兩株華南毛蕨內(nèi)生真菌及苦玄參抗菌活性成分的研究.pdf

1、藥用植物及其內(nèi)生真菌作為一類具有巨大開發(fā)潛力的資源，現(xiàn)已成為國(guó)內(nèi)外研究者發(fā)掘新型天然抗生素的主要來源。本文以民間傳統(tǒng)藥用植物苦玄參和藥用植物華南毛蕨內(nèi)生真菌作為研究對(duì)象，對(duì)苦玄參的化學(xué)成分及華南毛蕨內(nèi)生真菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，并對(duì)部分化合物進(jìn)行了抑菌活性測(cè)定，為開發(fā)新型抗菌藥物提供新的資源。
　　研究?jī)?nèi)容主要包括：
　　第一章首先對(duì)耐藥菌及其抗生素的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了介紹，接著講述了藥用植物苦玄參和華南毛蕨的化學(xué)成分

2、及其藥理活性的研究，最后綜述了近些年植物內(nèi)生真菌及其次級(jí)代謝產(chǎn)物的多樣性以及在抗菌活性方面的研究概況。
　　第二章對(duì)傳統(tǒng)中藥苦玄參的乙酸乙酯提取物進(jìn)行研究，運(yùn)用硅膠、凝膠Sephadex LH20柱色譜以及重結(jié)晶等手段從中分離得到6個(gè)已知化合物，通過理化性質(zhì)和NMR技術(shù)鑒定了其結(jié)構(gòu)，分別為28-O-acetylbetulin（PFL-1），豆甾醇（PFL-2），白樺脂醇（PFL-3），苦玄參苷IA（PFL-4），苦玄參酮I（PFL

3、-5），苦玄參苷元VI（PFL-6）。其中化合物PFL-1和PFL-2為首次從苦玄參中分離得到。
　　第三章采用組織塊法對(duì)藥用植物華南毛蕨內(nèi)生真菌進(jìn)行分離，從其根、莖、葉及根狀莖中共獲得40株內(nèi)生真菌。以敏感型金黃色葡萄球菌、耐藥型金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌和銅綠假單胞菌作為測(cè)試菌，運(yùn)用瓊脂擴(kuò)散法對(duì)全部?jī)?nèi)生真菌菌株進(jìn)行抑菌活性的初步篩選，對(duì)具有抑菌活性的菌株進(jìn)行微量發(fā)酵，通過薄層層析分析其代謝產(chǎn)物，從中選取兩株代謝產(chǎn)物最為豐富的菌

4、株CYC17和CYC38作為目標(biāo)菌株。
　　第四章對(duì)采用液體培養(yǎng)基發(fā)酵的內(nèi)生真菌菌株CYC17的乙酸乙酯提取物進(jìn)行系統(tǒng)的分離，通過硅膠柱色譜、凝膠Sephadex LH20和重結(jié)晶等分離技術(shù)共獲得7個(gè)已知化合物，利用NMR和MS等波譜學(xué)方法，鑒定為5-羥甲基-2-呋喃醛（CYC17-1），啤酒甾醇（CYC17-2），1-（4-羥基苯基）-2-氨基乙醇（CYC17-3），4-甲基苯甲醛（CYC17-4），二十五碳酸單甘油酯（CYC1

5、7-5），4-氨基苯甲醛（CYC17-6），N-乙基苯胺（CYC17-7）。其中化合物CYC17-3為首次從植物內(nèi)生真菌中分離到，化合物CYC17-4，CYC17-6和CYC17-7為新的天然產(chǎn)物。
　　第五章對(duì)采用大米培養(yǎng)基發(fā)酵的內(nèi)生真菌菌株CYC38的乙酸乙酯提取物進(jìn)行化學(xué)成分的分析，利用硅膠柱層析、凝膠Sephadex LH20等技術(shù)共分離到4個(gè)化合物，通過現(xiàn)代波譜學(xué)技術(shù)對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行表征，分別為啤酒甾醇（CYC38-1），環(huán)

6、-（甘-苯丙）-二肽（CYC38-2），4-（2-羥乙基）-苯酚（CYC38-3），環(huán)-（脯-N-甲基苯丙-纈-異亮-丙）-五肽（CYC38-4），其中化合物CYC38-4為新化合物。
　　第六章采用微量二倍稀釋法對(duì)部分化合物進(jìn)行抑菌活性測(cè)定，以敏感型金黃色葡萄球菌、耐藥型金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、痢疾桿菌、沙門桿菌、大腸埃希菌和傷寒桿菌七種病原菌作為指示菌，結(jié)果表明化合物PFL-3、PFL-4、CYC17-2、CYC17-3