磁性固定化柱塞填充毛細(xì)管電色譜的構(gòu)建、評(píng)價(jià)與應(yīng)用.pdf

1、毛細(xì)管電色譜作為毛細(xì)管電泳和高效液相色譜的雜化分離技術(shù),具有高柱效和高選擇性的優(yōu)勢(shì),在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有著一定的應(yīng)用潛力。然而,毛細(xì)管電色譜柱制備困難,尤其柱塞的制備是一個(gè)挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)的柱塞制備方法包括燒結(jié)法、拉伸法及原位生成法,它們均存在很多缺陷如制備復(fù)雜、易產(chǎn)生氣泡、毛細(xì)管易折斷等。本文利用磁性微球能對(duì)外界磁場(chǎng)做出響應(yīng)而便于操控這一特點(diǎn),發(fā)展了磁性固定化柱塞填充毛細(xì)管電色譜的新方法。具體內(nèi)容如下:
　　 首先,對(duì)磁性微球進(jìn)行表征并

2、對(duì)磁性微球構(gòu)建的柱塞進(jìn)行評(píng)價(jià)。以溶劑熱還原方法制備的磁性微球,粒徑均一,飽和磁化率高達(dá)77.83 emu／g,符合柱塞裝填的要求。對(duì)磁性微球作為柱塞進(jìn)行了評(píng)價(jià),塞子的滲透性良好,機(jī)械強(qiáng)度高。
　　 其次,進(jìn)行以固定化磁性微球?yàn)橹纳V柱的裝填和可行性驗(yàn)證。色譜柱的裝填過程如下:在毛細(xì)管外放置永磁鐵提供磁場(chǎng),然后氣動(dòng)填充磁性微球,磁性微球被外磁場(chǎng)固定進(jìn)而構(gòu)成柱塞,最后裝填色譜填料,制備得到填充電色譜柱?？尚行则?yàn)證方法是通過裝填反

3、相色譜填料包括C18填料和苯基填料,并對(duì)一些中性化合物進(jìn)行分離。結(jié)果表明,柱效能達(dá)到約90,000 N／m,且保留時(shí)間、塔板高度以及峰面積的RSD值均小于燒結(jié)柱塞的相應(yīng)參數(shù)。之后,通過控制不同的填充時(shí)間,制備了不同柱長(zhǎng)的色譜柱,并考查了柱長(zhǎng)對(duì)分離度和電滲流的影響。
　　 最后,考查了這一分離模式在制備色譜、聚合物填充電色譜方面的應(yīng)用。(1)柱塞的填充均勻性,允許采用較大內(nèi)徑的毛細(xì)管進(jìn)行柱的裝填,本文以250μm i.d.毛細(xì)管裝

4、填ODS填料考查了其在制備分離方面的應(yīng)用,其電壓-電流線性度R2達(dá)到0.9986,色譜體系穩(wěn)定；(2)鑒于磁性固定化柱塞的制備無需對(duì)毛細(xì)管進(jìn)行燒結(jié),本文首次提出聚合物填充型毛細(xì)管電色譜的模式,這也是本文的一大創(chuàng)新點(diǎn),并通過填充聚苯乙烯微球分析堿性化合物對(duì)其可行性進(jìn)行了驗(yàn)證。
　　 綜上所述,本文利用磁性微球?qū)ν饧哟艌?chǎng)的響應(yīng)性,構(gòu)建了磁性固定化柱塞填充毛細(xì)管電色譜。采用反相色譜對(duì)其進(jìn)行可行性驗(yàn)證之后,考查了其在制備色譜以及聚合物填