一種耐低pH益生菌Saccharomyces boulardii的篩選及固液態(tài)培養(yǎng).pdf

1、布拉氏酵母（Saccharomyces boulardii）是法國科學(xué)家Henri Boulard20世紀(jì)20年代初期于印尼水果荔枝中分離得到的一株非致病性酵母菌，并將其命名為（Saccharomyces boulardii，S.boulardii）。布拉氏酵母是臨床上作為益生菌藥物治療腸道疾病使用的唯一一株酵母菌，作為微生態(tài)制劑，常被用于治療由抗生素和微生物感染引起的腹瀉，維持胃腸道微環(huán)境平衡。
　　S.boulardii對低p

2、H耐受性較差，動物口服后到達腸道內(nèi)的活菌數(shù)很少，為提高其對低pH的耐受性，本研究通過ARTP誘變技術(shù)和馴化方式來篩選耐酸性的S.boulardii，并在此基礎(chǔ)上對液態(tài)高密度發(fā)酵生產(chǎn)S.boulardii的條件進行了優(yōu)化，以期提高S.boulardii的菌體產(chǎn)量。
　　與液態(tài)發(fā)酵相比，固態(tài)發(fā)酵的具有明顯的優(yōu)勢，固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)生的廢水少，產(chǎn)物濃度高;同時固態(tài)發(fā)酵能夠利用多種價格低廉的工農(nóng)業(yè)殘渣作為底物來生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品，因而固態(tài)發(fā)酵被認(rèn)為

3、是循環(huán)利用可再生性資源的最佳途徑。因此本文還對固態(tài)法發(fā)酵生產(chǎn)S.boulardii進行了初步的研究。
　　得到如下結(jié)果:
　　(1) ARTP誘變后經(jīng)三次初篩得到118株突變株，復(fù)篩得到11株誘變株，經(jīng)過二次復(fù)篩后，最終得到了3株對低pH耐受性有明顯提高的突變株，其中突變株YB-3在pH2.0培養(yǎng)基中培養(yǎng)6h后的存活率為50.83％，相比于對照組的11％提高了462.09％。通過馴化共獲得4株對低pH耐受性有明顯提高的馴化菌

4、，其中馴化株XH-3比于對照組提高了277.78％。
　　(2)通過研究確定5L全自動發(fā)酵罐液態(tài)高密度培養(yǎng)S.boulardii的條件為:接種量為10％，溶氧30％，初始葡萄糖濃度為50g/L，發(fā)酵過程中發(fā)酵液中葡萄糖濃度維持在0.5g/L左右，發(fā)酵初期pH5.0，當(dāng)培養(yǎng)至對數(shù)期時pH改為5.5，30℃培養(yǎng)36h，最終所得細(xì)胞干重為58.79g/L，比初始提高了55.52％。
　　(3)通過研究確定固態(tài)發(fā)酵布拉氏酵母菌的條件