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文檔簡介
1、西瓜是一種廣受歡迎的水果,也是一種非常重要的經(jīng)濟作物。西瓜枯萎病是由尖孢鐮刀菌西瓜?;停‵usarium oxyporum f.sp.niveum,F(xiàn)ON)引起的常見土傳病害,嚴重危害西瓜生產(chǎn)。依賴化學農(nóng)藥防控該病害不僅影響西瓜的品質(zhì)和安全,還會產(chǎn)生抗藥性和造成嚴重的生態(tài)環(huán)境污染。因此,以植物促生菌(PGPR)為核心菌株的生物防控技術(shù)在植物病害治理中日益引起重視并在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應用越來越廣泛。芽孢細菌由于抗逆性強和易于培養(yǎng)等特點一直被
2、作為最有潛力的防病促生菌株被研究和應用。本文以西瓜枯萎病防控為研究目標,采用室內(nèi)培養(yǎng)和盆栽試驗相結(jié)合方式篩選對西瓜具有防病促生作用的芽孢細菌,開展菌株的培養(yǎng)條件優(yōu)化和促生效果研究,以該菌株為核心研制生物有機肥并開展對西瓜枯萎病的防控效果研究。
首先,選取16株經(jīng)過初篩后實驗室保存的拮抗菌菌株,在平板對峙條件下復篩對尖孢鐮刀菌西瓜?;停‵usarium oxyporum f.sp.niveum)FW0具有拮抗作用同時對尖孢鐮刀
3、菌辣椒?;停‵usarium oxysporumf.sp.vasinfectun)FP1和辣椒疫霉(Phytophthora capsici Leonian)PC1也具有拮抗作用的拮抗菌。結(jié)果顯示,有12株拮抗菌對FW0表現(xiàn)出較強的拮抗作用,其中細菌L3對FW0和FP1均有較好的拮抗作用,對PC1也有一定的拮抗作用。
在盆栽條件下研究細菌L3對西瓜枯萎病的防控效果和在沙培條件下研究細菌L3對西瓜的促生作用。結(jié)果表明,在溫室盆
4、栽試驗條件下和人工氣候箱沙培試驗條件下,細菌L3均對西瓜的生長表現(xiàn)出顯著的促生作用,使西瓜的株高、葉片數(shù)、干重、鮮重等均有顯著的增加。其中,在沙培條件下接種細菌L3可使西瓜植株的平均鮮重和平均干重分別增加37.3%和36.9%。在盆栽試驗中,細菌L3可使西瓜的株高、鮮重、干重分別增加66.8%、37.9%和88.9%;同時,細菌L3能夠有效減輕尖孢鐮刀菌對西瓜植株的侵染作用。
對細菌L3進行分子生物學鑒定并探究細菌L3的最適發(fā)
5、酵條件。通過細菌16SrRNA的測序和系統(tǒng)進化樹的構(gòu)建,確定L3菌株是解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens);最適發(fā)酵條件探究中分別對菌株L3的最適培養(yǎng)基、最適溫度、最適初始pH和最佳裝液量進行了研究,最終確定BPY培養(yǎng)基為細菌L3的最適培養(yǎng)基,其最適發(fā)酵條件為:溫度30℃、初始pH=6.0,裝液量為50mL/250mL。在最適條件下制作細菌L3的生長曲線,結(jié)果顯示,細菌L3生長過程中延滯期很短,對數(shù)生長
6、期約為10h,最大菌體濃度可達1×109CFU/mL。
將細菌L3與有機肥復配成生物有機肥,在盆栽試驗下探究細菌L3及其生物有機肥對西瓜枯萎病的防控效果和對西瓜的促生效果。結(jié)果顯示,細菌L3及其生物有機肥在盆栽實驗條件下均能夠顯著促進西瓜的生長,其中施用L3生物有機肥使西瓜植株鮮重增加了83.3%;另一方面,細菌L3能夠減少西瓜根際的尖孢鐮刀菌數(shù)量,在盆栽試驗條件下能夠有效防控西瓜枯萎病的發(fā)生,防效達87.5%。
綜
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