，離心吸取上清液于原錐形瓶中。將錐形瓶置于水浴鍋上蒸干，再置于95～