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1、采用單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)對(duì)具有廣譜拮抗作用的內(nèi)生解淀粉芽孢桿菌TB2菌株的搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵條件進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,最佳培養(yǎng)基組份為:玉米淀粉1.0%、豆粉1.0%、(NH4)2SO40.5%、MgSO4·7H2O0.1%、FeSO4·7H2O0.03%、K2HPO4·3H2O0.02%、KH2PO40.01%;培養(yǎng)條件為:pH值7.5(消前),溫度35℃,接種量3%,裝量50mL/250mL三角瓶,搖床轉(zhuǎn)速200r·min-1,發(fā)
2、酵周期22~26h。優(yōu)化條件下發(fā)酵水平達(dá)到8.52×1010cfu·mL-1。
以TB2為出發(fā)菌株,根據(jù)搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基及條件的優(yōu)化結(jié)果、發(fā)酵相關(guān)參數(shù)的變化來(lái)對(duì)該菌株進(jìn)行180 L和270 L發(fā)酵罐發(fā)酵工藝的探索。最終確定了TB2菌株最佳發(fā)酵條件:初始pH值為7.5,以3%接種量接種到發(fā)酵罐,45%裝液量,容氧率為30%,溫度30~33℃。發(fā)酵過(guò)程中通過(guò)測(cè)定pH值,菌體濃度,還原糖、氨基氮含量及芽孢形成率的變化,最佳放罐時(shí)間
3、為32h左右。優(yōu)化條件下發(fā)酵水平達(dá)到3.0~6.5×1010cfu·mL-1,芽孢形成率達(dá)到90%以上。
發(fā)酵液對(duì)黃瓜枯萎病菌、香蕉炭疽病菌、番茄灰霉病菌、番茄葉霉病菌的拮抗試驗(yàn)結(jié)果表明,發(fā)酵液對(duì)四種植物病菌都有一定的抑制作用,抑制率為29.5%~45.2%。
發(fā)酵液后工藝處理采用直接噴霧干燥的方法得到了TB2原粉。測(cè)定了原粉相關(guān)的質(zhì)量指標(biāo)。研究結(jié)果表明,活菌數(shù)為1200億個(gè)/g,雜菌率≤3%,干燥減量4.5
4、%~7%,pH值6.0~7.5,80%~90%可通過(guò)75μm試驗(yàn)篩,在室溫和4℃條件下貯存半年活菌率為90%以上。
TB2菌粉分別配制成1:500,1:1000,1:1500,1:2000倍稀釋液對(duì)香蕉貯藏期病害、辣椒采后果及辣椒苗期疫病盆栽防治試驗(yàn)。試驗(yàn)結(jié)果表明,TB2菌株原粉對(duì)香蕉貯藏期軸腐病、炭疽病,辣椒疫病有一定的防治作用。以1:500處理組的效果最佳,其對(duì)香蕉軸腐病和炭疽病的相對(duì)防效為34.32%~66.32%和
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