七種雙酚類(lèi)化合物雌激素活性評(píng)價(jià)及其在食品中檢測(cè)方法的建立和應(yīng)用.pdf

1、雙酚S(Bisphenol S,BPS)、雙酚F(Bisphenol F,BPF)、雙酚A(Bisphenol A, BPA)、雙酚B(Bisphenol B,BPB)、雙酚AF(Bisphenol AF,BPAF)、四氯雙酚A(Tetrachlorobisphenol A,TCBPA)和四溴雙酚A(Tetrabromobisphenol A,TBBPA)是7種常見(jiàn)的雙酚類(lèi)化合物,廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中。同時(shí)這7種化合物也是備受關(guān)注的環(huán)境

2、內(nèi)分泌干擾物和污染物。
　　本研究針對(duì)這7種化合物開(kāi)展了一系列的工作,其中主要內(nèi)容有:
　　1.比較研究了7中雙酚類(lèi)化合物的雌激素效應(yīng),包括利用WST-8新型四唑鹽細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),考察了這7種化合物對(duì)人乳腺癌細(xì)胞T47D和MCF-7的增殖效應(yīng),通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)了這7種化合物對(duì)雌激素受體α下游基因組織蛋白酶 D(CTSD)、乳腺癌雌激素調(diào)控蛋白1(GREB1)和三葉因子1(TFF1)表達(dá)的調(diào)控作用,考察了BPAF對(duì)ER

3、K的激活作用。
　　2.利用固相萃取結(jié)合LC-MS/MS技術(shù)建立了谷物類(lèi)食品中BPS、BPF、BPA、BPB和BPAF的檢測(cè)方法。
　　3.利用固相萃取結(jié)合LC-MS/MS技術(shù)建立了酒水飲料中這7種雙酚類(lèi)化合物的檢測(cè)方法。
　　4.利用所建立的檢測(cè)方法對(duì)我國(guó)部分省市總膳食樣品中谷物類(lèi)、豆類(lèi)、薯類(lèi)和酒水飲料類(lèi)中雙酚類(lèi)化合物進(jìn)行暴露評(píng)估。
　　主要結(jié)果如下:
　　1.在所選濃度范圍內(nèi),除了TBBPA,其他6種雙

4、酚類(lèi)化合物均能顯著刺激T47D和MCF-7細(xì)胞的增殖,并且呈現(xiàn)出明顯的劑量效應(yīng)。通過(guò)S曲線(xiàn)擬合,計(jì)算得出這6種化合物的半數(shù)效應(yīng)濃度,并得出其雌激素活性大小為:BPAF>BPB>BPA>BPF>BPS>TCBPA>TBBPA;在所選濃度范圍內(nèi),7種雙酚類(lèi)化合物均能顯著誘導(dǎo)雌激素受體α下游基因的表達(dá);BPAF在100 nmol/L濃度下即能快速激活MAPKs信號(hào)通路中ERK的磷酸化水平,通過(guò)非基因組途徑發(fā)揮其內(nèi)分泌干擾效應(yīng)。
　　2.

5、建立了谷物類(lèi)食品中五種雙酚類(lèi)化合物的檢測(cè)方法:樣品經(jīng)乙腈超聲提取兩次后,大米、面粉經(jīng)HLB柱富集凈化,玉米面經(jīng)HLB串聯(lián)Sep-Pak NH2柱富集凈化,最后用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)檢測(cè)目標(biāo)化合物。5種目標(biāo)化合物在3種基質(zhì)中高中低加標(biāo)水平回收率分別為62.2％-117.4%、61.2%-121.6%和60.8%-112.3%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于20%,定量限在0.01-0.25μg/kg之間。應(yīng)用所建方法,對(duì)北京市售的1

6、2份谷物類(lèi)食品進(jìn)行了檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)BPS、BPA和BPAF檢出率較高,其中BPS和BPA達(dá)到100%。
　　3.建立了酒水飲料中7種雙酚類(lèi)化合物的檢測(cè)方法:樣品上樣前用甲酸將PH調(diào)至3-5,果汁、可樂(lè)直接經(jīng) Plexa柱富集凈化、白酒用超純水稀釋一倍后經(jīng) Plexa柱富集凈化,最后用 LC-MS/MS方法檢測(cè)目標(biāo)化合物。7種目標(biāo)化合物在果汁、可樂(lè)和白酒中3個(gè)加標(biāo)水平回收率分別為81.1%-111.1%、59.4%-101.1%、7