苯二酚內(nèi)酯及其衍生物的異源表達、純化及其殺線蟲活性的研究.pdf

1、植物線蟲病害嚴重危害農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)，近年來國內(nèi)線蟲病害呈快速上升，而且生產(chǎn)中使用的殺線蟲劑品種單一、毒性大、效果低，急需開發(fā)新的殺線蟲劑。可喜的是，近年來人們發(fā)現(xiàn)聚酮化合物具有很好的殺線蟲活性，但其來源受限。為此，本研究采用分子生物學等技術(shù)在異源表達、純化8種苯二酚內(nèi)酯及其衍生物的基礎(chǔ)之上，采用浸漬法對其殺線蟲活性及其分子基礎(chǔ)進行了較深入的研究，所獲具體研究結(jié)果如下：
　?。?）通過異源組合生物合成，獲得包括monocillin II

2、、10,11-dehydrocurvularin、cis-14,15-dehydrocurvularin、trans-resorcylide、desmethyl-lasiodiplodin、trans-14,15-dehydrocurvularin、pre-asperfuranone、cytosporone A8種苯二酚內(nèi)酯及其衍生物，并且利用“硅膠柱層析-TLC-HPLC”分離純化流程及重結(jié)晶的方法，快速獲得成分單一的化合物
　

3、?。?）采用浸漬法發(fā)現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)8種苯二酚內(nèi)酯及其衍生物中的2種化合物10,11-dehydrocurvularin和desmethyl-lasiodiplodin表現(xiàn)出較好的殺線蟲活性，其處理秀麗線蟲（Caenorhabditis elegans）二齡幼蟲（L2）24h后，0.1mg/mL、0.2mg/mL和0.5mg/mL的10,11-dehydrocurvularin和desmethyl-lasiodiplodin對線蟲的校正死亡率分

4、別為7.95％、15.30%、46.41%和3.41%、8.94%、27.47%；半致死濃度（EC50）分別為0.58mg/mL和1.10mg/mL；而其它6種化合物在0.5mg/mL下，其校正死亡率不超過10%。
　　（3）選取殺線蟲活性較好的化合物desmethyl-lasiodiplodin，利用修飾酶對其修飾后研究其殺線蟲活性的分子基礎(chǔ)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與修飾之前相比較，修飾后產(chǎn)物lasiodiplodin、desmethyl-

5、lasiodiplodin-3-O-glucoside和desmethyl-lasiodiplodin-4'-O-methyl-3-O-glucopyranoside的殺線蟲活性顯著降低，其EC50分別為4.41mg/mL，2.89mg/mL和6.20mg/mL。
　　綜上所述，本研究在成功獲得8種異源表達的苯二酚內(nèi)酯及其衍生物的基礎(chǔ)之上，首次發(fā)現(xiàn)10,11-dehydrocurvularin和desmethyl-lasiodip