H2O2和ATP的催化共振散射光譜分析.pdf

1、自采用熒光分光光度計(jì)同步掃描技術(shù)建立共振散射光譜分析法以來,其快速、靈敏等優(yōu)點(diǎn)已引起國內(nèi)外研究者注重,并用于蛋白質(zhì)、核酸、無機(jī)物等分析。本文在前人共振散射光譜研究的基礎(chǔ)上,結(jié)合適配體和催化技術(shù),繼續(xù)拓展共振散射技術(shù)在H2O2和三磷酸腺苷(ATP)中的應(yīng)用。本論文共分五章:
　　 第一章,簡(jiǎn)要介紹了共振散射光譜技術(shù)的原理、金銀納米光學(xué)、催化特性及其分析進(jìn)展；綜述了H2O2和ATP的分析進(jìn)展。
　　 第二章,在pH4.4檸檬

2、酸-Na2HPO4緩沖液中,辣根過氧化物酶(HRP)催化H2O2產(chǎn)生與H2O2量成正比的·OH,·OH能氧化愈創(chuàng)木酚生成四聚體微粒,其平均粒徑在462.7 nm,該微粒在530 nm處有一較強(qiáng)共振散射峰。其共振散射峰增值(ΔI530nm)與過氧化氫在0.55～27.6μmol／L范圍呈良好線性關(guān)系。據(jù)此建立了靈敏、快速、選擇性測(cè)定微量過氧化氫的共振散射光譜法,用于雨水水樣分析,獲得滿意結(jié)果,加標(biāo)回收率在98.58～110％。
　　

3、 第三章,在pH7.8 Tris-HCl緩沖液中,三磷酸腺苷的核酸適體(DNA1)與其互補(bǔ)鏈(DNA2)結(jié)合生成雙鏈DNA(dsDNA),dsDNA具有穩(wěn)定的、剛性的雙螺旋結(jié)構(gòu),不能穩(wěn)定金納米(AuNP),可被NaCl聚集,在590nm處出現(xiàn)一強(qiáng)共振散射峰。加入ATP后,ATP與dsDNA中的DNA1結(jié)合,游離的DNA2配體能穩(wěn)定AuNP,隨著ATP濃度增大,590nm處的共振散射值線性減小。適配體反應(yīng)液中的AuNP對(duì)葡萄糖-銅(Ⅱ)

4、體系有催化作用,其產(chǎn)物在610nm處有一較強(qiáng)共振散射。隨著ATP濃度增大,反應(yīng)液中AuNP越多,其催化作用增強(qiáng),ATP濃度在2.2nM～20nM與共振散射值ΔI610nm呈線性關(guān)系。據(jù)此建立一種靈敏度高、選擇性好、簡(jiǎn)便快速共振散射法檢測(cè)ATP的新方法。
　　 第四章,在pH7.8 Tris-HCl緩沖液中,三磷酸腺苷的核酸適體(Apt1)與其互補(bǔ)鏈(Apt2)結(jié)合生成雙鏈DNA。此dsDNA不能穩(wěn)定納米銀(AgNP),NaCl可

5、致AgNP聚集,在500nm波長(zhǎng)處產(chǎn)生一個(gè)強(qiáng)共振散射光譜峰。加入ATP后,ATP與dsDNA中的Apt1結(jié)合形成較穩(wěn)定的發(fā)夾結(jié)構(gòu)結(jié)合物并釋放出可穩(wěn)定AgNP的Apt2。隨著ATP濃度增加,500nm處的共振散射值線性減小。該適配體反應(yīng)中未聚集的AgNP-Apt2對(duì)葡萄糖-銅(Ⅱ)微粒反應(yīng)具有較強(qiáng)的催化作用,其產(chǎn)物氧化亞銅微粒在610nm處有一較強(qiáng)共振散射峰。隨著ATP濃度增大,反應(yīng)液中AgNP-Apt2增多,催化作用增強(qiáng),610nm處的