量子點(diǎn)標(biāo)記納米微球金黃色葡萄球菌快速檢測(cè)方法.pdf

1、近年來，金黃色葡萄球菌引起的中毒事件頻頻發(fā)生，傳統(tǒng)的金黃色葡萄球菌檢測(cè)基于微生物培養(yǎng)，雖然相對(duì)準(zhǔn)確，但是耗時(shí)費(fèi)力，因而急需一種可以靈敏、快速、可靠的檢測(cè)金黃色葡萄球菌的方法?，F(xiàn)代快速檢測(cè)方法中，化學(xué)儀器檢測(cè)能夠快速、直觀、靈敏的反映檢測(cè)結(jié)果，實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)，但是，如何將微生物信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓹z測(cè)的化學(xué)信號(hào)就成為檢測(cè)過程中相當(dāng)重要的一步。量子點(diǎn)具有良好的光譜特性和自身優(yōu)點(diǎn)，使其可以替代傳統(tǒng)熒光染料，作為生物熒光探針，本論文使用量子點(diǎn)標(biāo)記IsdA

2、兔抗抗體，采用注射器與濾膜組合的方式檢測(cè)金黃色葡萄球菌，為生物信號(hào)的富集提供了一種方法，有助于快速檢測(cè)。
　　以巰基乙酸為穩(wěn)定劑，對(duì)比一步法和兩步法合成CdTe量子點(diǎn)，一步法明顯優(yōu)于兩步法，最終使用谷胱甘肽為穩(wěn)定劑，一步法合成了熒光強(qiáng)度較佳的CdTe量子點(diǎn)，并進(jìn)行了紅外表征，紅外吸收?qǐng)D譜顯示，GSH-CdTe量子點(diǎn)含有羧基及氨基功能基團(tuán)，可進(jìn)行下一步的生物應(yīng)用。
　　重組表達(dá)IsdA蛋白，純化，免疫兔子和小鼠，制備多克隆抗體

3、，但是抗血清及抗體效價(jià)都不佳。0.1 mM IPTG誘導(dǎo)對(duì)數(shù)期的大腸桿菌BL21(DE3)-pET26b-IsdA，成功地表達(dá)了IsdA重組蛋白，且為可溶性表達(dá);純化IsdA重組蛋白;免疫兔子和小鼠，制備出多克隆抗體;谷胱甘肽免疫量子點(diǎn)紫外全波長(zhǎng)掃描圖顯示，量子點(diǎn)與抗體連接后，量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，表明量子點(diǎn)與抗體連接成功。
　　初步建立了量子點(diǎn)標(biāo)記IsdA兔抗抗體免疫檢測(cè)金黃色葡萄球菌的方法，該法對(duì)金黃色葡萄球菌有明顯的特異性吸