雙光子DNA納米復合探針的構建及生物分析應用研究.pdf

1、雙光子顯微成像技術是利用近紅外的光子作為激發(fā)光源，長波長激發(fā)短波長發(fā)射。其吸收過程能夠有效的降低生物體組織內的自發(fā)熒光和自吸收，有效地避免生物樣品的光漂白及紫外可見光損傷現象，這些特點不僅能夠提高組織和活體的穿透深度(＞500μm)，同時也可延長觀測的時間。由于它的獨特優(yōu)勢，雙光子顯微成像已經廣泛應用于細胞以及組織的微觀成像。
　　納米材料由于其具有獨特的小尺寸效應因而具有一些特殊的光、熱、電、力學等性能。由于其較小的納米尺寸以及

2、較好的生物相容性，一些納米材料可作為進入細胞的優(yōu)良載體，在生物傳感等方面得到廣泛應用?；诩{米材料的獨特性質，結合雙光子顯微成像的特殊優(yōu)勢，本論文的研究工作主要包括以下兩個方面:
　　(1)基于雙光子染料標記核酸適配體(Aptamer-TPdye)/氧化石墨烯(GO)自組裝及熒光共振能量轉移的特性，設計了一種新型的雙光子納米復合探針，并用于檢測體外及活體內三磷酸腺苷(ATP)。Aptamer-TPdye由于π-π共軛作用可與GO自

3、組裝，吸附在GO表面即形成GO/Aptamer-TPdye納米復合物，由于雙光子熒光團靠近GO表面而導致其熒光被淬滅。Aptamer-TPdye與ATP的結合力強于其與GO的結合力，將Aptamer-TPdye從GO表面競爭下來，伴隨Aptamer-TPdye構型的變化，熒光團遠離GO，熒光恢復。利用雙光子顯微成像的優(yōu)勢，從而實現復雜生物樣品中ATP的靈敏檢測，并成功應用于細胞及活體成像的研究。
　　(2)基于以雙光子染料標記的核