卷枝毛霉對C21和C19甾體及氮雜甾體類藥物中間體的生物轉(zhuǎn)化及相關(guān)化學(xué)合成研究.pdf

1、甾體化合物廣泛分布于自然界及生物體內(nèi),是一類重要的生物活性分子。本論文通過文獻(xiàn)檢索綜述了甾體藥物研究發(fā)展概況,氮雜甾體藥物的發(fā)展以及微生物轉(zhuǎn)化在甾體藥物開發(fā)中的應(yīng)用。以C21、C19甾體為底物從若干土樣中篩選有轉(zhuǎn)化能力的菌種,較為系統(tǒng)地探討了卷枝毛霉Mucor circinelloides lusitanicus對具有4-烯-3-酮或5-烯-3-醇結(jié)構(gòu)的C21、C19甾體的生物轉(zhuǎn)化規(guī)律,并初步優(yōu)化了培養(yǎng)基組成及轉(zhuǎn)化條件。利用化學(xué)方法對部

2、分轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行了衍生物的設(shè)計和合成。合成了一系列重要的氮雜甾體化合物,并研究了卷枝毛霉Mucor circinelloideslusitanicus對其進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化的規(guī)律,得到了系列新型氮雜甾體化合物,并對所合成的化合物進(jìn)行了體外細(xì)胞毒活性評價。具體研究工作如下:
　　 一、從自然界采集的土樣中分離篩選出70余株對甾體底物有轉(zhuǎn)化能力的菌株,其中一株定向性好、轉(zhuǎn)化能力強,對多種甾體底物均有較強的轉(zhuǎn)化作用,經(jīng)16S DNA測序鑒定為

3、Mucor circinelloides lusitanicus。
　　 二、首次研究了Mucor circinelloides lusitanicus對多種C21、C19甾體底物的轉(zhuǎn)化能力,并對轉(zhuǎn)化規(guī)律進(jìn)行了系統(tǒng)分析；首次經(jīng)單晶衍射證實了轉(zhuǎn)化產(chǎn)物19的絕對構(gòu)型。
　　 三、以7α,11α-二羥基妊娠烯醇酮(19)為目標(biāo)產(chǎn)物,考察了培養(yǎng)基的組成及轉(zhuǎn)化條件對轉(zhuǎn)化產(chǎn)率的影響,確定了最佳培養(yǎng)基組成及最佳轉(zhuǎn)化條件。
　　

4、 四、利用化學(xué)方法對部分轉(zhuǎn)化產(chǎn)物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾和改造:
　　 1、利用Claison-Schimidt反應(yīng)設(shè)計合成了轉(zhuǎn)化產(chǎn)物19和21的系列苯亞甲基衍生物,考察了不同反應(yīng)條件對反應(yīng)收率的影響。
　　 2、合成了化合物19的非天然甾體糖苷,并對反應(yīng)條件進(jìn)行了優(yōu)化。體外細(xì)胞毒活性評價表明它們均有明顯抑制腫瘤細(xì)胞生長的作用。
　　 3、對轉(zhuǎn)化產(chǎn)物19結(jié)構(gòu)中的三個羥基進(jìn)行了酰化和選擇性?；芯俊Ｒ陨袭a(chǎn)物均未見文獻(xiàn)報道,體

5、外細(xì)胞毒活性篩選表明對腫瘤細(xì)胞均有較為明顯的抑制作用。
　　 五、以C21、C19甾體為原料合成了A環(huán)、D環(huán)或側(cè)鏈含有氮原子的氮雜甾體,并首次利用Mucor circinelloides lusitanicus對這類化合物進(jìn)行了生物轉(zhuǎn)化研究,得到結(jié)構(gòu)新穎的氮雜甾體化合物。對合成及轉(zhuǎn)化的氮雜甾體衍生物進(jìn)行了體外細(xì)胞毒活性評價,結(jié)果表明部分化合物具有較好的體外腫瘤細(xì)胞抑制作用。
　　 六、以去氫表雄酮和妊娠烯醇酮的酮肟為原料

6、,與各種溴代烷反應(yīng),以較高收率得到了系列未見文獻(xiàn)報道的甾體肟醚化合物,體外細(xì)胞毒評價表明這些化合物均有較好的抑制腫瘤細(xì)胞生長的活性。
　　 總之,通過上述研究工作,首次探討了Mucor circinelloides lusitanicus對多種C21、C19甾體及氮雜甾體底物的轉(zhuǎn)化能力,對于有藥物研發(fā)價值的的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物利用化學(xué)方法再進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾,這對發(fā)現(xiàn)新結(jié)構(gòu)類型的甾體藥物具有潛在應(yīng)用價值。本論文共得到甾體化合物81個,其中未見報