聚合物修飾的葉酸靶向磁性納米傳遞系統(tǒng)的制備及其對鼻咽癌的抑制和成像作用.pdf

1、鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma，NPC)為我國南方地區(qū)常見的轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤。放療是鼻咽癌各個分期的標(biāo)準(zhǔn)療法，但并發(fā)癥較多。鼻咽癌引入化療可提高總生存率，但化療藥也存在靶向性低、副作用大的問題?；蛑委熓侵委熌[瘤的另一種有效策略，但基因的如何傳遞至靶細胞也是一個重要挑戰(zhàn)。
　　利用納米技術(shù)將藥物與基因載于納米粒子內(nèi)部，在體內(nèi)靶向進入腫瘤細胞后再將基因與藥物釋放可以有效解決上述問題。本課題組前期研究表明，葉酸

2、受體在鼻咽癌細胞內(nèi)高表達，并在此基因上合成了葉酸靶向載順鉑磁性納米粒子，可靶向殺傷鼻咽癌細胞。但該磁性納米粒子存在攝取效率低的問題。本研究在前期研究的基礎(chǔ)上制備了兩種葉酸靶向磁性納米載體，以期解決上述問題。
　　制備陽離子聚合物mPEG-PLL-FA，并通過靜電相互作用包裹帶負電的載順鉑的磁性納米粒子ASA-CDDP-MNP，并吸附含有抑癌基因TFPI2質(zhì)粒，合成一種葉酸靶向載順鉑和TFPI2基因的多功能靶向磁性納米共傳遞系統(tǒng)mP

3、EG-PLL-FA-TFPI2-ASA-MNPs-CDDP。利用核磁氫譜、動態(tài)光衍射、低溫透射電鏡、磁強計檢測磁性納米共傳遞系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)及理化特性;血細胞凝集實驗、MTT法、瓊脂糖凝膠電泳分別檢測其生物相容性及對DNA的結(jié)合和保護能力;普魯氏藍染色、熒光顯微鏡、Western blot分別檢測磁性納米共傳遞系統(tǒng)的靶向性及基因轉(zhuǎn)染效率;MTT、劃痕實驗、流式細胞術(shù)、平板克隆形成實驗檢測磁性納米共傳遞系統(tǒng)對鼻咽癌細胞HNE-1的靶向抑制作用;

4、MRIT2加權(quán)成像檢測磁性納米共傳遞系統(tǒng)在細胞內(nèi)的成像效果。結(jié)果顯示，磁性納米共傳遞系統(tǒng)具有良好的生物相容性、優(yōu)良的靶向性、對鼻咽癌細胞HNE-1有較強的抑制作用和成像效果。但該體系存在轉(zhuǎn)染效率低的問題。
　　為了克服這一問題，我們用葉酸靶向修飾的季銨陽離子化羥乙基纖維素包裹磁性納米粒子并吸附質(zhì)粒DNA，形成復(fù)合物catHEC-FA@SPIO/pDNA。通過核磁共振氫譜、紅外光譜、紫外光譜、熱失重、X射線衍射、磁化曲線、透射電鏡等

5、手段對產(chǎn)物進行表征;MTT法、瓊脂糖凝膠電泳分別檢測其生物相容性及對DNA的結(jié)合和保護能力;普魯氏藍染色、熒光顯微鏡、Western blot分別檢測磁性納米粒靶向性及基因轉(zhuǎn)染效率;MTT、流式細胞術(shù)、檢測磁性納米粒對鼻咽癌細胞HNE-1的靶向抑制作用;MRIT2加權(quán)成像檢測磁性納米共傳遞系統(tǒng)在細胞內(nèi)的成像效果。結(jié)果顯示，catHEC-FA@SPIO/pDNA具有良好的生物相容性、優(yōu)良的靶向性、較高的基因轉(zhuǎn)染效率，對鼻咽癌細胞HNE-1