電化學(xué)生物傳感器檢測MicroRNA和流動注射化學(xué)發(fā)光法檢測頭孢磺啶鈉的研究.pdf

1、MicroRNAs在調(diào)控基因表達和細胞進程中有關(guān)鍵作用，microRNA的調(diào)節(jié)異常與多種疾病相關(guān)，這使得它們成為一種很好的生物標(biāo)志物。電化學(xué)生物傳感器具有檢測成本低、儀器設(shè)備體積小、易于操作、反應(yīng)時間短、靈敏度高和特異性好等優(yōu)點，近年來在臨床診斷和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域被廣泛使用。雜交鏈反應(yīng)是一種等溫的、無需酶參與的DNA序列放大技術(shù)，在核酸檢測中具有很好的放大效果。
　　本文提出了一種利用DNA雜交鏈反應(yīng)和生物素-鏈霉親和素信號放大的簡

2、單、超靈敏的電化學(xué)生物傳感器用于檢測靶microRNA。當(dāng)靶microRNA存在時，固定于金電極表面的莖環(huán)結(jié)構(gòu)的DNA捕獲探針被打開，然后 DNA引發(fā)鏈與打開的捕獲探針雜交繼而啟動 HCR，最終形成了一條長的帶切口的DNA雙螺旋鏈。鏈霉親和素通過與標(biāo)記在參與雜交鏈反應(yīng)的兩條莖環(huán)結(jié)構(gòu)核酸上的生物素結(jié)合產(chǎn)生信號放大。實驗構(gòu)建的生物傳感器具有高靈敏度，對靶microRNA的檢測限低至0.56 fM，線性范圍是1 fM~100 pM，方法具有高

3、選擇性，可以區(qū)分靶microRNA與錯配的 microRNA。該方法可以成功檢測出添加到人總RNA樣本中的 microRNA，因此在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷方面有很好的應(yīng)用前景。頭孢磺啶鈉（Cefsulodine Sodium, CFS）屬于第三代頭孢菌素，它是一種窄譜抗生素，抗綠膿桿菌專屬性好，對腸桿菌也有效，對耐藥性的綠膿桿菌也有良好效果。流動注射分析技術(shù)可以利用載流驅(qū)動將檢測試劑或樣品重現(xiàn)，從而對待檢測物進行定量分析。該技術(shù)有很多優(yōu)

4、點，例如，分析速度快、檢測成本低、靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡單和儀器設(shè)備便攜等，它可以與化學(xué)發(fā)光檢測技術(shù)相結(jié)合構(gòu)建成一種流動注射化學(xué)發(fā)光法，該方法在生物醫(yī)學(xué)、食品科學(xué)和環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域有很大的應(yīng)用價值。大的增強作用，據(jù)此我們建立了一種流動注射化學(xué)發(fā)光法用于測定頭孢磺啶鈉。在選定的最佳實驗條件下，化學(xué)發(fā)光增加強度與頭孢磺啶鈉的濃度在5.0×10-7～2.0×10-5 g/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，檢測限可達3.2×10-7 g/mL。該方