兩例亞細(xì)胞器定位性近紅外熒光探針.pdf

1、熒光生物成像技術(shù)是在亞細(xì)胞層次展現(xiàn)生物組織形貌的一個(gè)很有力的方法，在熒光成像中，最基本也是最關(guān)鍵的是熒光探針?；跓晒馓结樀臒晒夥治龇ㄓ捎谄涓哽`敏性、高選擇性、易于操作、實(shí)時(shí)檢測(cè)、無(wú)損檢測(cè)以及對(duì)生物樣品具有良好的相容性的特點(diǎn)已廣泛應(yīng)用于對(duì)各種物種的檢測(cè)中。近年來(lái)，熒光成像技術(shù)迅猛發(fā)展，其已經(jīng)成為對(duì)活細(xì)胞和動(dòng)物體內(nèi)各種微小物種進(jìn)行檢測(cè)和成像不可或缺的工具。
　　肼是一種大家熟知的高能推進(jìn)劑，其廣泛應(yīng)用于工農(nóng)業(yè)的各個(gè)領(lǐng)域，但肼具有致命

2、的毒性。由此，開(kāi)發(fā)可靠、靈敏的分析手段用于肼的精確檢測(cè)是非常重要的。我們基于七甲川菁染料甲川鏈上π共軛體系的調(diào)節(jié)，合成了一例定位于線粒體且能在近紅外光區(qū)選擇性比率檢測(cè)肼的熒光探針Cy7A。Cy7A對(duì)肼有比較好的響應(yīng)，在肼的作用下，Cy7A能被選擇性地肼解，其吸收和發(fā)射光譜均會(huì)發(fā)生很大的變化(最大吸收波長(zhǎng)從784 nm藍(lán)移到520 nm，最大發(fā)射波長(zhǎng)從810 nm藍(lán)移到582 nm)。其他離子和小分子對(duì)肼的檢測(cè)不會(huì)有明顯干擾，Cy7A對(duì)肼

3、的檢測(cè)限達(dá)到0.81 ppb。Cy7A具有可忽略的細(xì)胞毒性，且定位于細(xì)胞中的線粒體，這對(duì)肼在細(xì)胞層次的毒理學(xué)研究具有一定的促進(jìn)意義。Cy7A能用于對(duì)實(shí)際水樣中肼定量檢測(cè)，還能對(duì)細(xì)胞中的肼進(jìn)行比率成像，而且首次通過(guò)兩個(gè)通道的熒光信號(hào)變化監(jiān)測(cè)了小鼠體內(nèi)的肼。
　　溶酶體及與溶酶體相關(guān)的細(xì)胞器由真核細(xì)胞中呈酸性的囊狀結(jié)構(gòu)組成，其內(nèi)部的pH為4.0-5.0，它們其中包含了大量的具有各種功能的酶和分泌蛋白。利用雙光子激發(fā)的雙光子熒光成像技術(shù)

4、能真實(shí)地展現(xiàn)溶酶體在活細(xì)胞和組織中的分布，是生命科學(xué)研究中的一個(gè)十分重要的工具。我們合成了一例近紅外雙光子染料PBC，PBC具有明顯的溶劑化效應(yīng)和較好的光穩(wěn)定性，PBC的最大發(fā)射波長(zhǎng)能達(dá)到近紅外并且具有很大的Stokes shift(大于170 nm)。PBC對(duì)對(duì)活細(xì)胞（不管是癌細(xì)胞還是正常細(xì)胞）均有比較好的染色效果。將PBC分別與商業(yè)化的溶酶體定位染料Lyso Tracker Green和商業(yè)化的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位染料ER Tracker G