奶牛、水牛、牦牛、娟珊牛、山羊、駱駝和馬乳特征性成分分析.pdf

1、本論文在比較分析奶牛、水牛、牦牛、娟珊牛、山羊、駱駝和馬乳中乳蛋白與乳脂肪的含量與組成、礦物質(zhì)元素的含量、乳脂球膜蛋白與microRNA差異的基礎上，提出了這幾種乳的特征性成分。
　　研究結(jié)果表明:
　　(1)建立的奶牛、水牛、牦牛和山羊乳中乳蛋白組成的反相高效液相色譜（reversed-phase high-performance liquid chromatography，RP-HPLC）圖譜能有效區(qū)分以上物種乳蛋白含量

2、的差異。
　　奶牛、牦牛、水牛和山羊乳蛋白含量差異顯著，分別為37.35 g/L、62.87 g/L、56.09 g/L和42.83 g/L。其中，牦牛乳中的κ-CN含量最高(9.80 g/L)，而水牛乳、奶牛乳和山羊乳中的κ-CN含量分別為7.35 g/L，6.24 g/L和5.56 g/L;牦牛乳中的α-CN含量最高(16.14 g/L)，而水牛乳、奶牛乳和山羊乳中的α-CN含量分別為11.53g/L，11.81 g/L和9.

3、48 g/L;牦牛乳和水牛乳β-CN含量相近，分別為23.34 g/L和22.68g/L，高于山羊和奶牛乳中的β-CN含量（20.53 g/L和13.31 g/L）。山羊與水牛乳中的β-LgB含量相近（3.69 g/L和3.88 g/L），低于牦牛乳(9.46 g/L)，高于奶牛乳(1.19g/L);水牛乳中α-La含量最高(7.96 g/L)，顯著高于奶牛、山羊和牦牛乳(1.45 g/L，1.28 g/L和1.47 g/L);奶牛乳中

4、的β-LgA含量為2.15 g/L，顯著高于水牛乳、牦牛乳和山羊乳（0.13 g/L，0.12 g/L和0.14 g/L）。
　　(2)應用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（gas chromatography-mass spectrometer，GC-MS）結(jié)合聚類及主成分分析建立了奶牛、水牛、牦牛、娟珊牛、山羊、駱駝和馬乳中奇數(shù)碳鏈支鏈脂肪酸(odd and branched chain fatty acids，OBCFA)的表達模式及種

5、屬特異性，能很好的區(qū)分馬乳、奶牛乳、駱駝乳和山羊乳。
　　OBCFA組分含量最低的均為anteiso-C13:0，牦牛乳中總的OBCFA含量及各組分（除anteiso-C17:0略低于駱駝乳外）最高，而馬乳中的總OBCFA含量及OBCFA各組分含量均最低。在奶牛、水牛、牦牛、娟珊牛四種?？祁悇游锶镺BCFA可聚為一類，山羊乳也聚在這一類，但又獨立聚一小類，其中iso-C15:0和C15:0的含量最高，而山羊乳中C15:0和ante

6、iso-C17:0的含量最高。駱駝乳和馬乳聚為另一大類，其iso-C15:0和anteiso-C17:0的含量最高。
　　(3)通過電感耦合等離子體質(zhì)譜技術(shù)(inductively coupled plasma massspectrometry，ICP-MS)比較分析了奶牛、水牛、牦牛、娟珊牛、山羊、駱駝和馬乳中的9種元素（K、Ca、Na、Mg、 Mn、Co、Zn、Fe和Se）的含量。
　　馬乳中這9種元素的含量均顯著低于其

7、他物種乳，水牛乳中的Mg和Ca的含量較高，而奶牛乳中的Fe的含量最高，駱駝和山羊乳中的Na和K含量顯著高于其他物種。除Se的含量略低于水牛乳以外，奶牛乳中的其他微量元素(Mn，Co，Zn，Se)含量均高于水牛、牦牛、娟珊牛、山羊、駱駝和馬乳;除在山羊乳中Co元素的含量略低外，奶牛、水牛、牦牛、娟珊牛、山羊、駱駝和馬乳中的Co含量相近;而馬乳中未檢測出Se。
　　(4)通過無標記(Label-Free)定量蛋白質(zhì)組學方法建立了奶牛、

8、水牛、牦牛、娟珊牛、山羊和駱駝乳中乳脂球膜蛋白(MFGM)圖譜。
　　共鑒定出奶牛、水牛、娟珊牛、牦牛、山羊和駱駝乳中MFGM分別為460，330，493，492,517和448個，通過蛋白質(zhì)功能與代謝通路分析表明，這些蛋白主要參與機體的生物學調(diào)節(jié)、蛋白定位以及應激反應，主要參與核糖體、神經(jīng)調(diào)節(jié)以及抗原形成與呈現(xiàn)等路徑。聚類分析表明，奶牛、水牛、牦牛、娟珊牛、山羊和駱駝乳分為4大類，其中奶牛、娟珊牛和牦牛乳聚為一類;奶牛、娟珊牛、

9、牦牛和水牛乳聚為一類;奶牛、娟珊牛、水牛、牦牛和山羊乳聚為一類;駱駝乳單獨聚為一類。
　　(5)通過轉(zhuǎn)錄組學方法分析獲得了新鮮奶牛與新鮮山羊乳清中特征性microRNA及反復凍融乳清與新鮮乳清樣microRNA的表達差異性。
　　生鮮牛乳中檢測出415種microRNAs，其中381種microRNAs具有典型的頸環(huán)發(fā)夾結(jié)構(gòu)與已知的microRNAs匹配，其中34種為新的microRNAs;生鮮羊乳中檢測到111種micro

10、RNAs，其中有13種新的microRNAs;而其中的29種microRNAs為鮮奶牛乳清和鮮羊乳乳清共有的。與新鮮牛乳清樣本相比，反復凍融后miR-1246、miR-135a、miR-15b、miR-223、miR-30b-5p、miR-342、miR-365-3p、miR-378b、miR-500、miR-664b和miR-885表達上調(diào)，而let-7a-5p、let-7c、let-7e、miR-122、miR-193a-5p、mi