LBL自組裝法制備酶?jìng)鞲衅?pdf

1、LBL(Layer-by-Layer)分子沉積法(MD)是一種以帶電聚合物之間的靜電作用力為驅(qū)動(dòng)力的逐層交替沉積制備有序分子膜的一種方法,它具有操作方便,條件溫和,并能從納米水平設(shè)計(jì)和控制膜的排列和厚度,被廣泛的應(yīng)用于生物化學(xué)領(lǐng)域.由生物技術(shù)與電子學(xué)相結(jié)合發(fā)展而成的生物傳感器,使人們找到了一種探測(cè)化學(xué)等變化的新型高效探測(cè)元器件,它是一種用于物質(zhì)微量分析以及分子水平快速檢測(cè)的方法,在生物醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)和生物技術(shù)等領(lǐng)域必不可少的一種先進(jìn)的檢

2、測(cè)方法與監(jiān)控方法.該文采用LBL分子沉積法分別制備葡萄糖氧化酶(GOD)和辣根過氧化物酶(HRP)生物活性膜.實(shí)驗(yàn)通過原子力顯微鏡(AFM)表征手段從微觀角度研究了通過LBL分子沉積法組裝的酶膜的表面形貌,觀察了分子沉積的形態(tài)以及變化和規(guī)律性;同時(shí)還通過紫外—可見光吸收光譜法(UV-vis)跟蹤分子沉積的過程,并研究了組裝溶液的濃度和組裝時(shí)間對(duì)沉積量的影響.實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明LBL分子沉積法是一種均勻的分子沉積的技術(shù),同時(shí)是動(dòng)態(tài)平衡過程,到

3、一定的時(shí)間,組裝的量達(dá)到平衡.實(shí)驗(yàn)通過酶分子和帶相反電荷的聚合物的交替沉積來制備葡萄糖氧化酶(GOD)電極,以甲酸二茂鐵為電子媒介,能在0.33v的電位下,通過二茂鐵的氧化峰電流的變化檢測(cè)葡萄糖的濃度.隨著組裝的GOD層數(shù)的增加,電極的催化性能提高;當(dāng)層數(shù)增加到4層以后,催化活性趨于穩(wěn)定.GOD修飾電極的檢測(cè)靈敏度和pH有關(guān),在pH大于7.0時(shí),GOD酶電極對(duì)葡萄糖的靈敏度最好且變化不大.電極的重現(xiàn)性能良好.采用分子沉積法制備的辣根過氧